Apa norma untuk mengukur hepatitis C?

Share Tweet Pin it

Virus hepatitis C mampu berkembang biak dalam sel darah dan menyebabkan penyakit limfoproliferatif. Berkat berbagai mutasi, pertahanan kekebalan tubuh melemah, dan genotipe dan subtipe virus muncul. Dengan penentuan tipe tertentu yang tepat dan tepat waktu, efektivitas terapi antiviral bergantung. Bahaya infeksi adalah bahwa penyakit itu tidak bergejala. Hanya 15 persen dari 100 dapat mengalami mual dan muntah, penurunan berat badan dan demam.

Definisi virus hepatitis C

Tingkat standar hepatitis C adalah dalam ukuran 40-60 nm, dengan sebagian besar lipid, kerusakan hati yang diakibatkan oleh penyakit akut atau kronis. Hepatitis C, yaitu, virus RNA dari keluarga Togaviridae, sangat resisten, ditularkan melalui transfusi darah atau penggunaan benda-benda non-steril, persediaan kebersihan yang tidak tepat, dll. Analisis kuantitatif memungkinkan Anda untuk memeriksa darah dan mengidentifikasi struktur genetik dari virus yang terinfeksi.

Untuk menentukan hepatitis C dan genotipnya, analisis kuantitatif dilakukan. Tergantung pada alat analisa, tiga tingkat insiden virus RNA dapat ditentukan.

Subtipe dapat menghasilkan berbagai modifikasi, sehingga spesifisitas dan sensitivitas penganalisis harus seratus persen. Selain mendeteksi penyakit pada pasien, perlu untuk menentukan tingkat keparahannya. Beberapa laboratorium tidak memiliki semua data pada decoding virus RNA, ada kemungkinan respon positif yang salah.

Penelitian tentang hepatitis C akan lebih akurat ketika mempelajari indikator ini:

Menarik perhatian pada hasil indikator ini dan kondisi umum tubuh, hasilnya ditampilkan menunjukkan tingkat infeksi, bentuk, dan jumlah sel hepatitis C dalam darah. Ini berkontribusi pada proses penyembuhan dan efektivitas terapi antiviral.

Jenis analisis untuk hepatitis C

Sebuah reaksi berantai multi-dimensi (PCR) memberikan gambaran tentang jumlah partikel DNA dalam analisis pasien yang diambil, dan akan mengidentifikasi agen infeksi dengan benar.

Agen penyebab penyakit infeksi dapat terjadi. Infeksi hati, seperti hepatitis C, dapat diobati pada saat kita dideteksi pada waktu yang tepat. Jika dicurigai ada virus, analisis PCR dilakukan.

Mengingat bahwa untuk waktu yang lama gejala-gejala virus dapat disamarkan, seseorang mungkin tidak merasakan timbulnya penyakit. Tetapi dengan pemeriksaan menyeluruh pada 60-70% kasus, hepatitis C terdeteksi, analisis pertama, di mana ELISA, maka diagnosis PCR berikut. Analisis dilakukan dalam periode tertentu untuk menentukan stadium penyakit dan meresepkan pengobatan yang tepat. Untuk melakukannya tanpa itu, tanpa menerapkan semua prosedur ini, adalah mungkin, divaksinasi terhadap hepatitis.

Analisis kualitatif dan kuantitatif

Ada analisis kualitatif dan kuantitatif. Esensi dari yang pertama adalah bahwa ia menentukan adanya infeksi dalam darah. Dan itu berarti virus itu menginfeksi sel-sel hati yang sehat. Ketika antibodi terhadap hepatitis C ditemukan pada pasien, tes kualitatif segera dilakukan. Angka yang harus diberikan hasilnya "tidak terdeteksi dalam darah". Ketika menentukan konsentrasi virus, ada kebutuhan untuk mengetahui sensitivitas sistem diagnostik, karena orang yang sedang menjalani terapi antivirus dapat melakukan analisis. Tingkat kepekaan penganalisa tidak boleh kurang dari 50 IU / ml.

Ketika virus terdeteksi, analisis kuantitatif dilakukan, dengan kata lain, viral load, yang menentukan konsentrasi virus dalam darah dan tingkat keparahan penyakit.

Viral RNA, yang dalam jumlah tertentu darah, didefinisikan sebagai norma pada tingkat 1 ml per 1 sentimeter kubik. Setelah mengukur viral load, adalah mungkin untuk menilai tingkat infeksi lingkungan yang masih tidak terinfeksi. Segera setelah konsentrasi hepatitis C naik dalam darah, perlu untuk mengisolasi dari lingkungan.

Penting pada tahap pertama untuk mendeteksi tingkat konsentrasi hepatitis, untuk menentukan laju rehabilitasi. Jika tingkat hepatitis C terlampaui lebih dari 800 ribu IU / ml, itu dianggap terlalu tinggi, dengan peningkatan hingga satu juta - kritis. Jika rentang kuantitatif kurang dari 400 ribu IU / ml, dianggap bahwa infeksi pada orang-orang di sekitarnya akan kurang mungkin. Angka ini menjelaskan bahwa hepatitis C ada dalam tubuh dalam dosis yang sangat kecil. Analisis tidak dapat menentukan nilai kuantitatif dari partikel RNA virus, sehingga diangkat kembali beberapa kali untuk diagnosis yang akurat.

Hasil analisis kuantitatif

Tugas menentukan jumlah viral load dalam darah pasien adalah identifikasi tingkat infeksi pada orang lain.

Hasil analisis PCR:

  1. Jawaban positif berarti ada infeksi pada bahan biologis. Analisis memungkinkan untuk menentukan jumlah pasti sel yang terinfeksi.
  2. Jawaban negatif menunjukkan tidak adanya infeksi, yang dicari secara hati-hati di dalam tubuh.

Metode penentuan kuantitatif hepatitis C akurat dan informatif, dilakukan pada peralatan dengan sensitivitas tinggi. Menguraikan hasil analisis memungkinkan Anda untuk mencari tahu apakah infeksi dan spesifikasinya, untuk melihat jumlah terkecil sel yang terinfeksi pada alat analisa yang sangat sensitif.

Hasil positif atau berlawanan palsu jarang diberikan oleh analisis, lebih sering ini terjadi dalam studi immunoassay.

Analisis kuantitatif PCR untuk hepatitis C

Ada banyak subtipe HCV, yang mengapa tidak selalu mungkin untuk memilih obat antiviral yang efektif dan mencapai hasil yang diinginkan dalam pengobatan. Berbagai patogen karena kemampuan mereka untuk mengubah struktur mereka, yaitu, untuk bermutasi. Akibatnya, kekebalan tidak punya waktu untuk membentuk respon yang kuat terhadap agen patogen, dan obat-obatan tidak efektif.

Hepatitis sering didiagnosis pada tahap sirosis, yang predisposisi deteksi terlambat penyakit karena tidak adanya tanda-tanda klinis. Hanya dengan penelitian laboratorium dapat HCV terdeteksi pada masa inkubasi.

Analisis kuantitatif hepatitis C memungkinkan tidak hanya untuk menetapkan keberadaan patogen dalam darah, tetapi juga untuk menghitung konsentrasinya.

Rekomendasi untuk mempersiapkan analisis

Persiapan khusus untuk diagnosis laboratorium tidak diperlukan. Cukup untuk mematuhi rekomendasi berikut:

  1. analisis kuantitatif dilakukan dengan perut kosong, dengan makanan terakhir - 8 jam sebelum pengumpulan darah;
  2. selama dua hari Anda harus meninggalkan alkohol dan hidangan "berat";
  3. Yang paling penting adalah obat-obatan yang dibutuhkan pasien. Mereka dapat mempengaruhi hasil penelitian, jadi dokter harus tahu tentang mereka.

Juga tidak diinginkan adalah olahraga berat dan prosedur fisioterapi pada malam pengambilan sampel darah. Untuk menguraikan analisis kuantitatif hepatitis C ternyata dapat diandalkan, jangan mengabaikan rekomendasi di atas.

Seringkali, pasien menerima hasil analisis dalam sehari. Harga penelitian untuk menentukan konsentrasi patogen dalam darah tergantung pada laboratorium dan kualitas reagen dan dapat mencapai 4 ribu rubel.

Diagnosis laboratorium hepatitis C

Di antara metode utama diagnosis adalah ELISA, atau assay immunosorbent terkait enzim. Ini diresepkan untuk mendeteksi antibodi spesifik terhadap HCV. Efisiensinya mencapai 95%. Jika transkrip penelitian memberikan hasil positif, perlu dicurigai adanya patogen dalam darah.

Perhatikan bahwa dalam setengah subjek dengan tes “+” dalam proses diagnosis lebih lanjut, agen virus tidak terdeteksi dalam darah. ELISA dalam hal ini menunjukkan kontak yang ditunda dengan HCV di masa lalu, sebagaimana dibuktikan oleh antibodi yang bersirkulasi.

Studi yang lebih akurat adalah reaksi berantai polimerase, atau PCR. Ini memungkinkan Anda untuk menentukan konsentrasi patogen RNA dalam darah. Menemukan rangkaian genetik virus dalam bahan biologis, dokter menegaskan hepatitis C.

PCR ditugaskan kepada pasien untuk memverifikasi diagnosis. Itu memungkinkan untuk mengidentifikasi RNA pada tahap ketika antibodi belum tersedia. Ada beberapa jenis studi genetika:

  1. analisis kuantitatif PCR untuk hepatitis C, yang tidak hanya menetapkan keberadaan patogen dalam darah, tetapi juga memberikan informasi tentang konsentrasinya;
  2. kualitas - mengkonfirmasi infeksi;
  3. genotyping - memungkinkan Anda untuk menentukan genotipe agen patogen dan memilih obat yang paling efektif untuk melawannya.

Reaksi berantai polimerase

Seperti yang sudah disebutkan, ada beberapa jenis tes laboratorium:

  • analisis kualitatif menunjukkan adanya agen patogen dalam darah. Jenis diagnosis ini memiliki "tingkat respons" tertentu, oleh karena itu tidak selalu dapat diandalkan. Untuk benar memecahkan kode hasil dan mendapatkan indikator nyata, disarankan untuk menggunakan sistem pengujian dengan sensitivitas setidaknya 50 IU / ml untuk penelitian. Tingkat analisis adalah "respons negatif" atau "virus tidak terdeteksi." Ini menunjukkan tidak adanya set genetik patogen dalam bahan uji. Jika hasilnya positif, pemeriksaan lebih lanjut dari pasien diperlukan;
  • Analisis kuantitatif PCR untuk hepatitis C menentukan viral load, yaitu konsentrasi agen patogen dalam darah. Hasil penelitian menunjukkan jumlah unit RNA dalam volume cairan biologis tetap;

Viral load adalah penghitungan RNA infeksius dalam satu mililiter darah yang sedang diselidiki. Satuan ukurannya adalah IU / ml, namun beberapa laboratorium mendefinisikan "salinan / ml", sambil menunjuk ke bentuk norma analisis untuk perbandingan dan evaluasi hasil.

  • genotyping. Karena kemampuan patogen untuk mengubah pilihan obat antiviral yang efektif untuk terapi harus didasarkan pada genotipnya. Bukan hanya hasilnya, tetapi juga durasi perawatannya tergantung pada itu. Dengan demikian, HCV 1 hepatitis membutuhkan penunjukan obat selama setahun, tetapi tren positif hanya diamati pada 60% kasus. Adapun genotipe kedua dan ketiga, mereka kurang resisten terhadap tindakan obat antiviral, karena efektivitas terapi melebihi 85%. Setelah menerima hasil penelitian tersebut - "virus tidak diketik," patut dicurigai adanya patogen yang tidak diakui oleh sistem uji standar.

Indikasi untuk analisis

Decoding analisis kuantitatif hepatitis C diperlukan untuk:

  1. pemeriksaan lebih lanjut dari pasien ketika antibodi terhadap HCV terdeteksi selama ELISA;
  2. konfirmasi diagnosis;
  3. membangun viral load selama infeksi campuran, ketika seseorang terinfeksi dengan beberapa jenis patogen;
  4. menentukan taktik pengobatan (pilihan obat antivirus, penggantian atau penyelesaian terapi mereka);
  5. menilai dinamika perkembangan penyakit, serta efektivitas obat;
  6. menentukan tahap patologi (akut, kronis).

PCR memiliki keuntungan sebagai berikut:

  1. sensitivitas yang baik, yang memungkinkan untuk menghitung bahkan sejumlah kecil virus;
  2. identifikasi patogen itu sendiri (RNA), dan bukan antigen;
  3. kekhususan teknik - pembentukan agen patogen jenis tertentu;
  4. kecepatan memperoleh hasil, karena analisis tidak mengharuskan budidaya tanaman dalam medium nutrisi. Jawabannya siap dalam 5 jam;
  5. universalitas - memungkinkan Anda untuk mengidentifikasi set genetik dari berbagai patogen, baik RNA dan mengandung DNA (hepatitis B);
  6. deteksi infeksi laten.

Penelitian laboratorium membantu untuk mengkonfirmasi diagnosis dan merupakan bagian integral dari pemeriksaan komprehensif (analisis gejala klinis, hasil ELISA dan biokimia).

Selain itu, PCR secara luas digunakan dalam alergi, genetika, dan juga untuk menetapkan fakta tentang ayah.

Decoding analisis kuantitatif dari virus hepatitis C

Evaluasi hasil diagnosa laboratorium dilakukan oleh dokter dengan membandingkan data yang diperoleh dengan norma.

Varietas dan kebutuhan untuk menerapkan penelitian dengan PCR

Virus Hepatitis C adalah virus yang mengandung molekul RNA. Ia mampu menghindari respons kekebalan tubuh karena kemampuannya yang tinggi untuk bermutasi. Ada enam genotipe utama dari virus dan banyak subtipe. Di wilayah kami, 1, 2 dan 3 genotipe terutama didistribusikan.

Dalam 75-80%, penyakit ini menjadi kronis, yang menyebabkan fibrosis hati, suatu kondisi di mana jaringan hati digantikan oleh jaringan ikat. Fibrosis, pada gilirannya, menyebabkan kanker atau sirosis. Cara utama penularan penyakit adalah melalui darah. Jika seseorang memiliki indikasi untuk melakukan tes untuk hepatitis C, dia diberikan dua tes utama. Antibodi terhadap virus ditentukan, dan dalam ketiadaan mereka, diyakini bahwa ia tidak menderita hepatitis. Jika kehadiran antibodi terhadap virus hepatitis terdeteksi dalam darah, analisis PCR dilakukan.

RNA dengan metode ini ditentukan dalam darah dalam 10-12 hari setelah infeksi dan menunjukkan bahwa virus secara aktif bereplikasi di dalam tubuh. Selama periode ini, tidak mungkin untuk mendeteksi virus dengan cara lain, karena masih tidak menghasilkan antibodi spesifik, dan kerusakan hati tidak terlihat dengan tes biokimia dan biopsi.

Varietas penelitian menggunakan PCR

Analisis reaksi berantai polimerase memiliki beberapa keuntungan:

  1. Dalam penelitian ini, virus itu sendiri ditentukan, dan bukan produk metaboliknya. Dalam hal ini, dimungkinkan untuk menentukan jenis patogen.
  2. Teknik ini memiliki kekhususan tinggi karena fakta bahwa hanya bagian tertentu dari DNA yang sedang dipelajari, kemungkinan mendapatkan hasil yang salah dikurangi.
  3. Ia memiliki sensitivitas yang sangat tinggi, bahkan ditentukan jumlah minimum virus dalam darah.

Ada dua metode utama untuk menguji darah untuk hepatitis C menggunakan PCR: analisis kualitatif dan kuantitatif PCR. Metode kualitatif digunakan untuk menentukan apakah ada virus. Siapa saja dengan antibodi terhadap hepatitis telah terdeteksi di dalam darah, analisis semacam itu dilakukan. Hasilnya bisa hanya dari dua jenis: "terdeteksi" dan "tidak terdeteksi", nilai terakhir dianggap norma.

Hasil tes positif berarti bahwa fragmen virus RNA ditemukan dalam sampel, yang, pada gilirannya, menunjukkan bahwa orang tersebut terinfeksi hepatitis. Dalam kasus hasil negatif, dua opsi adalah mungkin: tidak ada infeksi atau konsentrasinya begitu rendah sehingga tidak terdeteksi oleh teknik ini.

Metode kuantitatif berbeda dalam substansi penelitian, dalam tugasnya dan dalam indikasi. Tidak semua pasien dengan hepatitis menjalani analisis semacam itu. Dia, seperti yang lainnya, memiliki tujuan tertentu. Penentuan viral load atau analisis kuantitatif PCR untuk RNA virus digunakan:

  • untuk menentukan RNA virus dalam darah dan diagnosis "hepatitis virus";
  • untuk memprediksi kronisitas hepatitis dan perjalanan penyakit;
  • untuk memantau pengobatan antiviral dan memutuskan perpanjangannya, pengurangan atau perubahan dalam taktik pengobatan.

Penelitian dilakukan di hadapan indikasi tersebut:

  • Hepatitis C terdeteksi oleh penelitian kualitatif dan antibodi terdeteksi dalam darah;
  • dengan campuran hepatitis;
  • jika terapi antiviral direncanakan;
  • selama dan setelah perawatan untuk hepatitis C;
  • di hadapan hepatitis C kronis dan akut.

Tes dilakukan untuk memperkirakan jumlah unit virus dalam volume tertentu dari sampel darah 1 cm³ atau 1 ml. Hasilnya diberikan dalam angka. Indikator yang digunakan: IU / ml, yang berarti satuan internasional per mililiter dan salinan per ml, jumlah salinan RNA dalam 1 ml sampel. Semakin tinggi indikator kuantitatif dari analisis, semakin besar kemungkinan penularan virus ke orang lain.

R-DNA adalah metode DNA bercabang. Metode yang lebih sederhana dan murah. Digunakan untuk sejumlah besar sampel, memiliki sensitivitas rendah, dari 500 IU / ml. Dengan kepekaan seperti itu, ada peluang untuk tidak mengidentifikasi virus, meskipun ada dalam darah.

TMA adalah metode amplifikasi transkripsional. Teknik ini mendeteksi asam nukleat dalam darah. Ini memiliki biaya rendah dan sensitivitas tinggi, dari 5-10 IU / ml. Teknik yang relatif baru yang memungkinkan Anda untuk mempercepat dan mengurangi biaya proses pengujian.

Hasil analisis kuantitatif dari definisi virus RNA, yang disajikan oleh laboratorium, ditafsirkan sebagai berikut:

Analisis PCR Hepatitis

PCR untuk hepatitis C

  1. Hepatitis C RNA ("PCR kualitatif") - deteksi dalam tes darah adalah bukti hepatitis C akut atau kronis. Hal ini ditentukan dari minggu ke-2 infeksi, muncul sebelum anti-HCV, yang memungkinkan Anda untuk mendiagnosis penyakit pada tahap awal. RNA ditentukan pada pasien dengan klinik hepatitis akut dan pada mereka dengan hasil hepatitis positif.
  2. Hepatitis C RNA ("PCR kuantitatif") - viral load adalah salah satu indikator efektivitas terapi antivirus dan penilaiannya (oleh perubahan tingkat dari nilai awal). Karakterisasi kuantitatif dari konten RNA hepatitis C penting untuk menilai efektivitas terapi antiviral dan memiliki signifikansi prognostik untuk menentukan kronisitas. Pasien dengan viral load yang tinggi (jumlah RNA tinggi) sebelum pengobatan berespon kurang baik terhadap pengobatan.
  3. Hepatitis C RNA (genotipe 1, 2, 3) - jenis taktik pengobatan dan keefektifannya tergantung pada jenisnya. Penyakit yang disebabkan oleh virus genotipe 1 adalah yang paling tidak baik dalam kaitannya dengan prediksi efektivitas terapi. Menurut rekomendasi saat ini, tes darah bagi kita untuk genotipe hepatitis C harus dilakukan pada pasien sebelum dimulainya terapi antiviral.
  4. Hepatitis C RNA (diperpanjang genotyping 1a, 1b, 2, 3a, 4, 5, 6) - 1a, 1b, 2a, 2c, 2k, 3a subtipe beredar di Rusia. Hepatitis C, yang disebabkan oleh genotipe 1 dan 4 virus, adalah yang paling tidak baik untuk prognosis.
  5. Ultrasensitif Hepatitis C PCR (metode kualitatif) - analisis ini digunakan untuk mendiagnosis penyakit pada tahap awal infeksi, optimal untuk menguji darah donor dan mengevaluasi respon terhadap pengobatan antivirus. Penelitian ini, bahkan tanpa deteksi antibodi terhadap virus hepatitis C, direkomendasikan untuk pasien dengan penyakit hati penyebab yang tidak spesifik, imunodefisiensi didapat, atau menerima terapi imunosupresif.
  6. Ultra-sensitive Hepatitis C PCR (metode kuantitatif) adalah tes sensitivitas tinggi yang unik (10 IU / ml) untuk menentukan RNA virus hepatitis C secara kuantitatif. Penelitian ini digunakan untuk memantau efektivitas terapi.

PCR untuk hepatitis B

  1. DNA Hepatitis B (analisis kualitatif) adalah indikator penggandaan virus hepatitis B. Ini muncul pertama kali dalam darah, rata-rata, 1 bulan setelah infeksi. Dalam beberapa kasus, adalah satu-satunya penanda infeksi HBV laten. Menentukan DNA virus memungkinkan seseorang untuk mendiagnosis hepatitis B yang disebabkan oleh strain mutan, yang tidak mengungkapkan penanda infeksi lainnya.
  2. Hepatitis B DNA (analisis kuantitatif) - Konsentrasi DNA (viral load) adalah salah satu tes untuk menentukan stadium hepatitis B kronis dan kriteria efektivitas terapi antivirus. Analisis dilakukan sebelum dan selama proses pengobatan.
  3. Genotyping hepatitis B - penyakit yang disebabkan oleh genotipe yang berbeda dari virus mungkin berbeda dalam hal klinis dan hasil. Hepatitis B, yang disebabkan oleh genotipe C virus, lebih mungkin untuk mengambil kursus kronis dan memiliki risiko tinggi transformasi menjadi sirosis hati atau karsinoma hepatoseluler. Pasien yang terinfeksi dengan genotipe A merespon lebih baik terhadap pengobatan.
  4. PCR DNA ultrasensitif untuk hepatitis B (metode kualitatif) - mereka diserahkan untuk deteksi dini penyakit ini. Sangat informatif dalam studi donor darah. Ini dapat digunakan untuk mengkonfirmasi penghapusan virus secara spontan atau diinduksi oleh pengobatan dari tubuh manusia.
  5. PCR yang sangat sensitif untuk hepatitis C (metode kuantitatif) - diagnosis DNA virus hepatitis B secara kuantitatif. Analisis dilakukan untuk menilai efektivitas terapi.
  6. Penentuan mutasi resistansi terhadap obat antiviral lamivudine, telbivudine, entecavir, adefovir, tenofovir (diserahkan bersama dengan analisis "DNA hepatitis B kuantitatif"). Penting untuk menyerahkan analisis kepada pasien dengan hepatitis B kronis sebelum memulai terapi antiviral dan saat mengambil obat. Hasilnya berisi informasi tentang keberadaan resistensi virus hepatitis B terhadap obat antiviral:
    • R - virus resisten terhadap obat antiviral (mutasi resistansi terhadap obat ini ditemukan);
    • S - virus hepatitis B sensitif terhadap obat (nilai normal, mutasi resistan tidak terdeteksi);
    • I - agen penyebab infeksi dapat mengembangkan resistansi terhadap obat ini.

350СВ, Penentuan kuantitatif RNA virus hepatitis C oleh PCR [viral load] (Viral load HCV, RNA Virus Hepatitis C (tes kuantitatif)) dalam serum

Penentuan RNA virus hepatitis C dalam serum dengan metode polymerase chain reaction (PCR) dengan deteksi dalam "real time".

fragmen terdeteksi - situs spesifik RNA virus hepatitis C; Kekhususan tekadnya adalah 100%. Sensitivitas pendeteksian - 60 IU / ml Linear range: 10 ^ 2 - 1x10 ^ 8 IU / ml.

  • Tes kualitatif positif untuk keberadaan RNA virus hepatitis C dalam serum.
  • Penentuan viral load.
  • Menentukan taktik mengobati pasien.
  • Penilaian yang akurat tentang efektivitas pengobatan.

Interpretasi hasil penelitian mengandung informasi untuk dokter yang hadir dan bukan diagnosis. Informasi dalam bagian ini tidak dapat digunakan untuk diagnosis diri dan perawatan diri. Diagnosis yang akurat dibuat oleh dokter, menggunakan kedua hasil pemeriksaan ini dan informasi yang diperlukan dari sumber lain: anamnesis, hasil pemeriksaan lain, dll.

Satuan ukuran: jumlah RNA virus hepatitis C, dinyatakan dalam IU / ml. Untuk konversi ke salinan / ml, rasio 1 IU = 2,5 salinan RNA virus hepatitis C harus digunakan.

  • Informasi umum
  • Contoh hasil

* Periode yang ditentukan tidak termasuk hari pengambilan biomaterial

Deteksi PCR real-time.

contoh hasil pada formulir *

* Kami menarik perhatian Anda pada fakta bahwa ketika memesan beberapa studi, beberapa hasil penelitian dapat direfleksikan pada satu bentuk.

Di bagian ini, Anda dapat mengetahui berapa biaya untuk menyelesaikan studi ini di kota Anda, lihat uraian pengujian dan tabel interpretasi hasil. Memilih tempat untuk lulus analisis "Penentuan kuantitatif RNA virus hepatitis C oleh PCR [viral load] (Viral load HCV, RNA Virus hepatitis C (tes kuantitatif)) dalam serum darah" di Moskow dan kota-kota Rusia lainnya, jangan lupa bahwa harga analisis, Biaya prosedur biomaterial, metode dan waktu penelitian di kantor medis regional dapat bervariasi.

Hepatitis C. Analisis kuantitatif. Norma, hasil transkrip

Hepatitis C. Apa yang berbahaya bagi manusia? Bagaimana mendiagnosa infeksi. Apa yang dibutuhkan untuk analisis

Virus Hepatitis C. Seberapa berbahayanya. Bagaimana mengidentifikasinya tepat waktu.

Virus Hepatitis C atau HCV adalah penyakit menular yang membawa molekul asam ribonukleat.

Jenis virus ini dapat dengan mudah beradaptasi dengan kondisi habitat dan sering berubah menjadi berbagai bentuk penyakit, itulah mengapa sistem pertahanan tubuh kita begitu sulit untuk mengatasinya. Enam jenis genetik utama infeksi dan lusinan subtipe diklasifikasikan. Di wilayah kami, tiga jenis virus pertama sering ditemukan.

Menurut statistik, hanya seperempat dari kasus penyakit HCV terjadi tanpa komplikasi, dalam semua kasus lain, norma, jika infeksi berkembang menjadi proses kronis yang berdampak buruk pada organ internal. Jadi hepatitis mungkin dipersulit oleh fibrosis hati - proses mengganti sel-sel hati. Komplikasi lebih lanjut berkembang sesuai dengan reaksi berantai: sebagai akibat dari fibrosis, tumor kanker muncul, dan penyakit hati berkembang menjadi sirosis.

Dalam banyak kasus, infeksi memasuki tubuh manusia melalui pembuluh darah. Virus hepatitis C didiagnosis dengan beberapa metode. Pantau tingkat konsentrasi antibodi terhadap HCV. Infeksi tidak terjadi jika antibodi tidak ditemukan dalam darah pasien. Jika tidak, virus ini dipelajari lebih dalam, lakukan tes lain - PCR. Hanya metode ini memungkinkan untuk mengidentifikasi virus RNA hanya satu setengah minggu setelah infeksi, pada saat ketika tubuh tidak memiliki waktu untuk mulai memproduksi antibodi terhadap infeksi, dan konsekuensi dari infeksi tidak tercermin dalam kondisi umum, terutama dalam hasil penelitian lain, seperti BAC dan biopsi.

Analisis PCR untuk RNA: kuantitatif dan kualitatif. Hasil dekode

Viral load atau analisis kuantitatif PCR - analisis untuk menentukan tingkat infeksi pada plasma. Intinya, analisis kuantitatif adalah jumlah molekul asam ribonukleat yang menular dalam satu mililiter darah.

R-DNA adalah metode kuantitatif yang cepat, murah, dan tidak akurat untuk menentukan virus berdasarkan deteksi sel-sel bercabang. Tes ini mungkin tidak mengidentifikasi infeksi yang ada dalam tubuh karena sensitivitas yang buruk - sekitar 450 IU / ml.

Metode kuantitatif amplifikasi transkripsi memungkinkan Anda untuk menemukan sel-sel di tubuh RNA. Metode ini muncul relatif baru-baru ini, itu murah dan merupakan alat diagnostik yang cukup efektif. Sensitivitas tes adalah sekitar 10 IU / ml.

Mari mencoba menjelaskan hasil analisis. Di bawah ini adalah tabel dan decoding.

Penelitian PCR untuk hepatitis C: jenis, indikasi, transkrip

Viral hepatitis C adalah penyakit serius yang terjadi dengan kerusakan pada hati. Dalam delapan puluh persen pasien, itu menjadi kronis. Virus berkembang biak di sel-sel hati - hepatosit - dan menyebabkan kematian mereka. Jaringan mati digantikan oleh fokus jaringan ikat, fibrosis berkembang.

Ketika fibrosis berkembang, hati tidak dapat melakukan fungsinya, sirosis hati dimulai, yang berbahaya karena komplikasinya: peningkatan tekanan dalam sistem vena portal, perdarahan gastrointestinal, gangguan pembekuan darah, perubahan mental karena kerusakan pada nuklei otak.

Penyebab penyakit ini adalah infeksi oleh virus dari keluarga Flaviviridae, yang termasuk jenis virus RNA. Ini berarti bahwa bahan genetik dimana protein dari patogen disintesis dikodekan dalam molekul asam ribonukleat. Infeksi terjadi melalui darah, seksual, dan dari wanita hamil ke janin. Sayangnya, waktu yang cukup lama dapat terjadi antara infeksi dan dimulainya produksi antibodi - dari dua minggu hingga enam bulan. Ini tidak memungkinkan untuk menentukan infeksi dengan metode immunoassay dan memulai perawatan pada tahap awal.

Apa itu analisis PCR?

PCR adalah metode analisis molekuler, yang memungkinkan untuk mendeteksi bahan genetik dari patogen yang sudah ada dalam minggu pertama setelah infeksi menggunakan reaksi berantai polymerase. Studi ini memiliki spesifisitas yang tinggi, akurasi, dan memungkinkan tidak hanya untuk menentukan ada tidaknya virus, tetapi juga konsentrasi dan genotipe.

Untuk penelitian, darah pasien diambil di mana RNA virus berpotensi berada. Primer ditambahkan ke darah - daerah buatan yang disintesis dari gen yang diinginkan dengan panjang kecil, dan RNA polimerase adalah enzim khusus yang berulang kali meningkatkan jumlah materi genetik patogen. Dengan menggunakan peralatan khusus, beberapa siklus pemanasan dan pendinginan dilakukan. Kemudian bahan dianalisis dan dibandingkan dengan gen virus yang diketahui, atas dasar kesimpulan yang dibuat tentang ada atau tidak adanya infeksi.

Jenis analisis PCR untuk hepatitis C

Ada tiga jenis analisis PCR:

  1. Analisis kualitatif PCR. Tahap pertama penelitian. Ini memungkinkan Anda mengidentifikasi bahan genetik virus di dalam darah.

  • Analisis kuantitatif PCR. Memungkinkan Anda untuk menentukan viral load - konsentrasi bahan genetik patogen dalam satu mililiter darah. Penelitian ini dilakukan sebelum dimulainya terapi, dan kemudian pada sesi pertama, keempat, kedua belas, dan (jika perawatannya panjang) dua puluh empat minggu untuk mengevaluasi keefektifannya.

  • Genotyping Agen penyebab hepatitis C sering dan cepat bermutasi. Ada tujuh varian genotipe virus yang ditemukan di planet ini. Di Rusia, jenis pertama, kedua dan ketiga adalah umum. Masing-masing genotipe memiliki ketahanan yang berbeda terhadap terapi, misalnya, efektivitas pengobatan jenis pertama adalah enam puluh persen, dan untuk yang kedua dan ketiga angka ini mencapai delapan puluh lima. Oleh karena itu, untuk memilih obat yang tepat dan meresepkan pengobatan jangka waktu yang cukup, perlu ditentukan dengan tepat jenis virus apa yang terinfeksi oleh pasien.
  • Indikasi untuk analisis PCR untuk hepatitis C

    Studi PCR diresepkan dalam kasus-kasus berikut:

    • kontak dengan orang yang sakit di mana infeksi bisa terjadi;
    • immunoassay enzim positif;
    • tanda-tanda sirosis: perubahan ukuran hati, pembesaran limpa, penampilan di perut pleksus vena subkutan;
    • munculnya gejala kerusakan hati: nyeri di perut kanan, menguningnya kulit;
    • peningkatan aktivitas ALT dan AST dalam analisis biokimia darah;
    • sebelum memulai pengobatan untuk menentukan viral load;
    • untuk memantau efektivitas terapi antiviral;
    • setelah perawatan untuk mengendalikan kekambuhan;
    • di hadapan didiagnosis hepatitis B, untuk mengecualikan kerusakan hati campuran.

    Penjelasan studi PCR tentang hepatitis C

    Decoding analisis PCR dan immunoassay enzim untuk hepatitis C harus dilakukan oleh spesialis penyakit hepatologi atau infeksi. Menganalisis hasil PCR diperlukan dalam kombinasi dengan data analisis biokimia darah, biopsi dan ultrasound. Hanya dokter yang memenuhi syarat yang akan dapat menganalisis hasil penelitian dan, berdasarkan mereka, meresepkan perawatan yang benar.

    Decoding analisis kualitatif.

    Dalam bahan biologis yang dianalisis ditemukan bahan genetik dari patogen. Infeksi dikonfirmasi.

    Infeksi tidak ada, atau jumlah RNA patogen di bawah batas sensitivitas.

    Decoding analisis kuantitatif.

    Tingkat normal untuk orang sehat. Ini berarti bahwa tidak ada RNA hepatitis C dalam materi yang diteliti, atau konsentrasinya di bawah ambang sensitivitas penelitian.

    Konsentrasi RNA berada di bawah kisaran kuantifikasi. Hasil ini diinterpretasikan dengan sangat hati-hati, menghubungkan mereka dengan data dari penelitian lain, sering kali dipelajari kembali.

    Tingkat viral load pada konsentrasi yang diberikan dianggap rendah. Biasanya, penurunan jumlah virus berarti bahwa terapi tersebut berhasil.

    Lebih dari 8 * 10 ^ 5 IU / ml

    Tingkat viral load pada konsentrasi yang diberikan dianggap tinggi.

    Lebih dari 2,4 * 10 ^ 7 IU / ml

    Jumlah RNA di atas batas atas rentang kuantifikasi. Tidak mungkin untuk menarik kesimpulan tentang tingkat viral load dengan hasil ini. Biasanya dalam kasus seperti itu, tes diulang dengan pengenceran sampel darah.

    Decoding genotyping.

    Terdeteksi RNA dari genotipe tertentu

    Virus Hepatitis C dari genotipe dan subtipe tertentu terdeteksi dalam biomaterial. Hasilnya dikodekan dalam angka Romawi dan huruf Latin, misalnya - 1a, 2b. Secara total ada tujuh genotipe dan enam puluh tujuh subtipe, namun, di Rusia hanya ada tiga jenis pertama.

    Hepatitis C virus RNA terdeteksi

    RNA ditemukan dalam darah genotipe langka untuk Rusia, yang tidak dapat dikaitkan dengan tipe pertama, kedua, atau ketiga. Lebih banyak penelitian diperlukan.

    Hasil ini menunjukkan bahwa pasien sehat, atau bahwa jumlah RNA patogen terlalu kecil.

    Ada kemungkinan bahwa analisis PCR untuk hepatitis C negatif, dan assay immunosorbent terkait enzim mengenali antibodi terhadap virus. Ini berarti bahwa pasien menderita hepatitis C akut dan sembuh sendiri. Sekitar dua puluh kasus infeksi menghasilkan pemulihan spontan jika tubuh pasien memiliki ketahanan yang cukup terhadap infeksi.

    Meskipun PCR adalah tes yang sangat akurat, hasilnya mungkin terdistorsi dalam situasi berikut:

    • darah diangkut ke laboratorium dalam kondisi yang tidak sesuai, suhu dilanggar;
    • sampel biomaterial terkontaminasi;
    • ada jejak sisa heparin dan antikoagulan lainnya di dalam darah;
    • Peneliti ditemukan sebagai inhibitor - zat yang memperlambat atau menghentikan reaksi berantai polymerase.

    Keunggulan PCR dibanding metode lainnya

    1. Diagnosa pada tahap awal. PCR mendeteksi materi genetik dari agen penyebab. Dengan menggunakan analisis imunofluoresensi, hanya imunoglobulin yang dapat ditentukan - zat yang diproduksi tubuh sebagai respons terhadap infeksi. Dalam kasus infeksi hepatitis C, interval antara infeksi dan permulaan respon imun mungkin beberapa minggu dan bulan, saat ini ELISA tidak akan efektif. PCR akan memberikan jawaban pada minggu pertama setelah infeksi.

  • Probabilitas kesalahan rendah. Dalam materi yang diteliti menentukan luas materi genetik, yang merupakan karakteristik dari hanya satu jenis patogen. Ini menghilangkan hasil yang salah. Ketika kesalahan ELISA dimungkinkan, karena jenis antibodi yang sama dapat dilepaskan terhadap virus yang berbeda - antibodi tersebut disebut antibodi silang.

  • Sensitivitas tinggi. PCR memungkinkan untuk mendeteksi RNA agen penyebab bahkan dalam jumlah minimal. Ini memungkinkan untuk mengidentifikasi infeksi yang tersembunyi.
  • Cara mempersiapkan donor darah untuk studi PCR

    Untuk analisis PCR hepatitis C, darah vena dikumpulkan. Biasanya, dua bagian darah diambil dari pembuluh darah pasien pada saat yang sama: yang pertama dikirim untuk PCR dan yang kedua oleh ELISA. Hal ini dilakukan untuk lebih akurat menilai berapa banyak pasien terinfeksi virus, dan bagaimana kekebalan melawannya.

    Biasanya pasien harus mematuhi aturan berikut:

    • tes darah diambil di pagi hari;
    • Interval antara makanan terakhir dan donor darah harus delapan hingga sepuluh jam;
    • dua atau tiga hari sebelum analisis, perlu untuk meninggalkan makanan yang digoreng dan berlemak, dan alkohol;
    • selama dua puluh empat jam sebelum analisis, pasien harus menghindari aktivitas fisik: jangan membawa beban, jangan pergi ke gym atau kolam renang.

    Penanda Hepatitis C dan interpretasi hasil kuantisasi RNA HCV

    Baru-baru ini, pencarian "analisis kuantitatif hepatitis dengan decoding" semakin banyak muncul di mesin pencari sumber daya Internet.

    Memang, virus hepatitis menyebar dan berbahaya, penyakit ini mempengaruhi hati. Namanya berasal dari lat. hepatitis adalah peradangan hati. Infeksi terjadi melalui darah atau seksual, lebih sering, orang dewasa berusia antara 25 dan 50 tahun.

    Ada beberapa jenis penyakit ini. Hepatitis C tidak memiliki tingkat keparahan yang cerah, tetapi pada 40-70% kasus menjadi kronis, dapat menyebabkan sirosis dan kanker. Penyakit ini memerlukan diagnosis dan interpretasi data yang akurat, yang tekniknya telah dikembangkan. Salah satunya adalah analisis RNA RNA HCV oleh PCR.

    Analisis RNA RNA HCV oleh PCR

    RNA (ribonucleic acid) adalah sejenis makromolekul, salah satu komponen sel hidup. RNA bertanggung jawab untuk mengkode informasi genetik. Virus hepatitis C mengandung molekul RNA dan cenderung bermutasi. 6 subtipe-subtipenya diketahui, serta banyak subtipe.

    Penyakit pada tahap kronis menyebabkan fibrosis hati - jaringan ikat tumbuh, struktur organ secara bertahap terganggu. Fibrosis menerima perawatan tepat waktu, karena hati belum mengalami proses destruktif. Tidak seperti sirosis, penyakit hati ireversibel parah di mana fibrosis dapat berkembang tanpa mengambil langkah-langkah yang diperlukan pada waktunya.

    Seseorang dengan kecurigaan memiliki virus hepatitis B ditentukan oleh antibodi untuk itu. Jika tidak, penyakit ini dikecualikan, jika mereka tersedia, mereka menggunakan metode PCR (polymerase chain reaction). Dalam biologi molekuler, itu eksperimental, tetapi menempati tempat terkemuka di antara metode mendiagnosis penyakit menular. Dengan itu, Anda dapat secara signifikan meningkatkan konsentrasi fragmen molekul dalam sampel. 10 hari setelah infeksi, RNA sudah bisa ditentukan dalam darah.

    Metode ini adalah satu-satunya yang dapat mendeteksi penyakit pada tahap awal. Dengan cara lain (misalnya, dengan tes darah biokimia) ini tidak dapat dilakukan, karena hati belum terpengaruh.

    Metode ini ditemukan pada tahun 1993 oleh ahli biokimia Kerry Mullis, di mana ia memenangkan Hadiah Nobel. PCR adalah terobosan dalam bidang kedokteran dan sains, karena memungkinkan untuk mengidentifikasi secara cepat dan akurat infeksi dalam darah dan bahan biologis manusia lainnya. Dengan kata lain, metode ini mempercepat pengembangan diagnosis penyakit menular.

    Analisis RNA RNA HCV oleh PCR efektif untuk alasan berikut:

    • memiliki kepekaan yang baik - bahkan sejumlah kecil virus dalam darah terdeteksi;
    • virus itu sendiri ditentukan, bukan produk sampingan yang diciptakan olehnya;
    • Jenis patogen ditentukan.

    Perbedaan dalam analisis kuantitatif RNA HCV dari kualitatif

    Metode PCR mencakup dua cara utama untuk mempelajari bahan biologis untuk mencari virus hepatitis C:

    Studi-studi ini memiliki tugas yang berbeda.

    Analisis kualitatif hepatitis dengan decoding mengkonfirmasi keberadaan virus setelah antibodi terhadap penyakit tersebut telah ditemukan di dalam darah. Jika penelitian memberi hasil positif, maka penyakit itu terdeteksi. Dengan kata lain, seseorang terinfeksi. Jika hasil negatif diperoleh, ini berarti orang tersebut tidak terinfeksi, atau konsentrasi virus terlalu kecil. Konsentrasi ini tidak terdeteksi dengan cara ini.

    Selain itu, gambaran klinis penyakit ini didasarkan pada penanda hepatitis C dan interpretasi analisis. Penanda utama adalah imunoglobulin (antibodi) M dan G. Kehadiran mereka dalam darah pasien menunjukkan proses non-karakteristik untuk organisme yang sehat. Atas dasar keberadaan antibodi ini, pasien, sebagai suatu peraturan, menetapkan diagnosis utama.

    Analisis kuantitatif diresepkan untuk deteksi primer antibodi dan, jika perlu, pengobatan.

    Juga, analisis kuantitatif hepatitis C diresepkan untuk mendeteksi hepatitis campuran (infeksi dengan beberapa virus sekaligus).

    Analisis kuantitatif dengan decoding dilakukan untuk:

    • klarifikasi diagnosis akhir;
    • membangun prediksi tentang jalannya penyakit dan perawatannya - perluasan, pengurangan pengobatan atau perubahan taktik;
    • pemantauan terapi.

    Agar hasilnya benar, Anda harus mengikuti rezim mapan sebelum menyumbangkan darah:

    • datang ke laboratorium dengan perut kosong, terakhir kali Anda bisa makan 8 jam sebelum prosedur;
    • dua hari sebelum studi alkohol, makanan berlemak dan gorengan dilarang;
    • USG, pijat, fisioterapi sebelum penelitian tidak dapat dilakukan;
    • obat dilarang untuk hari itu, jika tidak mungkin untuk membatalkan asupan obat-obatan tertentu, ini dilaporkan sebelum pengambilan sampel darah;
    • sebelum prosedur, disarankan untuk mengurangi beban fisik dan syaraf sebanyak mungkin.

    Pemenuhan persyaratan ini akan menjadi kunci untuk mendapatkan hasil yang benar dari analisis kuantitatif dari hepatitis C.

    Interpretasi analisis kuantitatif

    Setelah mendapatkan indikator analisis kuantitatif, perlu untuk menguraikan hasil tes untuk hepatitis C. Hasilnya dihitung baik dalam satuan IU / ml dan dalam salinan per ml. Untuk mendapatkan hasil, dikonversi menjadi salinan, gunakan beberapa teknik.

    • HCV Monitor (faktor konversi ke ME - 2.7);
    • LCX HCV RNA (faktor konversi ke ME - 3.8).

    Meja Interpretasi analisis kuantitatif RNA HCV oleh PCR.

    Transkrip analisis kuantitatif hepatitis C

    Virus hepatitis C mampu berkembang biak dalam sel darah dan menyebabkan penyakit limfoproliferatif. Berkat berbagai mutasi, pertahanan kekebalan tubuh melemah, dan genotipe dan subtipe virus muncul. Dengan penentuan tipe tertentu yang tepat dan tepat waktu, efektivitas terapi antiviral bergantung. Bahaya infeksi adalah bahwa penyakit itu tidak bergejala. Hanya 15 persen dari 100 dapat mengalami mual dan muntah, penurunan berat badan dan demam.

    Definisi virus hepatitis C

    Tingkat standar hepatitis C adalah dalam ukuran 40-60 nm, dengan sebagian besar lipid, kerusakan hati yang diakibatkan oleh penyakit akut atau kronis. Hepatitis C, yaitu, virus RNA dari keluarga Togaviridae, sangat resisten, ditularkan melalui transfusi darah atau penggunaan benda-benda non-steril, persediaan kebersihan yang tidak tepat, dll. Analisis kuantitatif memungkinkan Anda untuk memeriksa darah dan mengidentifikasi struktur genetik dari virus yang terinfeksi.

    Untuk menentukan hepatitis C dan genotipnya, analisis kuantitatif dilakukan. Tergantung pada alat analisa, tiga tingkat insiden virus RNA dapat ditentukan.

    Subtipe dapat menghasilkan berbagai modifikasi, sehingga spesifisitas dan sensitivitas penganalisis harus seratus persen. Selain mendeteksi penyakit pada pasien, perlu untuk menentukan tingkat keparahannya. Beberapa laboratorium tidak memiliki semua data pada decoding virus RNA, ada kemungkinan respon positif yang salah.

    Penelitian tentang hepatitis C akan lebih akurat ketika mempelajari indikator ini:

    Menarik perhatian pada hasil indikator ini dan kondisi umum tubuh, hasilnya ditampilkan menunjukkan tingkat infeksi, bentuk, dan jumlah sel hepatitis C dalam darah. Ini berkontribusi pada proses penyembuhan dan efektivitas terapi antiviral.

    Jenis analisis untuk hepatitis C

    Sebuah reaksi berantai multi-dimensi (PCR) memberikan gambaran tentang jumlah partikel DNA dalam analisis pasien yang diambil, dan akan mengidentifikasi agen infeksi dengan benar.

    Agen penyebab penyakit infeksi dapat terjadi. Infeksi hati, seperti hepatitis C, dapat diobati pada saat kita dideteksi pada waktu yang tepat. Jika dicurigai ada virus, analisis PCR dilakukan.

    Mengingat bahwa untuk waktu yang lama gejala-gejala virus dapat disamarkan, seseorang mungkin tidak merasakan timbulnya penyakit. Tetapi dengan pemeriksaan menyeluruh pada 60-70% kasus, hepatitis C terdeteksi, analisis pertama, di mana ELISA, maka diagnosis PCR berikut. Analisis dilakukan dalam periode tertentu untuk menentukan stadium penyakit dan meresepkan pengobatan yang tepat. Untuk melakukannya tanpa itu, tanpa menerapkan semua prosedur ini, adalah mungkin, divaksinasi terhadap hepatitis.

    Pertama, ada analisis kualitatif yang hanya menegaskan hipotesis tentang infeksi, dan kemudian kuantitatif, menentukan beban pada hati. Pilihan yang ideal adalah hasil negatif untuk hepatitis C di dalam materi genetik pasien.

    Analisis kualitatif dan kuantitatif

    Ada analisis kualitatif dan kuantitatif. Esensi dari yang pertama adalah bahwa ia menentukan adanya infeksi dalam darah. Dan itu berarti virus itu menginfeksi sel-sel hati yang sehat. Ketika antibodi terhadap hepatitis C ditemukan pada pasien, tes kualitatif segera dilakukan. Angka yang harus diberikan hasilnya "tidak terdeteksi dalam darah". Ketika menentukan konsentrasi virus, ada kebutuhan untuk mengetahui sensitivitas sistem diagnostik, karena orang yang sedang menjalani terapi antivirus dapat melakukan analisis. Tingkat kepekaan penganalisa tidak boleh kurang dari 50 IU / ml.

    Ketika virus terdeteksi, analisis kuantitatif dilakukan, dengan kata lain, viral load, yang menentukan konsentrasi virus dalam darah dan tingkat keparahan penyakit.

    Viral RNA, yang dalam jumlah tertentu darah, didefinisikan sebagai norma pada tingkat 1 ml per 1 sentimeter kubik. Setelah mengukur viral load, adalah mungkin untuk menilai tingkat infeksi lingkungan yang masih tidak terinfeksi. Segera setelah konsentrasi hepatitis C naik dalam darah, perlu untuk mengisolasi dari lingkungan.

    Penting pada tahap pertama untuk mendeteksi tingkat konsentrasi hepatitis, untuk menentukan laju rehabilitasi. Jika tingkat hepatitis C terlampaui lebih dari 800 ribu IU / ml, itu dianggap terlalu tinggi, dengan peningkatan hingga satu juta - kritis. Jika rentang kuantitatif kurang dari 400 ribu IU / ml, dianggap bahwa infeksi pada orang-orang di sekitarnya akan kurang mungkin. Angka ini menjelaskan bahwa hepatitis C ada dalam tubuh dalam dosis yang sangat kecil. Analisis tidak dapat menentukan nilai kuantitatif dari partikel RNA virus, sehingga diangkat kembali beberapa kali untuk diagnosis yang akurat.

    Apa itu PCR?

    Saat ini ada sejumlah besar berbagai penyakit. Dan bukan jumlah metode yang lebih kecil untuk tekad mereka. Karena agen infeksi telah belajar untuk mengakar di lingkungan dan berevolusi dengan mudah, teknologi terbaru digunakan untuk mendiagnosisnya. Polymerase chain reaction (PCR) adalah metode yang lebih cepat dan lebih akurat yang berusaha menemukan agen penyebab penyakit dengan secara signifikan meningkatkan porsi DNA virus hepatitis dalam sampel. Tentang dia sering menulis: mencari jarum di tumpukan jerami, dan kemudian membangun setumpuk jarum.

    Jenis Metode PCR

    Alokasikan analisis kualitatif dan kuantitatif hepatitis. Untuk menentukan apakah virus ada di dalam tubuh, dan mereka yang telah menemukan antibodi terhadap hepatitis C, melakukan pengujian kualitas tinggi. Analisis dekode memberikan hasil: "positif"; "Negatif". Makna negatif berarti: baik orang itu sehat atau tidak ada cukup agen dalam darah dan mereka tidak dapat ditemukan. Oleh karena itu perlu dilakukan pemeriksaan ulang setelah beberapa saat.

    Hasil positif menunjukkan adanya infeksi. Ini hampir selalu merupakan nilai yang pasti. Hasil yang salah biasanya bergantung pada faktor manusia (penyimpanan tidak tepat atau tidak sesuai dengan aturan metode). Ketika tarifnya, hasilnya negatif. Sebelum pengujian tidak ada aturan khusus, ambil darah dari pembuluh darah.

    Jika ditemukan, lakukan analisis kuantitatif (viral load) - ini memberikan nilai numerik: berapa banyak RNA dari virus hepatitis saat ini dalam volume yang ditentukan dari bahan yang diteliti. Dengan perkembangan aktif infeksi, dapat dideteksi pada 1-2 minggu pada orang yang terinfeksi. Darah juga biasanya diperiksa karena agen bersirkulasi dengan bebas di dalamnya.

    Fitur analisis PCR kuantitatif

    Perbedaan dalam analisis kuantitatif adalah bahwa tidak semuanya berlalu. Kualitatif - menentukan keberadaan, dan kuantitatif - membantu dengan konfirmasi kesimpulan dari "virus hepatitis", prognosis perjalanan penyakit dan menentukan jalannya pengobatan. Seberapa efektif terapi adalah dengan jumlah RNA sebelum dan selama pengobatan. Juga dengan bantuannya menentukan pengangkatan dosis obat.

    Indikasi

    Sebagai aturan, itu diproduksi sebelum dimulainya pengobatan. Indikasi utama dapat berupa:

    • penentuan viral load dan kontrol terapi antiviral;
    • PCR berkualitas tinggi menemukan antibodi hepatitis C;
    • menemukan hepatitis C akut dan kronis;
    • keberadaan hepatitis campuran;
    • ketika merencanakan perawatan;
    • jika studi kualitatif masih menemukan adanya penyakit setelah minggu kedua belas terapi.

    Lihat juga, berapa viral load pada hepatitis: terapi rendah berhasil dilakukan; meningkat - perawatan tidak efektif dan perlu diubah.

    Apa yang dilakukan pada berbagai tahap penyakit?

    Pada fase yang berbeda dari penyakit, penelitian dilakukan untuk memberikan tinjauan tentang manfaat perawatan dan perencanaan durasinya. Dengan respons yang baik terhadap terapi, ini dipersingkat. Jika tidak, dengan lambatnya penarikan virus, perjalanan pengobatan akan diperpanjang. PCR untuk hepatitis melakukan terapi 1,4, 12, 24 minggu. Ketika indikator tidak jatuh setelah 12 minggu, mereka menyimpulkan bahwa terapi tidak cocok untuk organisme ini. Analisis ini digunakan untuk menentukan seberapa aktif infeksi dan seberapa besar kemungkinan untuk menularkannya. Misalnya, selama kehamilan ada risiko menulari bayi. Setelah terapi, identifikasi risiko kekambuhan penyakit.

    Dekripsi

    Setelah melakukan penelitian, analisis dapat diuraikan bukan dalam angka, tetapi dengan kata-kata: "di bawah rentang pengukuran" dan "tidak terdeteksi." PCR kuantitatif lebih sensitif secara kualitatif. Kesimpulan "tidak terdeteksi" dapat mengatakan bahwa infeksi tidak ditemukan. "Di bawah rentang pengukuran" - tes tidak menemukan virus, tetapi dalam nilai kecil. Dalam situasi ini, lakukan penelitian kedua.

    Viral load adalah penentuan jumlah RNA infeksius dalam volume darah yang ditentukan (secara kuantitatif 1 ml = 1 sentimeter kubik). Diformulasikan dalam pengukuran internasional IU / ml. Laboratorium yang terpisah menunjuk salinan / ml. Sistem uji yang berbeda dapat menguraikan penerjemahan komponen ke dalam nilai internasional dengan caranya sendiri. Tabel 1. Menguraikan analisis kuantitatif RNA virus

    Tingkat analisis kuantitatif untuk hepatitis C

    Ketika seseorang sehat, normanya adalah - "tidak terdeteksi". Pada orang yang sakit, pengurangan dosis virus dalam hasil per unit logaritmik akan menjadi norma, yang dimanifestasikan oleh penurunan jumlah nol dalam analisis oleh satu (misalnya, dari 1 * 106 IU / ml hingga 1 * 105 IU / ml). Batas kisaran konsentrasi virus yang menentukan amplificator berada dalam kisaran 1,8 * 102 - 2,4 * 107 IU / ml. Pengobatan hasilnya:

    • konsentrasi rendah - dari 600 IU / ml hingga 3 * 104 IU / ml;
    • sedang - dari 3 * 104 IU / ml hingga 8 * 105 IU / ml;
    • tinggi - di atas 8 * 105 IU / ml.

    Penyimpangan

    Ketika perubahan hasil tes berada di luar norma, ini mungkin menunjukkan kembalinya penyakit dan perbanyakan virus. Faktor-faktor tertentu dapat mempengaruhi penerimaan hasil yang tidak dapat diandalkan, misalnya, kontaminasi sampel; kehadiran dalam darah heparin dan zat-zat yang memperlambat aksi komponen PCR; kesalahan laboratorium; ketidakpatuhan terhadap aturan tes.

    Juga, hasil di beberapa laboratorium dapat bervariasi, mungkin ada metodologi penelitian yang berbeda. Untuk mengetahui bagaimana dampak hati dan bahaya penyakit, tidak cukup untuk melakukan PCR hepatitis kuantitatif. Selain itu menjalani prosedur biokimia dan biopsi.

    Saat merencanakan pengobatan, virus tersebut di-genotip. Karena fakta bahwa hepatitis C mampu berubah, ada beberapa kelompok. Untuk berbagai jenis perawatan dapat bervariasi. Ada situasi ketika beberapa spesies hadir, tetapi analisis menemukan satu yang berlaku. Maka tes ulang.

    Keuntungan dari metode ini

    Metode PCR memungkinkan untuk memberikan pendapat dan meresepkan perawatan yang benar. Keuntungan dari teknik ini:

    • Kecepatan hasil - tidak memerlukan perbedaan dan budidaya spesies patogen. Mengotomatiskan proses memungkinkan Anda untuk memproses dan mempelajari materi dengan hasil dalam 4-5 jam.
    • Keakuratan menentukan patogen - menemukan bagian khusus dari DNA, secara langsung menunjukkan adanya penyakit. Misalnya, ELISA - menemukan penanda protein (produk limbah bakteri), yang tidak memberikan bukti yang akurat tentang keberadaan penyakit.
    • Spesifitas - suatu zat dipelajari yang hanya karakteristik patogen spesifik, yang mengecualikan reaksi terhadap agen co-reacting palsu.
    • Kerentanan - dapat mendeteksi jumlah terkecil dari total deskripsi virus.
    • Universalitas - didasarkan pada penemuan fragmen DNA atau RNA organisme tertentu. Ini memungkinkan untuk melakukan diagnosa untuk setiap agen dari satu biomaterial, jika metode lain tidak berdaya.
    • Mendeteksi tidak hanya infeksi yang jelas, tetapi juga laten - efektif untuk mempelajari agen yang sulit tumbuh, tidak tumbuh, persisten.
    • https://www.youtube.com/watch?v=lBi-d6jAKxQ

    Melalui penelitian ini, setiap orang dapat didiagnosis untuk memverifikasi tidak adanya penyakit. Tetapi untuk fakta yang dapat diandalkan Anda harus mengikuti instruksi secara ketat. PCR digunakan dalam berbagai bidang: ilmu forensik, penentuan garis ayah, untuk mendiagnosis berbagai virus, untuk mendeteksi alergi obat, kloning gen, mutagenesis, sekuensing DNA.

    Kapan tes viral load ditetapkan?

    Penelitian ini diresepkan oleh dokter dalam hal respon positif dalam diagnosis hepatitis C. Sebagai aturan, itu ditunjuk bersamaan dengan analisis untuk menentukan genotipe dari virus hepatitis C. Apa decoding dari analisis kuantitatif untuk hepatitis C menunjukkan? Pertama-tama, analisis ini menunjukkan bagaimana terinfeksi pasien dan, karenanya, menular. Penentuan kuantitatif dari virus dalam darah juga memungkinkan Anda untuk menentukan seberapa efektif regimen yang diterapkan. Dokter meresepkannya setelah 4, 12 dan 24 minggu pengobatan. Penurunan viral load menunjukkan bahwa terapi dipilih dengan benar. Juga, analisis diangkat setelah 24 minggu dari akhir terapi.

    Penelitian telah menunjukkan bahwa tingkat viral load tidak selalu mempengaruhi laju perkembangan proses patologis di hati. Kasus pengangkutan virus menunjukkan bahwa orang itu sendiri mungkin tidak sakit dengan hepatitis C, tetapi menjadi sumber infeksi bagi orang lain. Selain itu, karier setiap saat bisa menjadi sakit. Virus hepatitis C diaktifkan ketika kekebalan menurun, misalnya, setelah infeksi virus pernapasan akut, influenza, stres berat atau hipotermia.

    Metode penularan hepatitis C

    Anda bisa terkena hepatitis C:

    • melalui darah. Infeksi dimungkinkan selama transfusi darah yang terkontaminasi, selama operasi dan manipulasi dengan darah, kedokteran gigi, pengangkatan tahi lalat dan kutil, jika kesalahan dibuat dalam instrumen sterilisasi;
    • di salon kecantikan saat melakukan tato, tindikan, manikur dan pedikur terpangkas, pembersihan wajah, dll.;
    • dari ibu ke anak selama persalinan (5%);
    • selama hubungan seks tanpa kondom dengan orang yang terinfeksi;
    • saat mengambil obat suntik dengan jarum suntik yang tidak bisa dibuang;
    • selama pertolongan pertama kepada seseorang yang terinfeksi virus, jika tidak mematuhi langkah-langkah keamanan

    Tidak seperti hepatitis lainnya, metode penularan hepatitis C terutama terkait dengan darah. Cara domestik untuk mendapatkan hepatitis C tidak mungkin! Baik jabat tangan, ciuman biasa (dari alam non-seksual) dan komunikasi, atau penggunaan barang-barang rumah tangga dapat menularkan hepatitis C! Jangan hanya mengambil manicure dan aksesoris cukur dari orang yang menderita hepatitis C! Ketika memberikan pertolongan pertama untuk cedera pada pasien dengan hepatitis C, Anda harus selalu memakai sarung tangan! Virus mati ketika direbus setelah beberapa menit, dan ketika dicuci pada 60 ° C - setelah tiga puluh menit. Pembekuan tidak membunuh virus. Efek virus pada radiasi UV virus. Setelah 16 jam, virus mati pada suhu kamar!

    Diagnostik PCR

    PCR adalah metode yang paling umum dan akurat untuk menentukan virus dan kemampuan kuantitatifnya. Metode ini mampu mengidentifikasi virus dalam berbagai bentuk dan mendiagnosis penyakit yang kurang dikenal.

    Analisis PCR (polymerase chain reaction) dilakukan dengan mengambil darah dan menentukan RNA virus di dalamnya.

    Enzim spesifik ditambahkan ke sampel darah dan ditentukan dalam reaktor khusus. Ada kloning sel.

    Pertama satu sel dibagi menjadi dua salinan, lalu setiap salinan dibagi menjadi dua lagi. Jadi, setelah sintesis salinan, ratusan sel DNA muncul.

    DNA dapat dibandingkan dengan database informasi tentang semua jenis patogen dan mengidentifikasi infeksi pada tahap awal penyakit.

    Keuntungan dari metode PCR:

    • Banyak metode diagnostik hanya mengungkapkan keberadaan virus dengan mengisolasi produk limbah mikroorganisme infeksi dalam darah. Metode PCR secara langsung menunjukkan agen penyebab infeksi;
    • Kekhususan PCR adalah bahwa fragmen DNA yang unik terdeteksi dalam sampel darah untuk diperiksa. Ini menghilangkan kemungkinan hasil salah;
    • PCR bahkan dapat mendeteksi sel tunggal dari infeksi dan mendiagnosis beberapa patogen dalam satu sampel darah.

    Analisis kualitatif

    Membantu mendeteksi virus di dalam darah. Dengan hasil positif, Anda harus melanjutkan pemeriksaan dan melakukan analisis kuantitatif yang akan menentukan tahap penyakit, dan memberi dokter kesempatan untuk merencanakan taktik pengobatan yang paling menguntungkan. Ketika melakukan analisis ini hanya diperbolehkan dua kesimpulan:

    • "Terdeteksi." Menunjukkan adanya virus di dalam darah. Hasil serupa dianggap positif. Di dalam darah, virus RNA sudah terdeteksi, yang sudah mulai berkembang, menginfeksi sel-sel sehat dan menginfeksi hati.
    • "Tidak terdeteksi." Dia mengatakan bahwa tidak ada Hepatitis C RNA dalam sampel darah.Ada juga kasus bahwa konsentrasi virus dalam sampel uji dapat diabaikan dan tidak jatuh dalam kisaran sensitivitas uji. Perlu dicatat bahwa analisis mengungkapkan infeksi pada hari ke 10 setelah infeksi, yang memungkinkan untuk menentukan virus bahkan sebelum manifestasi eksternalnya yang signifikan.

    Analisis kuantitatif

    Mendeteksi konsentrasi materi genetik virus dalam volume darah tertentu. Ini tidak hanya memungkinkan untuk menentukan tingkat keparahan penyakit, tetapi juga memungkinkan Anda untuk melihat gambaran klinis lengkap penyakit (termasuk selama perawatan). Sebagai hasil dari analisis ini, hanya ada 3 kesimpulan:

    Hasilnya adalah "Positif." Hasilnya dalam indikator numerik mencerminkan viral load. Konsentrasi virus menentukan jumlah virus dalam 1 mililiter, yang sama dengan 1 sentimeter kubik darah. Unit pengukuran analisis ini adalah IU / ml (unit yang diterima secara internasional per mililiter). Jika konsentrasi partikel virus kurang dari 8x10 000 IU / ml, maka pengobatan itu efektif, jika sebaliknya, ada baiknya mengubah taktik pengobatan.

    Jika viral load selama minggu pertama terapi turun menjadi 60%, maka efektivitas pengobatannya tinggi. Tingkat rendah hingga 400.000 IU / ml, dan tinggi adalah dari 1.000.000 IU / ml. Viral load menentukan luasnya penyakit dan kemungkinan penularannya. Dengan tingkat konsentrasi sel viral yang tinggi dalam darah, risiko penularan penyakit secara vertikal atau seksual cukup besar.

    • Hasil "Tidak Valid". Hasil ini berarti bahwa virus terdeteksi dalam tubuh selama analisis kualitatif, tetapi analisis kuantitatif tidak dapat menentukan konsentrasinya dalam darah. Ini terjadi ketika jumlah partikel virus RNA dalam darah berada di bawah jangkauan deteksi.
    • Hasilnya adalah "Tidak terdeteksi." Analisis decoding berarti tidak adanya RNA sel hepatitis C dalam sampel darah.

    Analisis kuantitatif CRP dilakukan di semua tahap penyakit. Untuk mengidentifikasi analisis perawatan yang optimal dilakukan tepat waktu: (4, 12, 16, dan 24 minggu). Jika hasilnya menunjukkan penurunan viral load, perawatan dapat dianggap efektif. Setelah selesai terapi, analisis kuantitatif dilakukan untuk mendeteksi kekambuhan, yaitu, deteksi virus setelah aktivitasnya dikurangi seminimal mungkin.

    01 Prinsip diagnosis HCV

    Diagnostik serologis hepatitis C didasarkan pada deteksi penanda unik virus hepatitis C dalam sampel plasma manusia: antibodi terhadap antigen HCV yang termasuk imunoglobulin kelas G dan M (anti-HCV-IgG dan anti-HCV-IgM), dan asam nukleat agen penyebab (RNA) HCV).

    Prinsip metode ini didasarkan pada deteksi dalam bahan uji fragmen DNA spesifik (RNA) dari berbagai objek biologis, sintesis selektif mereka dan deteksi lebih lanjut dari produk reaksi amplifikasi fragmen-fragmen ini.

    Modifikasi kuantitatif PCR memberikan gambaran tentang HV, yang sangat penting untuk prediksi dan pengendalian terapi untuk virus hepatitis C.

    02 Perhitungan viral load pada virus hepatitis C

    Biasanya, RNA HCV dapat dideteksi dalam darah sedini minggu pertama setelah infeksi, hingga muncul anti-HCV (anti-HCV), yang mungkin tidak terdeteksi selama 8-12 minggu pertama. Kedua penanda infeksi HCV dapat dideteksi dalam darah dalam berbagai kombinasi, yang membutuhkan interpretasi klinis yang tepat.

    Oleh karena itu, untuk membentuk diagnosis akhir, disarankan, terutama ketika hanya satu dari dua penanda HCV yang terdeteksi, untuk menguji kembali sampel darah untuk anti-HCV dan HCV RNA.

    Penelitian ini melakukan deteksi dan penghitungan jumlah salinan RNA HCV oleh PCR waktu nyata.

    Dalam praktek klinis, metode diagnostik PCR yang paling canggih adalah REAL-TIME PCR, yang mengecualikan kontaminasi sampel dan memberikan kesimpulan tentang keberadaan dan jumlah RNA HCV dua minggu setelah infeksi yang dituju. Teknik ini, antara lain, menentukan genotipe virus dengan viral load dalam satu penelitian. Spesifitas klinis dari tes ini adalah 100%. Rentang standar nilai uji adalah dari 15 hingga 100000000 IU / ml. Genotipe yang teridentifikasi dari virus 1-6 (1, 2, 3, 4, 5, 6). Ambang batas untuk tes positif ketika virus RNA dapat dideteksi adalah 15 IU / ml. Keuntungan utama dari metode PCR adalah sensitivitas analisis yang sangat tinggi - hingga 1 salinan DNA genomik dari agen infeksius dalam sampel uji dalam modifikasi PCR yang disarangkan.

    PCR adalah metode modern yang sangat sensitif. Namun keuntungannya - sensitivitas yang tinggi - pada saat yang sama kerentanannya, yaitu, itu mengarah pada hasil yang salah bahkan ketika analisis dilakukan oleh spesialis berkualifikasi tinggi di laboratorium yang dilengkapi dengan baik. Hasil penelitian di laboratorium yang berbeda sering tidak bersamaan, yang menunjukkan perlunya standarisasi sistem diagnostik untuk diagnostik PCR dan peningkatan perhatian pada pelaksanaan jenis penelitian ini. Biaya tinggi, durasi analisis, kompleksitas metode dan perbedaan antara hasil yang diperoleh di laboratorium yang berbeda membatasi penggunaan PCR dalam praktek yang luas.

    Hasil penelitian dikeluarkan pada formulir dengan tabel yang menunjukkan tingkat terdeteksi RNA virus (jumlah salinan atau konsentrasi dalam IU / ml). Untuk ekspresi IU / ml, simbol matematika lainnya dapat digunakan, misalnya, 1. 9 * 10 ^ 5 (1. 9 oleh 10 dalam 5 derajat).

    03 Indikasi untuk belajar

    Indikasi utama untuk penentuan viral load dalam virus hepatitis C adalah:

    • laboratorium mengkonfirmasi keberadaan kualitatif RNA patogen dalam serum darah;
    • apakah dokter yang hadir memiliki pertanyaan tentang pilihan obat antiviral;
    • kebutuhan untuk penilaian yang akurat tentang efektivitas pengobatan.

    Studi ini tidak memerlukan persiapan khusus dari pasien.

    04 Interpretasi hasil

    Biasanya, orang yang sehat tidak memiliki RNA patogen, yaitu BH adalah nol. BH dinyatakan dalam satuan Internasional per ml. Alokasikan BH besar (> 400.000 IU / ml) dan BH kecil (100000000 IU / ml

    Untuk memantau efektivitas terapi antiviral, analisis PCR real-time harus digunakan dengan tingkat deteksi minimum 15 IU / ml. Untuk membedakan antara BH rendah dan tinggi, 500.000 IU / ml RNA virus digunakan.

    Tingkat viral load dimonitor untuk kedua hepatitis C akut dan kronis. Viral load dicatat selama pengobatan, pada penyelesaiannya dan 24 minggu setelah pengobatan.

    Pada wanita hamil, indikator ini ditetapkan untuk tujuan diagnostik, karena terapi antiviral selama kehamilan tidak dilakukan.

    Data tentang tingkat viral load digunakan untuk memilih dan mengontrol terapi antivirus, tetapi tidak ada yang memberikan gambaran tentang hasil penyakit, terutama dalam kasus bentuk kronis HCV dengan fungsi hati yang normal.

    Selama perawatan lanjutan, pasien sekali setahun menjalani penentuan kualitatif RNA HCV dalam darah. Jika hasil kualitatif positif, maka analisis kuantitatif lebih lanjut dilakukan dengan penentuan viral load.

    05 Kesimpulan

    Hingga saat ini, berbagai metode yang berbeda digunakan untuk mendiagnosis HCV, di antaranya penghitungan kuantitatif viral load adalah kunci keberhasilan pengobatan pasien. Keuntungan dari metode ini adalah keandalan, sensitivitas dan spesifisitas klinis yang tinggi. Selain itu, tingkat viral load adalah indikator yang sangat jelas tentang efektivitas pengobatan dengan obat antiviral, baik dalam monoterapi maupun dalam kombinasi.

    Tetapi atas dasar tingkat viral load dalam hal tidak ada yang bisa menilai jalannya dan hasil dari penyakit. Oleh karena itu, indikator ini informatif untuk dokter yang hadir hanya dalam kombinasi dengan data lain - hasil fibroskanning dan biopsi dengan mikroskopi sel hati. Dengan demikian, perhitungan tingkat viral load sama sekali tidak menggantikan, tetapi hanya melengkapi metode diagnostik yang ada yang digunakan dalam praktik klinis.

    Tingkat viral load adalah indikator yang paling dapat diandalkan, memungkinkan untuk menetapkan keberadaan virus pada pasien dan memantau terapi.


    Artikel Terkait Hepatitis