ANF ​​320, tipe homogen

Share Tweet Pin it

Selamat siang! Setahun yang lalu, anak perempuan (19) menderita arthritis reaktif, seperti yang dilakukan untuk yersiniosis akut (dikonfirmasi, IgA tinggi, klinik juga dirawat di Nasonov Research Institute). Sehubungan dengan pernyataan diagnosis mereka lulus semua tes yang menyertainya, menunjukkan dokter. Antibodi terhadap DNA adalah 1,04; ANF ​​1: 320. Dokter tidak mengatakan apapun tentang ini. Setahun kemudian, saya khawatir tentang ANF. Sekarang semua orang telah berlalu, kami menunggu. Semua tes (total darah, c-reac. Protein, semua biokimia, urin) normal. Antibodi untuk dna 0,74. ANF ​​belum siap. Tiga tahun lalu, di musim panas, ada ruam di dahi dengan remah-remah; Ada kepekaan terhadap matahari, mungkin ada titik di dada, lewat. Saya tidak bisa berkonsentrasi pada hidup dan bekerja dari kegembiraan, sambil menunggu ANF. Katakan padaku, tolong, apa yang harus kita lakukan jika - apakah itu positif? Kami tidak tinggal di Moskow, tidak ada kepercayaan pada rheumatologists kami sejak tahun lalu. Jika kita pergi berobat, kita akan pergi ke Moskow. Terima kasih sebelumnya!

Pada layanan AskMedical, konsultasi rheumatologist online tersedia untuk setiap masalah yang Anda hadapi. Pakar medis memberikan saran sepanjang waktu dan gratis. Ajukan pertanyaan Anda dan dapatkan jawabannya segera!

Faktor antinuklear pada sel-sel HEp-2

Metode penelitian menggunakan sel epitel manusia HEp-2, yang memungkinkan untuk mendeteksi antibodi antinuklear, adalah salah satu penanda penyakit jaringan ikat sistemik.

Sinonim Rusia

ANF, antibodi antinuklear, antibodi antinuklear (ANA).

Sinonim bahasa Inggris

Antinuclear Antibodies (ANA), Hep-2 Substrate, ANA-Hep2, Pendeteksian Anti Nuclear Antibodi Fluoresen (FANA).

Metode penelitian

Imunofluoresensi tidak langsung.

Biomaterial apa yang dapat digunakan untuk penelitian?

Bagaimana cara mempersiapkan diri untuk belajar?

Jangan merokok selama 30 menit sebelum menyumbangkan darah.

Informasi umum tentang penelitian

Definisi faktor antinuklear (ANF) adalah "standar emas" untuk mendeteksi antibodi antinuklear (ANA) dan diagnosis penyakit autoimun.

Patogenesis penyakit sistemik dari jaringan ikat (SSTF) terkait erat dengan gangguan dalam sistem kekebalan dan peningkatan produksi antibodi terhadap struktur selnya sendiri. Autoantibodi terhadap komponen inti sel - antibodi antinuklear - berinteraksi dengan asam nukleat dan protein nukleus, antigen sitoplasma, yang memanifestasikan dirinya dalam perubahan peradangan pada jaringan dan organ, nyeri pada persendian dan otot, kelelahan yang ditandai, penurunan berat badan, perubahan kulit. ANA ditemukan pada banyak penyakit autoimun, tetapi paling khas dari lupus eritematosus sistemik (SLE). ANA ditemukan pada lebih dari 90% pasien dengan penyakit sistemik dari jaringan ikat, saat ini sekitar 200 varietas dijelaskan, yang disatukan oleh satu nama - faktor antinuklear.

Ketika menentukan ANF dengan metode fluoresensi tidak langsung, garis sel epitelial transplantasi pada manusia adenokarsinoma HEp-2 lebih sering digunakan. Hep-2 sel adalah substrat yang sangat nyaman untuk penelitian laboratorium, karena mereka memiliki inti besar dan tumbuh di kaca dalam satu lapisan. AHA terdeteksi dengan mengikat sel-sel HEp-2 ke antigen intraseluler.

Dalam penelitian ini, sel-sel Hep-2 epitel tumbuh pada gelas, diperbaiki dan diinkubasi dengan serum pasien yang diencerkan. Setelah penghilangan serum berlebih, sel-sel diinkubasi dengan antibodi berlabel fluoresen, kemudian dicuci lagi dan diperiksa dengan mikroskop fluoresens. Pada saat yang sama, titer antibodi dan jenis luminesens ditentukan. Titer lebih dari 1: 160 dianggap diagnostik. Dengan eksaserbasi penyakit rematik, melebihi 1: 640, dan selama remisi menurun menjadi 1: 160-1: 320. Semakin banyak antibodi, semakin tinggi titer. Berdasarkan jenis luminesensi, Anda dapat menetapkan target untuk antibodi antinuklear, yang sangat penting secara klinis dan menentukan taktik pemeriksaan lebih lanjut terhadap pasien. Yang utama adalah tipe pewarnaan inti perifer, granular (kecil / besar), nukleolar, sentromerik dan sitoplasma. Setiap jenis cahaya memiliki fitur yang sangat khas yang memungkinkan Anda membedakan satu opsi dari yang lain.

Pewarnaan homogen (difus) dikaitkan dengan keberadaan antibodi untuk DNA beruntai ganda, histon, dan merupakan karakteristik SLE dan lupus eritematosus.

Luminescence perifer disebabkan oleh distribusi perifer kromatin dalam nukleus, berhubungan dengan antibodi terhadap DNA dan spesifik untuk SCR. Jenis luminescence ini penting untuk membedakan dari pewarnaan membran nuklir, yang terjadi pada penyakit-penyakit hati autoimun.

Pewarnaan granular (bercak-bercak, retikulasi) paling sering terjadi dan paling tidak spesifik, terdeteksi pada banyak penyakit autoimun. Dalam hal ini, autoantigen adalah kompleks nukleoprotein dalam nukleus (Sm, U1-RNP, SS-A, SS-B antigen dan PCNA).

Titer ANF yang sangat tinggi dengan jenis luminescence granular yang besar sering menunjukkan penyakit campuran dari jaringan ikat.

Nuklear (nukleon) pewarnaan karena produksi antibodi terhadap komponen nukleolus (RNA polimerase-1, NOR, U3RNP, PM / Scl), terdeteksi pada skleroderma, penyakit Sjogren. ANA kadang-kadang meningkat dengan penyakit endokrin (diabetes tipe 1, tiroiditis, tirotoksikosis, sindrom polyendocrine), penyakit kulit (psoriasis, pemfigus), selama kehamilan, setelah transplantasi organ dan jaringan, pada pasien hemodialisis.

Luminescence sentromerik muncul dengan adanya antibodi terhadap sentromer kromosom dan merupakan karakteristik bentuk skleroderma, sindrom CREST.

Jenis luminesens sitoplasma dikaitkan dengan antibodi terhadap tRNA sintetase, khususnya untuk Jo-1, yang merupakan karakteristik dermatomiositis dan polimositis. Jenis pewarnaan ini juga ditentukan dengan adanya antibodi terhadap komponen lain dari sitoplasma pada hepatitis autoimun, sirosis bilier primer.

Deteksi simultan berbagai jenis luminescence menunjukkan adanya berbagai jenis antibodi.

Pada orang sehat, luminescale kecil dapat dideteksi pada titer rendah, sedang atau tinggi ANA, tetapi biasanya jenis luminescence yang berbutir kasar atau homogen tidak dapat ditentukan.

Tergantung pada hasil evaluasi jenis luminescence, taktik lebih lanjut sedang dikembangkan untuk mengobati pasien dan studi tambahan dijadwalkan untuk memperjelas spektrum ANA.

Untuk apa penelitian itu digunakan?

  • Untuk diagnosis penyakit sistemik dari jaringan ikat.
  • Untuk diagnosis banding penyakit rematik.
  • Untuk menilai efektivitas terapi penyakit autoimun.
  • Untuk memantau jalannya penyakit jaringan ikat sistemik.

Kapan sebuah studi dijadwalkan?

  • Dengan gejala penyakit autoimun (demam berkepanjangan, nyeri sendi, kelelahan, kehilangan berat badan, perubahan pada kulit).
  • Ketika mendeteksi perubahan karakteristik penyakit jaringan ikat sistemik (peningkatan ESR, tingkat protein C-reaktif, beredar kompleks imun).

Apa hasil yang dimaksud?

Alasan meningkatkan titer ANF di sel HEp-2:

  • systemic lupus erythematosus (pada 95% kasus),
  • dermatomiositis / polymyositis,
  • skleroderma sistemik (dalam 60-90% kasus),
  • Sindrom Sjogren (dalam 40-70% kasus)
  • penyakit jaringan ikat campuran (sindrom Sharpe),
  • Sindrom Raynaud
  • diskoid lupus,
  • obat lupus,
  • rheumatoid arthritis,
  • necrotizing vasculitis,
  • mononukleosis menular,
  • leukemia
  • neoplasma ganas (terutama limfoma),
  • miastenia berat
  • endokarditis infektif,
  • hepatitis autoimun kronis,
  • primary biliary cirrhosis
  • tuberkulosis,
  • pneumoconiosis,
  • fibrosis paru interstisial.

Faktor antinuklear (HEp-2)

Pasien yang terhormat! Katalog analisis saat ini sedang dalam proses diisi dengan informasi dan mengandung jauh dari semua penelitian yang dilakukan oleh pusat kami. Cabang-cabang dari Pusat Endokrinologi melakukan lebih dari 700 jenis tes laboratorium. Anda dapat menemukan daftar lengkapnya di sini.

Tolong, tentukan informasi tentang biaya layanan dan persiapan untuk analisis oleh telepon (812) 344-0-344, +7 953 360 96 11. Ketika mengambil tes darah, silakan mempertimbangkan biaya mengambil biomaterial.

Siap untuk registrasi: 0 analisis

  • Kode Studi: 331
  • Waktu eksekusi: 5-6 hari (kecuali Sabtu, Minggu)
  • Analisis biaya 960 rubel.

Metode penelitian menggunakan sel epitel manusia adalah HEp-2, yang memungkinkan deteksi antibodi antinuklear, dianggap sebagai salah satu penanda yang disebut penyakit jaringan ikat sistemik.

Deteksi faktor antinuklear (atau ANF) adalah semacam "standar emas" untuk mendeteksi antibodi antinuklear (atau ANA) dan pengakuan penyakit autoimun.

Mekanisme patogenetik penyakit sistemik dari jaringan ikat (atau NWPC) berkorelasi dengan gangguan dalam fungsi sistem kekebalan tubuh dan meningkatkan produksi antibodi terhadap struktur sel mereka sendiri. Yang disebut autoantibodi terhadap komponen inti sel - antibodi antinuklear - berinteraksi dengan asam nukleat, protein nukleus, antigen sitoplasma, yang menyebabkan perubahan inflamasi di berbagai jaringan, organ, otot dan nyeri sendi, perubahan kulit, penurunan berat badan, kelelahan ditandai. antibodi antinuklear terdeteksi di banyak penyakit yang bersifat autoimun, tetapi yang paling khas pada lupus eritematosus sistemik (atau SLE). ANA terdaftar di lebih dari 90% orang yang memiliki NWPC; Hingga saat ini, sekitar 200 varietas telah dideskripsikan, disatukan oleh satu nama "faktor antinuklear".

Ketika faktor antinuklear terdeteksi oleh metode fluoresensi tidak langsung, garis sel epitelial transplantasi pada adenokarsinoma laring manusia (atau HEp-2) lebih sering digunakan. Sel-selnya merupakan substrat yang sangat nyaman untuk penelitian laboratorium, karena mereka memiliki inti yang relatif besar, dan juga tumbuh dalam satu lapisan pada kacamata. Faktor antinuklear ditemukan dalam pembentukan ikatan dengan antigen intraseluler sel ner-2.

Dalam penelitian ini, sel-sel HEp-2 ditumbuhkan pada gelas, mengalami fiksasi dan diinkubasi dengan serum pasien yang diencerkan. Setelah penghilangan serum berlebih, sel-sel diinkubasi dengan antibodi berlabel fluoresen, suatu bidang yang lagi dicuci dan kemudian diperiksa menggunakan mikroskop fluoresen, dengan penentuan titer antibodi, serta jenis luminescence. Nilai diagnostik dianggap sebagai titer lebih dari 1: 160. Dalam kasus eksaserbasi penyakit rematik, titer melebihi 1: 640, selama remisi menurun ke kisaran 1: 160-1: 320. Dengan meningkatnya jumlah antibodi, titer juga meningkat. Jenis luminescence memungkinkan untuk menetapkan target untuk antibodi antinuklear; Ini penting dari sudut pandang klinis dan dapat menentukan taktik untuk pemeriksaan lebih lanjut dari pasien. Memancarkan berbagai jenis pewarnaan inti (misalnya perifer, granular, nukleolus, centromeric, sitoplasma).

Untuk setiap jenis luminescence ada fitur yang sangat khas yang memungkinkan untuk membedakan mereka dari satu sama lain.

Pewarnaan homogen (difus) berhubungan dengan adanya antibodi terhadap asam deoksiribonukleat ganda (DNA), histones, dan melekat pada lupus eritematosus sistemik dan lupus eritematosus.

Pendaran perifer ditentukan oleh distribusi perifer dalam inti kromatin, berhubungan dengan antibodi terhadap asam deoksiribonukleat, dan spesifik untuk lupus eritematosus sistemik. Jenis luminescence ini penting untuk membedakan dari pewarnaan membran nukleus, yang terjadi pada patologi autoimun hati.

Pewarnaan granular paling sering ditemukan, paling tidak spesifik, ditemukan pada banyak penyakit yang bersifat autoimun. Dalam hal ini, autoantigen adalah kompleks nukleoprotein dalam nukleus (Sm, U1-RNP dan beberapa lainnya).

Titer yang sangat tinggi dari faktor antinuklear dengan jenis luminescence granular yang besar sering menunjukkan penyakit campuran dari jaringan ikat.

Pewarnaan nuklear (atau nukleolar) disebabkan oleh pembentukan antibodi terhadap komponen nukleolus (misalnya, RNA polimerase-1, NOR, beberapa lainnya); ditemukan dalam kasus scleroderma, dengan penyakit Sjogren. Pembentukan antibodi antinuklear jumlah kasus meningkat dalam beberapa patologi endokrin (seperti diabetes tipe pertama, peradangan kelenjar tiroid, hipertiroidisme, beberapa sindrom endokrin), lesi kulit (pemfigus, psoriasis), selama kehamilan, setelah transplantasi jaringan dan organ, pada pasien hemodialisis.

Luminescence sentromerik terdeteksi ketika antibodi hadir terhadap kromosom sentromer; karakteristik bentuk tertentu scleroderma, yang disebut sindrom CREST.

Jenis cahaya sitoplasma. Ini terkait dengan antibodi terhadap tRNA sintetase, terjadi pada dermatomiositis, polymyositis. Jenis pewarnaan ini juga terdeteksi dengan adanya antibodi terhadap komponen lain dari sitoplasma dalam kasus hepatitis autoimun, dengan sirosis bilier primer.

Deteksi berbagai jenis luminescence pada saat yang sama menunjukkan adanya berbagai jenis antibodi.

Dalam studi tentang individu yang sehat, luminescale kecil dapat dideteksi dalam kasus titer antibodi antinuklear rendah, sedang atau tinggi, tetapi jenis luminescence yang kasar atau homogen tidak dapat dideteksi.

Setelah mengevaluasi jenis luminescence, taktik pengobatan lebih lanjut ditentukan, studi tambahan dapat dilakukan untuk memperjelas spektrum antibodi antinuklear.

30 menit sebelum mengambil darah berhenti merokok.

Hanya beberapa proses, kondisi dan penyakit yang menjadi tujuan penunjukan analisis ini.

Sebuah studi tentang faktor antinuklear (HEp-2) dapat dilakukan untuk mengidentifikasi penyakit jaringan ikat sistemik (SSTVs); untuk tujuan diferensiasi diagnostik penyakit rematik; untuk menilai efektivitas pengobatan penyakit autoimun; untuk memantau perkembangan FTAA.

Di bawah ini adalah beberapa proses, kondisi, dan penyakit yang memungkinkan faktor antinuklear (HEp-2) ditemukan. Harus diingat bahwa hasil penelitian tidak selalu menjadi kriteria yang cukup spesifik dan mencukupi untuk membentuk suatu kesimpulan. Informasi yang diberikan sama sekali tidak melayani tujuan diagnosis diri dan perawatan diri. Diagnosis akhir hanya ditentukan oleh dokter ketika menggabungkan data yang diperoleh dengan hasil metode penelitian lainnya.

Kemungkinan alasan untuk meningkatkan titer antinuclear faktor: Sistem lupus erythematosus (SLE), skleroderma sistemik, dermatomyositis atau polymyositis, penyakit jaringan ikat campuran (disebut penyakit jaringan ikat campuran), sindrom Sjogren, lupus, sindrom Raynaud, rheumatoid arthritis, dosis erythematosus, infeksi mononucleosis, necrotizing vasculitis, keganasan tertentu (misalnya limfoma, leukemia), endokarditis infeksi, myasthenia gravis, primary biliary cirrhosis, auto kronis hepatitis kebal, pneumoconiosis, fibrosis paru interstisial, tuberkulosis.

Faktor-faktor yang dapat mempengaruhi hasil penelitian

Hasil positif palsu - mungkin terkait dengan poin-poin berikut: usia subjek lebih dari 60-65 tahun (dicatat dalam 10-37% dari semua kasus); berbagai macam obat, yang dapat menyebabkan munculnya obat lupus, garam emas dan sejumlah lainnya). Penggunaan glukokortikosteroid (misalnya, prednison, deksametason, metipred) kadang-kadang dapat menyebabkan hasil negatif palsu.

Dalam 5% dari semua kasus lupus eritematosus sistemik, adalah mungkin untuk mendapatkan hasil negatif dari penelitian (ANF-negative systemic lupus erythematosus). Dalam kasus seperti itu, penentuan antibodi terhadap antigen SS (Ro) diperlukan untuk memperjelas diagnosis.

Hasil positif dari penelitian tidak selalu berfungsi sebagai bukti mutlak penyakit autoimun. Dengan demikian, pada sejumlah individu yang sehat (3-13%), titer faktor antinuklear meningkat dan dapat mencapai 1: 320.

Hasil penelitian harus ditafsirkan bersama dengan data klinis, serta dengan indikator laboratorium lainnya.

Jika hasil positif diperoleh, penentuan spesifisitas antibodi antinuklear oleh imunoblot dianjurkan.

Faktor antinuklear: apa analisis menunjukkan

Dalam dunia kedokteran, ada kondisi khusus di mana sel pertahanan mulai menyerang tubuh mereka sendiri, penyakit autoimun. Sebagian besar penyakit ini terjadi dalam bentuk kronis dan berpotensi berbahaya, karena dapat menyebabkan masalah serius dalam operasi organ dan sistem tertentu. Ini sering mengarah pada kecacatan dan konsekuensi serius.

Kemungkinan pengobatan modern sangat bagus, dan mungkin untuk mengidentifikasi semua perubahan ini pada tahap awal dan memulai pengobatan secara tepat waktu. Salah satu studi yang paling sering digunakan untuk mendiagnosis kondisi ini adalah analisis antibodi antinuklear, disingkat sebagai ANA.

Deskripsi

Analisis ANA adalah metode diagnosis yang paling informatif dalam kasus kecurigaan adanya gangguan autoimun, terutama penyakit jaringan ikat. Tetapi ada juga keberadaan antibodi dalam proses ganas, infeksius, dll.

Sensitivitas antibodi terbesar terhadap penyakit seperti itu:

  1. Systemic lupus erythematosus.
  2. Rheumatoid arthritis.
  3. Penyakit Sjogren.

Sel-sel ini juga dapat ditemukan di sekitar sepertiga dari pasien dengan hepatitis kronis.

Peningkatan indikator dipengaruhi oleh berbagai faktor. Secara khusus, malaria, leukemia, mononukleosis menular dan banyak lagi.

Bersama dengan identifikasi ANA saat melakukan penelitian, penting untuk menilai tingkat imunoglobulin seperti IgA, IgM, IgG. Identifikasi komponen-komponen ini dalam darah pasien dapat menunjukkan kemungkinan lebih besar munculnya patologi rematik dan penyakit kolagen.

Jika hubungan antara isi antibodi dan gejala tidak diidentifikasi, keberadaan ANA dalam darah menunjukkan pilihan strategi pengobatan yang benar. Pengawetan kredit tinggi berkepanjangan menunjukkan keadaan yang mengecewakan. Pengurangan judul-judul ini menunjukkan pengampunan patologi, apalagi tentang kematian yang cepat.

Namun, antibodi ini dapat dideteksi dalam persentase tertentu dari individu yang sehat dan titer ANF dapat melampaui batas normal.

Indikasi untuk penelitian

Imunolog dan spesialis tesertifikasi memiliki hak untuk menginterpretasikan hasil, tergantung pada area kerusakan.

Indikasi untuk penelitian ini adalah:

  1. Deteksi penyakit sistemik, serta gangguan autoimun tanpa gejala yang jelas.
  2. Deteksi lupus eritematosus sistemik dan studi komprehensifnya, pemilihan strategi pengobatan.
  3. Deteksi obat lupus.
  4. Kehadiran manifestasi klinis tertentu, seperti, demam berkepanjangan tanpa alasan yang jelas, kerapuhan sendi dan nyeri mereka, ruam kulit, nyeri otot, tingkat kelelahan yang tinggi.
  5. Tanda-tanda manifestasi gejala penyakit campuran: penyakit pada kulit dan organ dalam, status konvulsif, peningkatan indikator suhu.
  6. Obat resep disopyramide, hydralazine, dan banyak lagi.

Jenis pemeriksaan

Deteksi antibodi dalam darah dapat dilakukan dengan dua cara. Teknik pertama disebut mikroskopi imunofluoresensi tidak langsung. Di hadapan antibodi, mereka akan mengikat antigen nuklir spesifik. Elemen digunakan yang bersinar dalam spektrum cahaya yang terpisah. Di bawah mikroskop, menjadi mungkin untuk mengidentifikasi jenis luminescence.

Baca lebih lanjut tentang apa sindrom myofascial dan bagaimana ia dirawat di sini.

Metode ini diakui sebagai yang terbaik untuk menentukan nilai antibodi antinuklear. Juga, teknik ini menerima nama kedua - lupus test strip.
Metode kedua diagnosis adalah analisis kekebalan enzim. Artinya terletak pada fakta bahwa antibodi yang ada di dalam darah, saling berhubungan dengan antigen dan sebagai hasilnya solusi mengubah rona.

Penting untuk menekankan bahwa skrining positif tidak bisa menjadi satu-satunya alasan untuk membuat diagnosis.

Pastikan untuk menetapkan studi tambahan, yang memungkinkan untuk menentukan penyakit pada tahap awal. Dalam kasus penapisan negatif, dapat diasumsikan bahwa tidak ada pelanggaran. Namun, ini tidak mengesampingkan adanya penyakit autoimun pada pasien.

Darah disumbangkan untuk faktor antinuklear bersama dengan tes lain. Tetapi hasil akhirnya dipengaruhi oleh asupan obat-obatan tertentu dan adanya pada pasien patologi pada jalur yang kronis dan akut. Seorang ahli akan membantu Anda untuk memilah semua momen-momen ini, maka ia akan menetapkan diagnosis yang benar dan akan menyarankan bagaimana untuk melanjutkan.

Interpretasi hasil

Dalam studi kualitatif, hasil berikut dapat diperoleh:

  • di bawah 0,9 —negatif, norma;
  • nilai dari 0,9 hingga 1,1 diragukan;
  • lebih dari 1,1 - positif.

Pasien sering mengajukan pertanyaan: faktor antinukleus 1: 160 adalah normal atau tidak? Apa pun yang lebih tinggi dari ini berada di luar kisaran normal.

Lihat juga: Cara mengobati epidurit spinal

Perlu juga diingat bahwa persiapan yang tidak benar dan beberapa nuansa dapat mempengaruhi hasil:

  1. Pelanggaran prinsip persiapan.
  2. Ketidakpatuhan dengan aturan algoritme injeksi oleh spesialis medis.
  3. Penerimaan obat-obatan tertentu.
  4. Diagnosis uremia juga dapat mendistorsi hasil.

Penyaringan positif untuk antibodi anti-nuklir dapat menunjukkan adanya penyakit seperti lupus eritematosus, patologi pankreas, kelainan kelenjar tiroid, patologi hati, sindrom Sjogren, kerusakan jaringan paru-paru, persendian, dan banyak lagi. Hanya dokter yang dapat menginterpretasikan hasil dan meresepkan perawatan lebih lanjut.

Dalam proses decoding penelitian ini, harus diingat bahwa dalam kasus nilai negatif, kemungkinan adanya penyakit tidak dikecualikan.

Cara mengaplikasikan krim Alezan untuk sendi dijelaskan secara rinci di sini.

Jika skrining untuk antibodi ini positif tanpa disertai gejala, pemeriksaan yang lebih menyeluruh diperlukan.

Cara mempersiapkan diri untuk belajar

Bahan untuk analisis adalah darah vena.

Fitur persiapan:

  1. Bahan diambil saat perut kosong. Setelah makan terakhir, setidaknya 8 jam harus berlalu. Dimungkinkan untuk meminum air yang disaring berkualitas tinggi tanpa gas.
  2. Pre-dua jam sebelum pengambilan sampel darah, merokok dan penggunaan produk nikotin dikeluarkan.
  3. Beberapa hari sebelum manipulasi, konsumsi minuman beralkohol dan minuman energi dikecualikan, dilarang melakukan kerja fisik yang berat.
  4. Dalam dua minggu, asupan obat-obatan, khususnya, hormon, antibiotik, dan obat-obatan lainnya, harus benar-benar dikesampingkan.
  5. Untuk memvalidasi penelitian, penting untuk mengulang skrining setelah dua minggu.

Harapkan hasil dalam waktu 48 jam setelah prosedur. Dimungkinkan untuk menerima data secara darurat dalam waktu 3 jam.

Kesimpulan

Dari artikel ini, Anda belajar apa darah yang diambil untuk analisis ANF dan apa itu. Tidak semua antibodi dapat dideteksi ketika melakukan penelitian ini karena kelimpahannya. Untuk meminimalkan kemungkinan munculnya hasil yang tidak dapat diandalkan, perlu untuk melakukan studi komprehensif bersama dengan metode lain.

Kurangnya titer tinggi ANF tidak berarti bahwa pasien tidak memiliki penyakit sistemik, hanya sebagai hasil positif tidak bisa menjadi argumen tegas untuk membuat diagnosis.

Tes darah dan apa itu

Faktor antinuklear pada sel-sel HEp-2

Faktor antinuklear pada sel-sel HEp-2

Metode penelitian menggunakan sel epitel manusia HEp-2, yang memungkinkan untuk mendeteksi antibodi antinuklear, adalah salah satu penanda penyakit jaringan ikat sistemik.

ANF, antibodi antinuklear, antibodi antinuklear (ANA).

Antinuclear Antibodies (ANA), Hep-2 Substrate, ANA-Hep2, Pendeteksian Anti Nuclear Antibodi Fluoresen (FANA).

Imunofluoresensi tidak langsung.

Biomaterial apa yang dapat digunakan untuk penelitian?

Bagaimana cara mempersiapkan diri untuk belajar?

Jangan merokok selama 30 menit sebelum menyumbangkan darah.

Informasi umum tentang penelitian

Definisi faktor antinuklear (ANF) adalah "standar emas" untuk mendeteksi antibodi antinuklear (ANA) dan diagnosis penyakit autoimun.

Patogenesis penyakit sistemik dari jaringan ikat (SSTF) terkait erat dengan gangguan dalam sistem kekebalan dan peningkatan produksi antibodi terhadap struktur selnya sendiri. Autoantibodi terhadap komponen inti sel - antibodi antinuklear - berinteraksi dengan asam nukleat dan protein nukleus, antigen sitoplasma, yang memanifestasikan dirinya dalam perubahan peradangan pada jaringan dan organ, nyeri pada persendian dan otot, kelelahan yang ditandai, penurunan berat badan, perubahan kulit. ANA ditemukan pada banyak penyakit autoimun, tetapi paling khas dari lupus eritematosus sistemik (SLE). ANA ditemukan pada lebih dari 90% pasien dengan penyakit sistemik dari jaringan ikat, saat ini sekitar 200 varietas dijelaskan, yang disatukan oleh satu nama - faktor antinuklear.

Ketika menentukan ANF dengan metode fluoresensi tidak langsung, garis sel epitelial transplantasi pada manusia adenokarsinoma HEp-2 lebih sering digunakan. Hep-2 sel adalah substrat yang sangat nyaman untuk penelitian laboratorium, karena mereka memiliki inti besar dan tumbuh di kaca dalam satu lapisan. AHA terdeteksi dengan mengikat sel-sel HEp-2 ke antigen intraseluler.

Dalam penelitian ini, sel-sel Hep-2 epitel tumbuh pada gelas, diperbaiki dan diinkubasi dengan serum pasien yang diencerkan. Setelah penghilangan serum berlebih, sel-sel diinkubasi dengan antibodi berlabel fluoresen, kemudian dicuci lagi dan diperiksa dengan mikroskop fluoresens. Pada saat yang sama, titer antibodi dan jenis luminesens ditentukan. Titer lebih dari 1: 160 dianggap diagnostik. Dengan eksaserbasi penyakit rematik, melebihi 1: 640, dan selama remisi menurun menjadi 1: 160-1: 320. Semakin banyak antibodi, semakin tinggi titer. Berdasarkan jenis luminesensi, Anda dapat menetapkan target untuk antibodi antinuklear, yang sangat penting secara klinis dan menentukan taktik pemeriksaan lebih lanjut terhadap pasien. Yang utama adalah tipe pewarnaan inti perifer, granular (kecil / besar), nukleolar, sentromerik dan sitoplasma. Setiap jenis cahaya memiliki fitur yang sangat khas yang memungkinkan Anda membedakan satu opsi dari yang lain.

Pewarnaan homogen (difus) dikaitkan dengan keberadaan antibodi untuk DNA beruntai ganda, histon, dan merupakan karakteristik SLE dan lupus eritematosus.

Luminescence perifer disebabkan oleh distribusi perifer kromatin dalam nukleus, berhubungan dengan antibodi terhadap DNA dan spesifik untuk SCR. Jenis luminescence ini penting untuk membedakan dari pewarnaan membran nuklir, yang terjadi pada penyakit-penyakit hati autoimun.

Pewarnaan granular (bercak-bercak, retikulasi) paling sering terjadi dan paling tidak spesifik, terdeteksi pada banyak penyakit autoimun. Dalam hal ini, autoantigen adalah kompleks nukleoprotein dalam nukleus (Sm, U1-RNP, SS-A, SS-B antigen dan PCNA).

Titer ANF yang sangat tinggi dengan jenis luminescence granular yang besar sering menunjukkan penyakit campuran dari jaringan ikat.

Pewarnaan nuklear (nucleolar) karena produksi antibodi terhadap komponen nukleolus (RNA polimerase-1, NOR, U3RNP, PM / Scl), dideteksi pada skleroderma, penyakit Sjogren. ANA kadang-kadang meningkat dengan penyakit endokrin (diabetes tipe 1, tiroiditis, tirotoksikosis, sindrom polyendocrine), penyakit kulit (psoriasis, pemfigus), selama kehamilan, setelah transplantasi organ dan jaringan, pada pasien hemodialisis.

Luminescence sentromerik muncul dengan adanya antibodi terhadap sentromer kromosom dan merupakan karakteristik bentuk skleroderma, sindrom CREST.

Jenis luminesens sitoplasma dikaitkan dengan antibodi terhadap tRNA sintetase, khususnya untuk Jo-1, yang merupakan karakteristik dermatomiositis dan polimositis. Jenis pewarnaan ini juga ditentukan dengan adanya antibodi terhadap komponen lain dari sitoplasma pada hepatitis autoimun, sirosis bilier primer.

Deteksi simultan berbagai jenis luminescence menunjukkan adanya berbagai jenis antibodi.

Pada orang sehat, luminescale kecil dapat dideteksi pada titer rendah, sedang atau tinggi ANA, tetapi biasanya jenis luminescence yang berbutir kasar atau homogen tidak dapat ditentukan.

Tergantung pada hasil evaluasi jenis luminescence, taktik lebih lanjut sedang dikembangkan untuk mengobati pasien dan studi tambahan dijadwalkan untuk memperjelas spektrum ANA.

Untuk apa penelitian itu digunakan?

  • Untuk diagnosis penyakit sistemik dari jaringan ikat.
  • Untuk diagnosis banding penyakit rematik.
  • Untuk menilai efektivitas terapi penyakit autoimun.
  • Untuk memantau jalannya penyakit jaringan ikat sistemik.

Kapan sebuah studi dijadwalkan?

  • Dengan gejala penyakit autoimun (demam berkepanjangan, nyeri sendi, kelelahan, kehilangan berat badan, perubahan pada kulit).
  • Ketika mendeteksi perubahan karakteristik penyakit jaringan ikat sistemik (peningkatan ESR, tingkat protein C-reaktif, beredar kompleks imun).

Apa hasil yang dimaksud?

Alasan meningkatkan titer ANF di sel HEp-2:

  • systemic lupus erythematosus (pada 95% kasus),
  • dermatomiositis / polymyositis,
  • skleroderma sistemik (dalam 60-90% kasus),
  • Sindrom Sjogren (dalam 40-70% kasus)
  • penyakit jaringan ikat campuran (sindrom Sharpe),
  • Sindrom Raynaud
  • diskoid lupus,
  • obat lupus,
  • rheumatoid arthritis,
  • necrotizing vasculitis,
  • mononukleosis menular,
  • leukemia
  • neoplasma ganas (terutama limfoma),
  • miastenia berat
  • endokarditis infektif,
  • hepatitis autoimun kronis,
  • primary biliary cirrhosis
  • tuberkulosis,
  • pneumoconiosis,
  • fibrosis paru interstisial.

Apa itu khas untuk?

Untuk SLE, obat lupus, skleroderma sistemik, hepatitis aktif kronis

Untuk SLE, sindrom Sjogren, penyakit jaringan ikat campuran, rheumatoid arthritis

Untuk polymyositis / dermatomiositis, skleroderma, sindrom Sjogren, SLE

Untuk sindrom CREST (kalsifikasi kulit, sindrom Raynaud, disfungsi esofagus, sklerodaktili, telangiektasia)

Untuk dermatomiositis / polymyositis, penyakit hati autoimun, sirosis bilier primer

Apa yang bisa mempengaruhi hasilnya?

  • Hasil positif palsu berkontribusi pada:
    • usia di atas 60-65 tahun (dalam 10-37% kasus);
    • penggunaan obat-obatan yang dapat menyebabkan lupus yang diinduksi obat propilurasil, quinidine, reserpin, streptomisin, sulfanilamide, tetrasiklin, diuretik thiazide).
  • Mengambil glukokortikosteroid (prednison, deksametason, metipred) kadang-kadang menyebabkan hasil negatif palsu.
  • Dalam 5% kasus SLE, hasil negatif dari analisis ini adalah mungkin (ANF-negative SLE). Dalam situasi seperti itu, untuk memperjelas diagnosis, perlu untuk menentukan antibodi terhadap antigen SS (Ro).
  • Hasil tes positif bukanlah bukti absolut dari penyakit autoimun. Pada orang sehat dalam 3-13% kasus titer ANF meningkat dan mencapai 1: 320.
  • Hasil tes harus dievaluasi bersama dengan data klinis dan parameter laboratorium lainnya.
  • Jika hasil positif dari penelitian dianjurkan untuk menentukan spesifisitas imunoblot ANA.
  • Antibodi untuk double-stranded DNA (anti-dsDNA) screening
  • Antibodi terhadap antigen nuklir (ANA), skrining
  • Antibodi terhadap antigen nuklir yang dapat diekstraksi (ENA-screen)
  • Antibodi untuk cardiolipin, IgG dan IgM
  • Antinuclear antibodies (anti-Sm, RNP, SS-A, SS-B, Scl-70, PM-Scl, PCNA, CENT-B, Jo-1, ke histones, ke nukleosom, Ribo P, AMA-M2), imunoblot
  • Hitung darah lengkap (tanpa leukogram dan ESR)
  • Tingkat sedimentasi eritrosit (ESR)
  • Antistreptolisin O
  • Protein C-reaktif, secara kuantitatif
  • Faktor reumatoid
  • Circulating Immune Complexes (CIC)
  • Komponen pelengkap C3
  • Komponen pelengkap C4

Siapa yang membuat penelitian?

  • Wilson D. McGraw-Hill Manual Laboratorium dan Tes Diagnostik 1 Ed Normal, Illinois, 2007: 55-57 pp.
  • Mariz HA, Sato EI, Barbosa SH, Rodrigues SH, Dellavance A, Andrade LE. Penyakit anti-alergi dan penyakit rematik autoimun. Arthritis Rheum. 2011 Jan, 63 (1): 191-200.
  • Kumar Y, Bhatia A, Minz RW. Jaringan konektifitas: sebuah perjalanan ditinjau kembali. Diagnosis Pathol. 2009 Jan 2; 4: 1. PMID: 19121207 [PubMed].

Faktor antinuklear pada sel-sel HEp-2: penelitian di laboratorium KDLmed

Metode penelitian menggunakan sel epitel manusia HEp-2, yang memungkinkan untuk mendeteksi antibodi antinuklear, adalah salah satu penanda penyakit jaringan ikat sistemik.

ANF, antibodi antinuklear, antibodi antinuklear (ANA).

Antinuclear Antibodies (ANA), Hep-2 Substrate, ANA-Hep2, Pendeteksian Anti Nuclear Antibodi Fluoresen (FANA).

Imunofluoresensi tidak langsung.

Biomaterial apa yang dapat digunakan untuk penelitian?

Bagaimana cara mempersiapkan diri untuk belajar?

Jangan merokok selama 30 menit sebelum menyumbangkan darah.

Informasi umum tentang penelitian

Definisi faktor antinuklear (ANF) adalah "standar emas" untuk mendeteksi antibodi antinuklear (ANA) dan diagnosis penyakit autoimun.

Patogenesis penyakit sistemik dari jaringan ikat (SSTF) terkait erat dengan gangguan dalam sistem kekebalan dan peningkatan produksi antibodi terhadap struktur selnya sendiri. Autoantibodi terhadap komponen inti sel - antibodi antinuklear - berinteraksi dengan asam nukleat dan protein nukleus, antigen sitoplasma, yang memanifestasikan dirinya dalam perubahan peradangan pada jaringan dan organ, nyeri pada persendian dan otot, kelelahan yang ditandai, penurunan berat badan, perubahan kulit. ANA ditemukan pada banyak penyakit autoimun, tetapi paling khas dari lupus eritematosus sistemik (SLE). ANA ditemukan pada lebih dari 90% pasien dengan penyakit sistemik dari jaringan ikat, saat ini sekitar 200 varietas dijelaskan, yang disatukan oleh satu nama - faktor antinuklear.

Ketika menentukan ANF dengan metode fluoresensi tidak langsung, garis sel epitelial transplantasi pada manusia adenokarsinoma HEp-2 lebih sering digunakan. Hep-2 sel adalah substrat yang sangat nyaman untuk penelitian laboratorium, karena mereka memiliki inti besar dan tumbuh di kaca dalam satu lapisan. AHA terdeteksi dengan mengikat sel-sel HEp-2 ke antigen intraseluler.

Dalam penelitian ini, sel-sel Hep-2 epitel tumbuh pada gelas, diperbaiki dan diinkubasi dengan serum pasien yang diencerkan. Setelah penghilangan serum berlebih, sel-sel diinkubasi dengan antibodi berlabel fluoresen, kemudian dicuci lagi dan diperiksa dengan mikroskop fluoresens. Pada saat yang sama, titer antibodi dan jenis luminesens ditentukan. Titer lebih dari 1: 160 dianggap diagnostik. Dengan eksaserbasi penyakit rematik, melebihi 1: 640, dan selama remisi menurun menjadi 1: 160-1: 320. Semakin banyak antibodi, semakin tinggi titer. Berdasarkan jenis luminesensi, Anda dapat menetapkan target untuk antibodi antinuklear, yang sangat penting secara klinis dan menentukan taktik pemeriksaan lebih lanjut terhadap pasien. Yang utama adalah tipe pewarnaan inti perifer, granular (kecil / besar), nukleolar, sentromerik dan sitoplasma. Setiap jenis cahaya memiliki fitur yang sangat khas yang memungkinkan Anda membedakan satu opsi dari yang lain.

Pewarnaan homogen (difus) dikaitkan dengan keberadaan antibodi untuk DNA beruntai ganda, histon, dan merupakan karakteristik SLE dan lupus eritematosus.

Luminescence perifer disebabkan oleh distribusi perifer kromatin dalam nukleus, berhubungan dengan antibodi terhadap DNA dan spesifik untuk SCR. Jenis luminescence ini penting untuk membedakan dari pewarnaan membran nuklir, yang terjadi pada penyakit-penyakit hati autoimun.

Pewarnaan granular (bercak-bercak, retikulasi) paling sering terjadi dan paling tidak spesifik, terdeteksi pada banyak penyakit autoimun. Dalam hal ini, autoantigen adalah kompleks nukleoprotein dalam nukleus (Sm, U1-RNP, SS-A, SS-B antigen dan PCNA).

Titer ANF yang sangat tinggi dengan jenis luminescence granular yang besar sering menunjukkan penyakit campuran dari jaringan ikat.

Pewarnaan nuklear (nucleolar) karena produksi antibodi terhadap komponen nukleolus (RNA polimerase-1, NOR, U3RNP, PM / Scl), dideteksi pada skleroderma, penyakit Sjogren. ANA kadang-kadang meningkat dengan penyakit endokrin (diabetes tipe 1, tiroiditis, tirotoksikosis, sindrom polyendocrine), penyakit kulit (psoriasis, pemfigus), selama kehamilan, setelah transplantasi organ dan jaringan, pada pasien hemodialisis.

Luminescence sentromerik muncul dengan adanya antibodi terhadap sentromer kromosom dan merupakan karakteristik bentuk skleroderma, sindrom CREST.

Jenis luminesens sitoplasma dikaitkan dengan antibodi terhadap tRNA sintetase, khususnya untuk Jo-1, yang merupakan karakteristik dermatomiositis dan polimositis. Jenis pewarnaan ini juga ditentukan dengan adanya antibodi terhadap komponen lain dari sitoplasma pada hepatitis autoimun, sirosis bilier primer.

Deteksi simultan berbagai jenis luminescence menunjukkan adanya berbagai jenis antibodi.

Pada orang sehat, luminescale kecil dapat dideteksi pada titer rendah, sedang atau tinggi ANA, tetapi biasanya jenis luminescence yang berbutir kasar atau homogen tidak dapat ditentukan.

Tergantung pada hasil evaluasi jenis luminescence, taktik lebih lanjut sedang dikembangkan untuk mengobati pasien dan studi tambahan dijadwalkan untuk memperjelas spektrum ANA.

Untuk apa penelitian itu digunakan?

  • Untuk diagnosis penyakit sistemik dari jaringan ikat.
  • Untuk diagnosis banding penyakit rematik.
  • Untuk menilai efektivitas terapi penyakit autoimun.
  • Untuk memantau jalannya penyakit jaringan ikat sistemik.

Kapan sebuah studi dijadwalkan?

  • Dengan gejala penyakit autoimun (demam berkepanjangan, nyeri sendi, kelelahan, kehilangan berat badan, perubahan pada kulit).
  • Ketika mendeteksi perubahan karakteristik penyakit jaringan ikat sistemik (peningkatan ESR, tingkat protein C-reaktif, beredar kompleks imun).

Apa hasil yang dimaksud?

Alasan meningkatkan titer ANF di sel HEp-2:

  • systemic lupus erythematosus (pada 95% kasus),
  • dermatomiositis / polymyositis,
  • skleroderma sistemik (dalam 60-90% kasus),
  • Sindrom Sjogren (dalam 40-70% kasus)
  • penyakit jaringan ikat campuran (sindrom Sharpe),
  • Sindrom Raynaud
  • diskoid lupus,
  • obat lupus,
  • rheumatoid arthritis,
  • necrotizing vasculitis,
  • mononukleosis menular,
  • leukemia
  • neoplasma ganas (terutama limfoma),
  • miastenia berat
  • endokarditis infektif,
  • hepatitis autoimun kronis,
  • primary biliary cirrhosis
  • tuberkulosis,
  • pneumoconiosis,
  • fibrosis paru interstisial.

Apa itu khas untuk?

Untuk SLE, obat lupus, skleroderma sistemik, hepatitis aktif kronis

Untuk SLE, sindrom Sjogren, penyakit jaringan ikat campuran, rheumatoid arthritis

Untuk polymyositis / dermatomiositis, skleroderma, sindrom Sjogren, SLE

Untuk sindrom CREST (kalsifikasi kulit, sindrom Raynaud, disfungsi esofagus, sklerodaktili, telangiektasia)

Untuk dermatomiositis / polymyositis, penyakit hati autoimun, sirosis bilier primer

Apa yang bisa mempengaruhi hasilnya?

  • Hasil positif palsu berkontribusi pada:
    • usia di atas 60-65 tahun (dalam 10-37% kasus);
    • penggunaan obat-obatan yang dapat menyebabkan lupus yang diinduksi obat propilurasil, quinidine, reserpin, streptomisin, sulfanilamide, tetrasiklin, diuretik thiazide).
  • Mengambil glukokortikosteroid (prednison, deksametason, metipred) kadang-kadang menyebabkan hasil negatif palsu.
  • Dalam 5% kasus SLE, hasil negatif dari analisis ini adalah mungkin (ANF-negative SLE). Dalam situasi seperti itu, untuk memperjelas diagnosis, perlu untuk menentukan antibodi terhadap antigen SS (Ro).
  • Hasil tes positif bukanlah bukti absolut dari penyakit autoimun. Pada orang sehat dalam 3-13% kasus titer ANF meningkat dan mencapai 1: 320.
  • Hasil tes harus dievaluasi bersama dengan data klinis dan parameter laboratorium lainnya.
  • Jika hasil positif dari penelitian dianjurkan untuk menentukan spesifisitas imunoblot ANA.
  • Antibodi untuk double-stranded DNA (anti-dsDNA) screening
  • Antibodi terhadap antigen nuklir (ANA), skrining
  • Antibodi terhadap antigen nuklir yang dapat diekstraksi (ENA-screen)
  • Antibodi untuk cardiolipin, IgG dan IgM
  • Antinuclear antibodies (anti-Sm, RNP, SS-A, SS-B, Scl-70, PM-Scl, PCNA, CENT-B, Jo-1, histones, nukleosom, Ribo P, AMA-M2), imunoblot
  • Hitung darah lengkap (tanpa leukogram dan ESR)
  • Tingkat sedimentasi eritrosit (ESR)
  • Antistreptolisin O
  • Protein C-reaktif, secara kuantitatif
  • Faktor reumatoid
  • Circulating Immune Complexes (CIC)
  • Komponen pelengkap C3
  • Komponen pelengkap C4

Siapa yang membuat penelitian?

  • Wilson D. McGraw-Hill Manual Laboratorium dan Tes Diagnostik 1 Ed Normal, Illinois, 2007: 55-57 pp.
  • Mariz HA, Sato EI, Barbosa SH, Rodrigues SH, Dellavance A, Andrade LE. Penyakit anti-alergi dan penyakit rematik autoimun. Arthritis Rheum. 2011 Jan, 63 (1): 191-200.
  • Kumar Y, Bhatia A, Minz RW. Jaringan konektifitas: sebuah perjalanan ditinjau kembali. Diagnosis Pathol. 2009 Jan 2; 4: 1. PMID: 19121207 [PubMed].

Antibodi antinuklear. Informasi umum

ANA adalah gugus aAT heterogen yang bereaksi dengan komponen yang berbeda dari nukleus. Metode skrining standar untuk menentukan ANA adalah reaksi imunofluoresensi tidak langsung (NRIF) menggunakan bagian cryostat dari tikus atau hati tikus (ginjal) atau sel Hep-2 (sel epitel laring manusia) sebagai substrat. Penggunaan sel HEp-2 standar lebih disukai, karena memungkinkan untuk meningkatkan sensitivitas metode secara signifikan dan dapat diandalkan menggambarkan berbagai jenis luminescence nukleus. Ketika ANA diuji dengan metode NRIF, mereka secara tradisional disebut sebagai faktor antinuklear (ANF).

ANF ​​adalah salah satu tes laboratorium skrining utama yang digunakan untuk mendiagnosis penyakit rematik sistemik. Studi ANF sangat berguna untuk diagnosis SLE dan SSD, diagnosis AS dan PM / DM, penilaian prognosis dan pemantauan perjalanan arthritis kronis remaja dan fenomena Raynaud. Hasil positif dari penentuan ANF dianggap sebagai kriteria diagnostik wajib bagi eritematosus obat, penyakit campuran jaringan ikat (SZST), hepatitis autoimun dan telah terbukti nilai diagnostik dan prognostik di RA, multiple sclerosis, penyakit tiroid, infeksi, purpura thrombocytopenic idiopatik dan fibromyalgia. Frekuensi deteksi ANF meningkat seiring bertambahnya usia, terutama pada wanita.

Pada pasien dengan hasil positif ANA, dianjurkan bahwa tes konfirmasi dilakukan - penentuan ANA spesifik untuk antigen inti dan sitoplasma individu (ds DNA, Sm, SS-A / Ro, SS-B / La, Scl-70, RNP), menggunakan metode ELISA, IB, RID, RIA, dll.

Faktor antinuklear (ANF, HEp-2) dengan penentuan jenis luminescence (dalam darah)

Antibodi antinuklear (ANA, ANA, antibodi antinuklear, faktor antinuklear-ANF) - metode NIF pada jalur sel HEp-2 dengan penentuan jenis luminescence. - indikator penyakit autoimun dari jaringan ikat. ANA adalah kelompok autoantibodi untuk protein dan komponen lain (termasuk DNA) yang ditemukan dalam inti sel. Indikasi utama untuk digunakan: diagnosis eksklusi - sistemik lupus erythematosus (diyakini bahwa ANA terjadi pada 90% kasus SLE, dengan kata lain, hasil negatif dengan probabilitas sekitar 90% mengecualikan diagnosis SLE), diagnosis banding jaringan ikat sistemik (systemic lupus erythematosus, scleroderma, nodular periarteritis, dermatomiositis), hepatitis aktif kronis.

Sampai saat ini, lebih dari 200 spesies ANA telah dijelaskan yang diarahkan terhadap asam nukleat, histones, protein membran nuklir, komponen spliceosome, ribonukleotida, protein nukleolar, dan sentromer. Namun, mereka merusak jaringan ikat, yang berkontribusi pada pengenalan definisi faktor antinuklear sebagai tes untuk penyakit sistemik dari jaringan ikat. Istilah "faktor antinuklear" dipahami sebagai tes untuk mendeteksi antibodi antinuklear menggunakan metode imunofluoresensi tidak langsung.

Salah satu cara untuk mendeteksi faktor antinuklear dalam darah (antinuclear antibody) adalah metode imunofluoresensi tidak langsung dengan menerapkan serum pasien pada sel-sel jaringan garis transplantabel Hep-2 sel manusia (sel epitel saluran karsinoma laring Hep-2 yang mengandung antigen nuklir yang berbeda) menggunakan konjugat berlabel dengan antibodi manusia. Garis sel manusia lainnya dapat digunakan sebagai substrat, namun, karena morfologi yang baik dan kemudahan budidaya, garis Hep-2 menjadi substrat yang diakui secara umum imunofluoresensi tidak langsung. Metode deteksi ANF dikembangkan oleh Tan pada tahun 1982, menggunakan garis sel epiteloid yang dapat ditransplantasi manusia HEp-2 sebagai substrat. Garis sel ini, berasal dari adenokarsinoma laring manusia, adalah sel epitel poliploid besar non-skuamosa yang membentuk monolayer pada kaca. Serum pasien diinkubasi dengan substrat jaringan, sementara antibodi antinuklear dari serum pasien (jika ada) dikaitkan dengan antigen nuklir yang sesuai. Situs pengikatan autoantibodi dideteksi menggunakan antiserum anti-manusia berlabel fluoresen. Hasil reaksi dievaluasi dengan mikroskopi menggunakan mikroskop luminescent dan penilaian visual dari sifat luminesensi antibodi terikat. Di antara keuntungan dari Hep-2 (dibandingkan dengan cryosections jaringan hewan) dapat disebutkan frekuensi tinggi dari pembelahan sel yang memungkinkan untuk mendeteksi antibodi terhadap antigen dinyatakan hanya dalam pembelahan sel dan tidak adanya jaringan matriks sel, yang menghalangi pencitraan pendaran tertentu bila dibandingkan dengan bagian histologis. Dalam beberapa penyakit, seperti SLE, skleroderma sistemik (sklerosis sistemik), beberapa infeksi, sistem kekebalan tubuh pasien merasakan inti (protein nuklir) sel-sel jaringan mereka sendiri sebagai benda asing, dan menghasilkan antibodi (antibodi antinuklear - AHA) kepada mereka. Namun, mereka merusak jaringan ikat, yang berkontribusi pada pengenalan definisi faktor antinuklear sebagai tes untuk penyakit sistemik dari jaringan ikat.

Ketika menginterpretasi data, harus diingat bahwa spektrum AHA mencakup sekelompok besar autoantibodi ke DNA, nukleoprotein, histone, ribonukleoprotein nuklir dan komponen lain dari nukleus. Dengan demikian, tes ini bertujuan untuk mendeteksi berbagai antibodi terhadap komponen inti dan sitoplasma, yang pertama kali terdeteksi dengan SLE. Selanjutnya, kriteria diagnostik tes diperluas sehubungan dengan deteksi antibodi ini dan penyakit lain pada jaringan ikat.

Tes skrining untuk menentukan total set ANA umum digunakan antigen berikut adalah penanda utama dari penyakit jaringan ikat autoimun: SS-A (Ro), SS-B (La), BNP70, Sm, RNP / Sm, J01, antigen sentromer B. Dasar digunakan dalam kit modern untuk mendeteksi antibodi nuklir dari kelas IgG diwakili oleh set berikut:

  1. 1. SS-A (Ro) - ribonukleoprotein nuklir, (polipeptida). Antibodi pada mereka ditemukan, lebih sering, pada skleroderma sistemik (60% kasus), sindrom Sjogren (hingga 70% kasus) dan pada SLE (hingga 30% kasus). Hal ini diyakini bahwa jika antibodi ini terdeteksi dalam darah ibu hamil, ini merupakan indikator risiko peningkatan terjadinya sindrom lupus seperti neonatal pada bayi baru lahir (neonatal lupus syndrome). Antibodi ini ibu melewati plasenta dan menyebabkan kerusakan pada janin, yang menyebabkan anemia hemolitik dan trombositopenia. Konsekuensi yang parah termasuk kekalahan sistem konduksi jantung anak (hingga kardiostimulasi konstan). Telah dicatat bahwa wanita yang memiliki titer signifikan dari antibodi ini selama kehamilan, tanpa tanda klinis yang jelas, kemudian mengembangkan penyakit autoimun, termasuk SLE.
  2. 2. SS-B (La) - protein nuklir. Antibodi terhadap mereka dideteksi hingga 60% kasus pada sindrom Sjogren dan 15% kasus pada SLE.
  3. 3. Scl-70 adalah enzim protein yang terlibat dalam metabolisme asam nukleat (topoisomerase-1). Antibodi terhadap protein ini paling spesifik untuk skleroderma sistemik (hingga 70% kasus).
  4. 4. DNA beruntai ganda - DNA asli. Antibodi terhadap DNA paling spesifik untuk SLE (hingga 80% kasus) dan praktis tidak terdeteksi untuk rheumatoid arthritis dan skleroderma.
  5. 5. RNP / Sm - Kompleks RNP / Sm antigen terdiri dari U1-ribonucleoproteins: U1-68, U1-A, U1-C, U5, U6; serta dari polipeptida Sm: SmA |, SmB | B, SmD, SmE, SmF, SmG. Antibodi yang diproduksi untuk antigen ini paling spesifik untuk penyakit campuran dari jaringan ikat - yaitu di hadapan gejala skleroderma, rheumatoid arthritis, SLE, polymyositis (sekitar 95% kasus) dan pada tingkat lebih rendah untuk SLE (hingga 30% kasus).
  6. 6. Jo-1 - enzim - transport aminoacyl RNA sintetase. Autoantibodi untuk protein ini secara diagnostik signifikan dalam miositis (polymyositis / dermatomiositis).
  7. 7. CENP-B (sentromer) - Antitsetromernyh untuk mendeteksi antibodi (Anti-sentromer B), untuk mendiagnosis CREST-syndrome (sindrom aktif adalah calcinosis kombinasi kulit, sindrom Raynaud, esofagus dismotilitas, sclerodactyly, telangiectasias). Sindrom CREST mengacu pada varian skleroderma sistemik (sklerosis sistemik). Antibodi ini pada pasien menunjukkan perjalanan skleroderma sistemik yang baik dan menyarankan lesi kecil pada organ internal.
  8. 8. Hep-2 sel adalah sel-sel karsinoma epitel laring manusia dari garis Hep-2 yang mengandung banyak antigen nuklir yang berbeda, termasuk antigen SS-A (Ro) dan antigen sentromer. Hep-2 antibodi ditemukan pada pasien dengan polymyositis dan dermatomiositis hingga 90% kasus.
  9. 9. Mitokondria (PDC) - PDC - piruvat dehidrogenase kompleks. Sekelompok besar antibodi antimitochondrial adalah autoantibodi, yang dibentuk pada enzim kompleks piruvat dehidrogenase, yang terletak di mitokondria sel dan terlibat dalam dekarboksilasi oksidatif piruvat.

Seringkali, ANA terdeteksi pada sirosis bilier.

AHA biasanya tidak menembus sel-sel hidup dan oleh karena itu tidak berbahaya. Tetapi kadang-kadang mereka membentuk kompleks antigen-antibodi yang menyebabkan kerusakan jaringan (seperti, misalnya, dalam kasus SLE, kerusakan ginjal). Sehubungan dengan keterlibatan banyak organ dalam proses patologis, nilai diagnostik untuk menentukan AHA kecil dan hasil analisis hanya sebagian mengkonfirmasi data klinis.

Selain penyakit rematik, ANA juga dapat dideteksi pada hepatitis aktif kronis dalam hingga 50% kasus. Penampilan (titer rendah) dimungkinkan dengan penyakit radang, onkologi dan infeksi virus.

  • Tingkat deteksi komparatif antibodi antinuklear.


Artikel Terkait Hepatitis