Apa itu analisis PCR dan viral load?

Share Tweet Pin it

Polymerase chain reaction (PCR) adalah metode laboratorium untuk menentukan DNA dan RNA. Ini pertama kali diuji hampir setengah abad yang lalu oleh American Carey Mullis. Analisis supersensitif ini mampu mengidentifikasi pembawa genom oleh satu molekul sumber yang terkandung dalam darah, air liur atau kulit.

Metode PCR memiliki prospek yang bagus, tidak hanya digunakan dalam kedokteran, tetapi juga dalam rekayasa genetika dan ilmu forensik. Dengan itu, klon dan buat tipe DNA baru, tentukan tingkat kekerabatan. Seorang penjahat diidentifikasi oleh sepotong epitel yang ditemukan di TKP.

Analisis PCR untuk hepatitis - apa yang mereka lakukan dan mengapa?

Mengapa analisis PCR diperlukan untuk dugaan hepatitis C, apa itu?

Virus Hepatitis C adalah virus RNA yang mengandung 6 genotipe dan hingga 500 subtipe. Dari semua hepatitis, virus ini memiliki kapasitas mutasi tertinggi dan mengatasi penghalang pelindung sistem kekebalan tubuh. Dari jumlah total kasus hepatitis, virus C menyebabkan 70% kasus bentuk kronis dan 30% dari sirosis dan kanker hati.

Inti dari metode ini: bagian dari gen yang diteliti dengan bantuan enzim dan kondisi khusus yang dipaksa untuk berkembang biak secara in vitro. Analisis PCR memungkinkan untuk menentukan strain virus, yang tanpanya tidak mungkin untuk melakukan pengobatan yang efektif: masing-masing genotipe berbeda sensitif terhadap obat antiviral. Dua jenis PCR digunakan:

Terapi antiviral membutuhkan pemantauan konstan untuk segera menyesuaikan pengobatan, dan untuk tujuan ini juga digunakan reaksi rantai polimerase.

PCR kualitatif dan kuantitatif

PCR kualitatif pada hepatitis C memberikan jawabannya: apakah ada strain virus C dalam darah pasien dan yang mana. Genotyping diperlukan untuk memperjelas diagnosis, prognosis penyakit dan menentukan waktu pengobatan.

Menurut klasifikasi yang diterima, sebuah gen ditunjukkan oleh angka, dan subtipe adalah huruf Latin kecil.

Persiapan khusus berdasarkan bahan alami.

Harga obat

Tinjauan perawatan

Hasil pertama dirasakan setelah seminggu administrasi.

Baca lebih lanjut tentang obat

Hanya 1 kali per hari, 3 tetes

Instruksi penggunaan

Mengartikan tabel virus genotipe C:

  • Genotipe 1a, 1b, 1c
  • Genotipe 2a, 2b, 2c, 2 d
  • Genotipe 3a, 3b, 3c, 3d, 3e, 3f
  • Genotipe 4a, 4b, 4c, 4d, 4e, 4f, 4g, 4h, 4i, 4j
  • Genotipe 5 a
  • Genotipe 6 a

Genotipe paling umum 1,2,3. Di Rusia, yang paling umum adalah 1a, 1b, 2, dan 3 strain virus C.

Genotipe virus 1b lebih sulit daripada yang lain untuk diobati, di 90% menjadi kronis, dimana 30% terlahir kembali sebagai kanker hati atau cirrhosis.

Genotipe 2a dan 3a memiliki derajat kronis 33-50%, lebih responsif terhadap terapi antiviral.

Ketika mengkonfirmasikan adanya virus, tes PCR kuantitatif dilakukan untuk hepatitis C, yang digunakan untuk menghitung jumlah molekul RNA yang ada dalam sampel laboratorium pasien.

Analisis dekode

Analisis PCR berkualitas tinggi memiliki dua jawaban:

PCR negatif berarti bahwa patogen tidak terdeteksi dalam sampel darah.
Jawaban positif menunjukkan sebaliknya: RNA satu atau genotip lain dari virus C ditemukan.

Probabilitas keandalan hasilnya adalah 95%. 5% sisanya adalah kesalahan yang disebabkan oleh seseorang. Kemungkinan ini diizinkan karena persyaratan tinggi untuk penelitian:

  • aturan untuk penyimpanan reagen;
  • kualifikasi yang sesuai dari staf medis;
  • kemurnian biomaterial.

Kit PCR sendiri memiliki akurasi diagnostik 100%.

PCR kuantitatif RNA Hepatitis C memungkinkan untuk menentukan viral load pada tubuh pasien. Dengan bantuannya:

  • stadium penyakit ditentukan (akut, kronis);
  • menentukan efektivitas pengobatan antivirus;
  • Kebutuhan akan biopsi hati sedang diselidiki.

Dalam beberapa kasus, pasien tidak merasakan tanda-tanda penyakit, sedangkan infeksi HCV terdeteksi oleh metode PCR. Ini berarti bahwa penyakit ini pada tahap awal perkembangan atau dalam bentuk kronis. Studi tambahan diperlukan untuk memperjelas diagnosis, untuk memulai awal pengobatan antivirus.

Viral load HCV

Viral load menunjukkan aktivitas virus hati, seberapa aktif reproduksinya terjadi.

Apa ini?

PCR kuantitatif hepatitis C diukur dalam Unit Internasional per 1 ml atau IU / ml, yang berarti berapa banyak salinan asam ribonukleat dari strain tertentu dari virus C yang ditemukan dalam 1 ml darah yang sedang diuji.

Apa yang tinggi, apa yang rendah?

Analisis viral load memungkinkan untuk menentukan keberadaan RNA virus pada konsentrasi 50 IU / ml. Viral load normal adalah ketika tidak ada molekul RNA HCV yang terdeteksi oleh PCR.

Tabel viral load:

  • konsentrasi rendah 600 IU / ml 3 * 104 IU / ml;
  • sedang - konsentrasi dari 3 * 104 IU / ml hingga 8 * 105 MM;
  • tingkat tinggi lebih dari 8 * 105 IU / ml.

Viral load yang rendah adalah sinyal bahwa pengobatan terapeutik dipilih dengan benar, dan prognosis untuk penyembuhan untuk hepatitis C adalah baik.

Konsentrasi tinggi sel-sel virus menunjukkan bahwa penyakit ini dalam fase akut. Darah pasien adalah sumber infeksi yang berbahaya.

Viral load, indikator yang berada pada tingkat rata-rata, mencirikan baik tahap kronis HWS, atau mungkin memiliki dua kecenderungan perkembangan: untuk meningkat atau menurun.

Setelah selesai, setelah 6 bulan, kontrol PCR dilakukan.

Biaya diagnostik PCR

Gejala-gejala berikut harus menjadi perhatian:

  • kelemahan umum;
  • perubahan warna kulit, sklera mata, debit;
  • mual;
  • nafsu makan menurun;
  • nyeri pada otot dan persendian;
  • berat di hipokondrium kanan;
  • peningkatan kadar AST dan ALT dalam darah.

Dalam kontak dengan pasien yang terinfeksi, pada periode pra operasi, hemodialisis juga direkomendasikan untuk dilakukan pemeriksaan.

Klinik pemerintah melakukan tes darah untuk PCR secara gratis jika ada rujukan dari spesialis penyakit menular atau ahli hepatologi.

Layanan berbayar untuk diagnostik PCR disediakan di semua kota besar di Rusia. Biaya tergantung pada jenis tes, peralatan yang tersedia, waktu dan faktor lainnya.

Analisis PCR berkualitas tinggi di Moskow dan St. Petersburg akan memakan biaya 600 hingga 900 rubel. Di daerah - dari 300 hingga 800 rubel.

Penentuan viral load HCV akan dikenakan biaya 17.000-22.000 rubel. Untuk jenis infeksi lain harga penelitian kuantitatif: 1200-10000 rubel.

Keuntungan dan kerugian dari metode PCR

Apa keuntungan dari metode reaksi berantai polimerase dibandingkan metode diagnostik lainnya?

  1. Berbagai macam aplikasi. Menggunakan PCR, menggunakan peralatan standar, Anda dapat mengidentifikasi virus apa pun.
  2. Akurasi penentuan patogen. Menggunakan berbagai kombinasi enzim dan teknik analisis, spesifikasi 100% penelitian untuk infeksi yang ditunjukkan tercapai.
  3. Sensitivitas tinggi. Metode ini memungkinkan untuk mendeteksi keberadaan satu molekul virus di dalam darah.
  4. Efisiensi. Analisis kualitatif siap dalam beberapa jam, kuantitatif - dalam dua hari.
  5. Diagnosis virus pada masa inkubasi. Selama PCR, patogen tidak ditentukan oleh adanya antibodi ketika tubuh memiliki respon imun, tetapi sebelum onset proses patologis, yang memfasilitasi pengobatan.

Kekurangan PCR adalah hasil dari kelebihannya:

  • kemurnian analisis membutuhkan tingkat kemurnian tertinggi, termasuk udara di laboratorium, sehingga DNA "asing" tidak masuk ke dalam sampel yang diteliti;
  • persyaratan tinggi untuk personel yang terlibat dalam pengumpulan dan analisis biomaterial.

Analisis PCR Hepatitis

PCR untuk hepatitis C

  1. Hepatitis C RNA ("PCR kualitatif") - deteksi dalam tes darah adalah bukti hepatitis C akut atau kronis. Hal ini ditentukan dari minggu ke-2 infeksi, muncul sebelum anti-HCV, yang memungkinkan Anda untuk mendiagnosis penyakit pada tahap awal. RNA ditentukan pada pasien dengan klinik hepatitis akut dan pada mereka dengan hasil hepatitis positif.
  2. Hepatitis C RNA ("PCR kuantitatif") - viral load adalah salah satu indikator efektivitas terapi antivirus dan penilaiannya (oleh perubahan tingkat dari nilai awal). Karakterisasi kuantitatif dari konten RNA hepatitis C penting untuk menilai efektivitas terapi antiviral dan memiliki signifikansi prognostik untuk menentukan kronisitas. Pasien dengan viral load yang tinggi (jumlah RNA tinggi) sebelum pengobatan berespon kurang baik terhadap pengobatan.
  3. Hepatitis C RNA (genotipe 1, 2, 3) - jenis taktik pengobatan dan keefektifannya tergantung pada jenisnya. Penyakit yang disebabkan oleh virus genotipe 1 adalah yang paling tidak baik dalam kaitannya dengan prediksi efektivitas terapi. Menurut rekomendasi saat ini, tes darah bagi kita untuk genotipe hepatitis C harus dilakukan pada pasien sebelum dimulainya terapi antiviral.
  4. Hepatitis C RNA (diperpanjang genotyping 1a, 1b, 2, 3a, 4, 5, 6) - 1a, 1b, 2a, 2c, 2k, 3a subtipe beredar di Rusia. Hepatitis C, yang disebabkan oleh genotipe 1 dan 4 virus, adalah yang paling tidak baik untuk prognosis.
  5. Ultrasensitif Hepatitis C PCR (metode kualitatif) - analisis ini digunakan untuk mendiagnosis penyakit pada tahap awal infeksi, optimal untuk menguji darah donor dan mengevaluasi respon terhadap pengobatan antivirus. Penelitian ini, bahkan tanpa deteksi antibodi terhadap virus hepatitis C, direkomendasikan untuk pasien dengan penyakit hati penyebab yang tidak spesifik, imunodefisiensi didapat, atau menerima terapi imunosupresif.
  6. Ultra-sensitive Hepatitis C PCR (metode kuantitatif) adalah tes sensitivitas tinggi yang unik (10 IU / ml) untuk menentukan RNA virus hepatitis C secara kuantitatif. Penelitian ini digunakan untuk memantau efektivitas terapi.

PCR untuk hepatitis B

  1. DNA Hepatitis B (analisis kualitatif) adalah indikator penggandaan virus hepatitis B. Ini muncul pertama kali dalam darah, rata-rata, 1 bulan setelah infeksi. Dalam beberapa kasus, adalah satu-satunya penanda infeksi HBV laten. Menentukan DNA virus memungkinkan seseorang untuk mendiagnosis hepatitis B yang disebabkan oleh strain mutan, yang tidak mengungkapkan penanda infeksi lainnya.
  2. Hepatitis B DNA (analisis kuantitatif) - Konsentrasi DNA (viral load) adalah salah satu tes untuk menentukan stadium hepatitis B kronis dan kriteria efektivitas terapi antivirus. Analisis dilakukan sebelum dan selama proses pengobatan.
  3. Genotyping hepatitis B - penyakit yang disebabkan oleh genotipe yang berbeda dari virus mungkin berbeda dalam hal klinis dan hasil. Hepatitis B, yang disebabkan oleh genotipe C virus, lebih mungkin untuk mengambil kursus kronis dan memiliki risiko tinggi transformasi menjadi sirosis hati atau karsinoma hepatoseluler. Pasien yang terinfeksi dengan genotipe A merespon lebih baik terhadap pengobatan.
  4. PCR DNA ultrasensitif untuk hepatitis B (metode kualitatif) - mereka diserahkan untuk deteksi dini penyakit ini. Sangat informatif dalam studi donor darah. Ini dapat digunakan untuk mengkonfirmasi penghapusan virus secara spontan atau diinduksi oleh pengobatan dari tubuh manusia.
  5. PCR yang sangat sensitif untuk hepatitis C (metode kuantitatif) - diagnosis DNA virus hepatitis B secara kuantitatif. Analisis dilakukan untuk menilai efektivitas terapi.
  6. Penentuan mutasi resistansi terhadap obat antiviral lamivudine, telbivudine, entecavir, adefovir, tenofovir (diserahkan bersama dengan analisis "DNA hepatitis B kuantitatif"). Penting untuk menyerahkan analisis kepada pasien dengan hepatitis B kronis sebelum memulai terapi antiviral dan saat mengambil obat. Hasilnya berisi informasi tentang keberadaan resistensi virus hepatitis B terhadap obat antiviral:
    • R - virus resisten terhadap obat antiviral (mutasi resistansi terhadap obat ini ditemukan);
    • S - virus hepatitis B sensitif terhadap obat (nilai normal, mutasi resistan tidak terdeteksi);
    • I - agen penyebab infeksi dapat mengembangkan resistansi terhadap obat ini.

Penggunaan diagnostik PCR

Polymerase chain reaction (PCR) dalam biologi molekuler adalah metode eksperimental untuk mendeteksi virus. Hal ini memungkinkan Anda untuk secara signifikan meningkatkan konsentrasi fragmen asam nukleat tertentu (DNA) dalam sampel bahan biologis, yang memungkinkan untuk menentukannya (mengenali) dan menghitung.

Analisis dilakukan sebagai berikut. Materi genetik (sampel darah), yang berpotensi mencakup gen yang diinginkan, dimasukkan ke dalam tabung. Ada juga primer yang ditempatkan - segmen yang disintesis secara kimiawi dengan panjang kecil gen yang diinginkan.

DNA atau RNA polimerase juga ditambahkan ke bejana, ia mampu membentuk rantai asam nukleat yang benar-benar identik dengan yang asli. Komposisi yang dihasilkan disuntikkan dan satu set dari empat nukleotida bebas - bahan bangunan khusus untuk RNA atau DNA, salah satunya mengandung partikel fosfor radioaktif.

Campuran yang dihasilkan dipanaskan hingga 95-96 ° C, itulah sebabnya mengapa dua heliks DNA, yang biasanya terjalin, ditenun. Kemudian obat didinginkan, di mana primer itu sendiri menempel pada wilayah yang diinginkan dari genom virus, mencegah RNA (atau DNA) membentuk heliks ganda lagi.

Dalam proses pendinginan, polimerase mencari rantai nukleotida bebas. Untuk berfungsinya enzim ini diperlukan satu rantai nukleotida. Karena polimerase tergelincir di sepanjang rantai DNA (seperti cincin pada tali), ia tidak dapat bekerja pada heliks ganda.

Setelah ini, siklus pemanasan berulang dilakukan, karena rantai nukleotida yang dipisahkan. Pada masing-masing siklus PCR ini, jumlah sampel gen hepatitis yang diinginkan meningkat secara eksponensial, dan sisa materi genetik dihasilkan (tumbuh) secara linier.

Setelah pemurnian larutan dari residu nukleotida dan pemisahan dengan elektroforesis rantai DNA dengan parameter berat molekul, seseorang dapat dengan mudah menentukan apakah ada gen yang diinginkan dalam sampel yang diteliti atau tidak.

Manfaat PCR

Pengujian laboratorium menggunakan PCR memungkinkan lebih banyak informasi yang bisa diperoleh daripada kehadiran RNA virus. Dengan menentukan parameter tingkat radiasi radioaktif, adalah mungkin untuk mengidentifikasi berapa banyak materi genetik yang awalnya terkandung dalam sampel yang diteliti. Dalam kasus hepatitis, tentukan indikator tingkat viral load.

Keuntungan lain dari metode ini adalah tingkat sensitivitas reaksi CR yang sangat tinggi. Ini jauh lebih tinggi daripada metode klasik mendeteksi virus. Idealnya, untuk mengidentifikasi gen yang diinginkan, untuk PCR, hanya satu virus dalam sampel yang cukup.

Selain itu, PCR benar-benar spesifik. Primer-nya dirancang sedemikian rupa sehingga sepenuhnya sesuai dengan wilayah unik dari gen yang diinginkan yang tidak dimiliki urutan lain. Seperti sidik jari yang unik, ada urutan nukleotida unik di setiap gen.

Analisis kualitatif PCR

Analisis kualitatif memungkinkan Anda mengidentifikasi hanya keberadaan virus dalam darah. Tes ini harus dilakukan untuk semua pasien yang antibodi terhadap hepatitis C ditemukan dalam darah, hanya dapat menghasilkan satu dari dua nilai: "terdeteksi" atau "tidak terdeteksi." Pada orang yang sehat, norma (nilai referensi) harus "tidak terdeteksi".

Ada interpretasi khusus dari hasil riset kualitatif semacam itu:

  • Hasilnya adalah "terdeteksi." Ini berarti bahwa fragmen RNA yang spesifik untuk virus hepatitis C ditemukan dalam sampel yang dianalisis dari bahan biologis yang diambil. Akibatnya, ada fakta bahwa pasien terinfeksi dengan virus hepatitis C. Jika hasil PCR berkualitas tinggi "terdeteksi", ini menunjukkan bahwa virus mengalikan dan saat ini menginfeksi sel-sel hati baru di tubuh.
  • Hasilnya adalah "tidak terdeteksi." Seperti putusan menunjukkan bahwa dalam sampel yang dianalisis dari bahan biologis yang diperoleh di laboratorium ini, tidak ada fragmen RNA yang ditemukan yang spesifik untuk virus hepatitis C. Sebagai alternatif, konsentrasi RNA infeksi patogen dalam sampel ini berada di bawah batas sensitivitas tes.

Pada fase akut RNA virus hepatitis C, penelitian kualitatif dengan metode PCR dapat dideteksi setelah 1-2 minggu segera setelah infeksi tubuh, yaitu jauh sebelum munculnya antibodi terhadap hepatitis itu sendiri.

Hasil tes yang tidak akurat dari penelitian ini dapat diperoleh dengan:

  • biomaterial yang terkontaminasi;
  • kehadiran heparin dalam darah pasien;
  • kehadiran dalam sampel zat kimia atau protein (inhibitor) yang mempengaruhi berbagai komponen PCR.

Untuk melakukan analisis kualitatif PCR, tidak diperlukan persiapan khusus dari pasien untuk penelitian. Darah vena digunakan sebagai bahan.

Evaluasi hasil

Tes PCR berkualitas tinggi memiliki tingkat kepekaan tertentu, dan tergantung pada keakuratan penelitian dan tingkat peralatan di laboratorium dapat bervariasi dari 10 hingga 500 IU / ml.

Ini berarti bahwa jika virus dalam sampel darah hadir dalam konsentrasi yang sangat rendah (kurang dari nilai ambang sensitivitas dari laboratorium ini), maka hasilnya dapat ditentukan sebagai "tidak terdeteksi" pada pasien pasien. Karena itu, ketika melakukan analisis kualitatif PCR dengan tingkat viremia rendah (konsentrasi virus rendah), misalnya, untuk pasien yang menjalani terapi antivirus, sangat penting untuk mengetahui ambang sensitivitas sistem diagnostik ini.

Varian sistem diagnostik

Untuk mengontrol tanggapan virologi, disarankan untuk menggunakan sistem diagnostik dengan ambang batas sensitivitas paling sedikit 50 IU / ml untuk pengobatan antiviral. Kriteria ini dipenuhi, misalnya, dengan alat tes Cobas Ampicolor HCV-Test (akurat hingga 50 IU / ml), serta RNA HCV RealBest (dengan sensitivitas 15 IU / ml).

Menurut rekomendasi WHO, untuk menetapkan diagnosis definitif hepatitis C, penting untuk hanya berdasarkan tiga kali deteksi RNA virus C dalam sampel serum pasien, dengan tidak adanya varietas penanda hepatitis lainnya.

Selain metode PCR, tes TMA (metode amplifikasi transkripsi) juga digunakan untuk mendeteksi RNA HCV pada pasien. Ini memiliki ambang batas sensitivitas terbaik (5-10 IU / ml), tetapi di negara kita metode pengujian seperti ini belum umum.

Rentang modifikasi virus yang terdeteksi

Penentuan kualitatif seperti dalam serum kehadiran RNA dari virus hepatitis C memungkinkan untuk menentukan beberapa genotipe dari virus ini. Saat ini, sains mengetahui lebih dari enam genotipe virus ini, serta sekitar 10 subtipe penyakit ini.

Di negara kita, virus umum 1, 2, 3 genotipe. Laboratorium dapat mendeteksi genotipe berikut: 1a dan 1b, 2a, 2b dan 2c, serta 3, 4, 5a dan 6, terlepas dari subtipe. Untuk semua modifikasi virus, spesifisitas deteksi adalah 100%.

Analisis Kuantitatif PCR

Dengan bantuan tes PCR kuantitatif, tingkat konsentrasi virus hepatitis dalam sampel darah (viral load) ditentukan. Tes ini untuk viremia (konsentrasi virus) memungkinkan Anda untuk menentukan jumlah unit bahan genetik tertentu (RNA virus paling banyak), yang terdeteksi dalam jumlah tertentu. Dalam hal ini, tentukan konsentrasinya dalam 1 ml, yang sesuai dengan 1 cu. lihat

Parameter kuantitatif analisis dinyatakan dalam angka, untuk tujuan ini satuan internasional (IU) per mililiter (ml), disebut sebagai IU / ml, digunakan sebagai unit pengukuran. Sekarang di beberapa laboratorium, jumlah virus dapat ditentukan dalam unit lain: jumlah salinan per ml ditunjukkan sebagai salinan / ml.

  • Kurma Untuk hepatitis C, analisis kuantitatif PCR dilakukan segera sebelum dimulainya terapi. Kemudian pada tanggal 1, 4, 12 dan 24 minggu. Evaluasi pada minggu ke 12 adalah indikasi, ini memungkinkan untuk menentukan efektivitas terapi.
  • Persiapan untuk analisis. Untuk melakukan analisis kuantitatif PCR, tidak diperlukan persiapan khusus dari pasien untuk penelitian. Setengah jam sebelum pengambilan sampel tidak boleh merokok. Darah vena digunakan sebagai bahan laboratorium.

Evaluasi hasil

Untuk sistem uji laboratorium yang berbeda, ada faktor konversi yang berbeda untuk indikator ini dalam IU / ml. Rata-rata, mereka mengambil parameter konversi, di mana 4 salinan / ml = 1 IU / ml. Artinya, misalnya, jika laboratorium memberikan hasil analisis PCR 2.4 * 10 6 salinan / ml, maka parameter ini harus dibagi menjadi 4 dan kita akan mendapatkan 6 * 10 5 IU / ml.

Beban 800.000 IU / ml dianggap tinggi, yang kira-kira setara dengan 3.000.000 eksemplar / ml. Viremia rendah, menurut beberapa penulis, sesuai dengan parameter PCR kuantitatif di bawah 400.000 IU / ml.

Sebagai hasil dari tes kuantitatif, hasil akhir dapat dikirimkan tidak dalam bentuk nilai digital, tetapi: "di bawah rentang pengukuran", atau "tidak terdeteksi".

  • Penilaian: "di bawah rentang pengukuran." Ini menunjukkan bahwa tes kuantitatif tidak dapat mendeteksi RNA virus hepatitis C, tetapi virus itu sendiri ada di dalam tubuh dalam konsentrasi yang sangat rendah. Ini dibuktikan dengan tes kualitatif tambahan, mengkonfirmasi fakta keberadaan virus.
  • Rating: tidak terdeteksi. Hasil ini menunjukkan bahwa tes kuantitatif tidak ditemukan dalam sampel RNA virus.

Parameter viral load, pertama-tama, menentukan tingkat penularan penyakit, tingkat "infeksi" pasien. Semakin tinggi konsentrasi virus pasien, semakin besar kemungkinan diteruskan ke orang lain. Misalnya, saat berhubungan seksual dengan orang yang sakit, atau secara vertikal. Indikator kuantitatif ini juga membantu menentukan efektivitas perawatan pasien.

Melakukan analisis kuantitatif CCP penting untuk terapi antiviral, menilai keberhasilannya dan merencanakan durasi pelatihan. Dengan demikian, dengan respons tubuh yang cepat terhadap pengobatan dan tingkat viremia yang rendah, durasi terapi dapat dipersingkat.

Jika parameter PCR kuantitatif secara perlahan dikurangi, terapi antiviral harus diperpanjang atau dimodifikasi. Jika tingkat viral load rendah, maka ini adalah faktor yang menguntungkan untuk terapi, tetapi jika meningkat, maka metode pengobatan yang digunakan tidak efektif dan obat atau metode penggunaannya harus diubah.

Penelitian PCR untuk hepatitis C: jenis, indikasi, transkrip

Viral hepatitis C adalah penyakit serius yang terjadi dengan kerusakan pada hati. Dalam delapan puluh persen pasien, itu menjadi kronis. Virus berkembang biak di sel-sel hati - hepatosit - dan menyebabkan kematian mereka. Jaringan mati digantikan oleh fokus jaringan ikat, fibrosis berkembang.

Ketika fibrosis berkembang, hati tidak dapat melakukan fungsinya, sirosis hati dimulai, yang berbahaya karena komplikasinya: peningkatan tekanan dalam sistem vena portal, perdarahan gastrointestinal, gangguan pembekuan darah, perubahan mental karena kerusakan pada nuklei otak.

Penyebab penyakit ini adalah infeksi oleh virus dari keluarga Flaviviridae, yang termasuk jenis virus RNA. Ini berarti bahwa bahan genetik dimana protein dari patogen disintesis dikodekan dalam molekul asam ribonukleat. Infeksi terjadi melalui darah, seksual, dan dari wanita hamil ke janin. Sayangnya, waktu yang cukup lama dapat terjadi antara infeksi dan dimulainya produksi antibodi - dari dua minggu hingga enam bulan. Ini tidak memungkinkan untuk menentukan infeksi dengan metode immunoassay dan memulai perawatan pada tahap awal.

Apa itu analisis PCR?

PCR adalah metode analisis molekuler, yang memungkinkan untuk mendeteksi bahan genetik dari patogen yang sudah ada dalam minggu pertama setelah infeksi menggunakan reaksi berantai polymerase. Studi ini memiliki spesifisitas yang tinggi, akurasi, dan memungkinkan tidak hanya untuk menentukan ada tidaknya virus, tetapi juga konsentrasi dan genotipe.

Untuk penelitian, darah pasien diambil di mana RNA virus berpotensi berada. Primer ditambahkan ke darah - daerah buatan yang disintesis dari gen yang diinginkan dengan panjang kecil, dan RNA polimerase adalah enzim khusus yang berulang kali meningkatkan jumlah materi genetik patogen. Dengan menggunakan peralatan khusus, beberapa siklus pemanasan dan pendinginan dilakukan. Kemudian bahan dianalisis dan dibandingkan dengan gen virus yang diketahui, atas dasar kesimpulan yang dibuat tentang ada atau tidak adanya infeksi.

Jenis analisis PCR untuk hepatitis C

Ada tiga jenis analisis PCR:

  1. Analisis kualitatif PCR. Tahap pertama penelitian. Ini memungkinkan Anda mengidentifikasi bahan genetik virus di dalam darah.

  • Analisis kuantitatif PCR. Memungkinkan Anda untuk menentukan viral load - konsentrasi bahan genetik patogen dalam satu mililiter darah. Penelitian ini dilakukan sebelum dimulainya terapi, dan kemudian pada sesi pertama, keempat, kedua belas, dan (jika perawatannya panjang) dua puluh empat minggu untuk mengevaluasi keefektifannya.

  • Genotyping Agen penyebab hepatitis C sering dan cepat bermutasi. Ada tujuh varian genotipe virus yang ditemukan di planet ini. Di Rusia, jenis pertama, kedua dan ketiga adalah umum. Masing-masing genotipe memiliki ketahanan yang berbeda terhadap terapi, misalnya, efektivitas pengobatan jenis pertama adalah enam puluh persen, dan untuk yang kedua dan ketiga angka ini mencapai delapan puluh lima. Oleh karena itu, untuk memilih obat yang tepat dan meresepkan pengobatan jangka waktu yang cukup, perlu ditentukan dengan tepat jenis virus apa yang terinfeksi oleh pasien.
  • Indikasi untuk analisis PCR untuk hepatitis C

    Studi PCR diresepkan dalam kasus-kasus berikut:

    • kontak dengan orang yang sakit di mana infeksi bisa terjadi;
    • immunoassay enzim positif;
    • tanda-tanda sirosis: perubahan ukuran hati, pembesaran limpa, penampilan di perut pleksus vena subkutan;
    • munculnya gejala kerusakan hati: nyeri di perut kanan, menguningnya kulit;
    • peningkatan aktivitas ALT dan AST dalam analisis biokimia darah;
    • sebelum memulai pengobatan untuk menentukan viral load;
    • untuk memantau efektivitas terapi antiviral;
    • setelah perawatan untuk mengendalikan kekambuhan;
    • di hadapan didiagnosis hepatitis B, untuk mengecualikan kerusakan hati campuran.

    Penjelasan studi PCR tentang hepatitis C

    Decoding analisis PCR dan immunoassay enzim untuk hepatitis C harus dilakukan oleh spesialis penyakit hepatologi atau infeksi. Menganalisis hasil PCR diperlukan dalam kombinasi dengan data analisis biokimia darah, biopsi dan ultrasound. Hanya dokter yang memenuhi syarat yang akan dapat menganalisis hasil penelitian dan, berdasarkan mereka, meresepkan perawatan yang benar.

    Decoding analisis kualitatif.

    Dalam bahan biologis yang dianalisis ditemukan bahan genetik dari patogen. Infeksi dikonfirmasi.

    Infeksi tidak ada, atau jumlah RNA patogen di bawah batas sensitivitas.

    Decoding analisis kuantitatif.

    Tingkat normal untuk orang sehat. Ini berarti bahwa tidak ada RNA hepatitis C dalam materi yang diteliti, atau konsentrasinya di bawah ambang sensitivitas penelitian.

    Konsentrasi RNA berada di bawah kisaran kuantifikasi. Hasil ini diinterpretasikan dengan sangat hati-hati, menghubungkan mereka dengan data dari penelitian lain, sering kali dipelajari kembali.

    Tingkat viral load pada konsentrasi yang diberikan dianggap rendah. Biasanya, penurunan jumlah virus berarti bahwa terapi tersebut berhasil.

    Lebih dari 8 * 10 ^ 5 IU / ml

    Tingkat viral load pada konsentrasi yang diberikan dianggap tinggi.

    Lebih dari 2,4 * 10 ^ 7 IU / ml

    Jumlah RNA di atas batas atas rentang kuantifikasi. Tidak mungkin untuk menarik kesimpulan tentang tingkat viral load dengan hasil ini. Biasanya dalam kasus seperti itu, tes diulang dengan pengenceran sampel darah.

    Decoding genotyping.

    Terdeteksi RNA dari genotipe tertentu

    Virus Hepatitis C dari genotipe dan subtipe tertentu terdeteksi dalam biomaterial. Hasilnya dikodekan dalam angka Romawi dan huruf Latin, misalnya - 1a, 2b. Secara total ada tujuh genotipe dan enam puluh tujuh subtipe, namun, di Rusia hanya ada tiga jenis pertama.

    Hepatitis C virus RNA terdeteksi

    RNA ditemukan dalam darah genotipe langka untuk Rusia, yang tidak dapat dikaitkan dengan tipe pertama, kedua, atau ketiga. Lebih banyak penelitian diperlukan.

    Hasil ini menunjukkan bahwa pasien sehat, atau bahwa jumlah RNA patogen terlalu kecil.

    Ada kemungkinan bahwa analisis PCR untuk hepatitis C negatif, dan assay immunosorbent terkait enzim mengenali antibodi terhadap virus. Ini berarti bahwa pasien menderita hepatitis C akut dan sembuh sendiri. Sekitar dua puluh kasus infeksi menghasilkan pemulihan spontan jika tubuh pasien memiliki ketahanan yang cukup terhadap infeksi.

    Meskipun PCR adalah tes yang sangat akurat, hasilnya mungkin terdistorsi dalam situasi berikut:

    • darah diangkut ke laboratorium dalam kondisi yang tidak sesuai, suhu dilanggar;
    • sampel biomaterial terkontaminasi;
    • ada jejak sisa heparin dan antikoagulan lainnya di dalam darah;
    • Peneliti ditemukan sebagai inhibitor - zat yang memperlambat atau menghentikan reaksi berantai polymerase.

    Keunggulan PCR dibanding metode lainnya

    1. Diagnosa pada tahap awal. PCR mendeteksi materi genetik dari agen penyebab. Dengan menggunakan analisis imunofluoresensi, hanya imunoglobulin yang dapat ditentukan - zat yang diproduksi tubuh sebagai respons terhadap infeksi. Dalam kasus infeksi hepatitis C, interval antara infeksi dan permulaan respon imun mungkin beberapa minggu dan bulan, saat ini ELISA tidak akan efektif. PCR akan memberikan jawaban pada minggu pertama setelah infeksi.

  • Probabilitas kesalahan rendah. Dalam materi yang diteliti menentukan luas materi genetik, yang merupakan karakteristik dari hanya satu jenis patogen. Ini menghilangkan hasil yang salah. Ketika kesalahan ELISA dimungkinkan, karena jenis antibodi yang sama dapat dilepaskan terhadap virus yang berbeda - antibodi tersebut disebut antibodi silang.

  • Sensitivitas tinggi. PCR memungkinkan untuk mendeteksi RNA agen penyebab bahkan dalam jumlah minimal. Ini memungkinkan untuk mengidentifikasi infeksi yang tersembunyi.
  • Cara mempersiapkan donor darah untuk studi PCR

    Untuk analisis PCR hepatitis C, darah vena dikumpulkan. Biasanya, dua bagian darah diambil dari pembuluh darah pasien pada saat yang sama: yang pertama dikirim untuk PCR dan yang kedua oleh ELISA. Hal ini dilakukan untuk lebih akurat menilai berapa banyak pasien terinfeksi virus, dan bagaimana kekebalan melawannya.

    Biasanya pasien harus mematuhi aturan berikut:

    • tes darah diambil di pagi hari;
    • Interval antara makanan terakhir dan donor darah harus delapan hingga sepuluh jam;
    • dua atau tiga hari sebelum analisis, perlu untuk meninggalkan makanan yang digoreng dan berlemak, dan alkohol;
    • selama dua puluh empat jam sebelum analisis, pasien harus menghindari aktivitas fisik: jangan membawa beban, jangan pergi ke gym atau kolam renang.

    Biaya tes darah dan PCR untuk hepatitis C

    Hepatitis C adalah patologi inflamasi di mana sel-sel hati terpengaruh. Penyakit berkembang sebagai hasil dari penetrasi virus hepatitis C (HVC) ke dalam tubuh manusia.

    Bentuk penyakitnya bisa akut atau kronis.

    Paling sering, gejala bentuk akut patologi pada kebanyakan pasien tidak ada, kadang-kadang penyakit disertai dengan sensasi nyeri di perut, penurunan kinerja, peningkatan kelelahan, kehilangan nafsu makan, warna gelap urin, perubahan warna tinja, kekuningan pada kulit dan selaput lendir, nyeri sendi. Gejala seperti itu biasanya terjadi 6-8 minggu setelah infeksi, tetapi bisa muncul setelah enam bulan.

    Dengan berkembangnya fenomena semacam itu, perlu menghubungi institusi medis dan menjalani pemeriksaan menyeluruh terhadap keseluruhan organisme. Sebagai bagian dari pemeriksaan medis, tes darah untuk hepatitis C dilakukan.

    Hari ini, dengan bantuan teknik diagnostik modern, patologi ini dapat diidentifikasi pada tahap awal perkembangan, yang sangat meningkatkan kemungkinan penyembuhan lengkap penyakit.

    Kelompok orang berikut diminta untuk menguji hepatitis C:

    • wanita dalam periode menggendong anak;
    • orang dengan tanda-tanda hepatitis;
    • staf medis;
    • organ potensial dan donor darah;
    • pecandu narkoba, orang yang terinfeksi HIV, kehidupan intim promiscuous.

    Daftar studi yang diperlukan

    Tes apa yang harus saya ambil untuk hepatitis C? Untuk secara akurat mendiagnosis penyakit, mengidentifikasi penyebabnya dan menentukan keadaan parenkim hati, diperlukan penelitian berikut:

    • urin umum dan tes darah;
    • analisis biokimia darah;
    • Analisis PCR;
    • tes darah untuk mendeteksi antibodi terhadap HVC;
    • tes darah untuk antibodi yang ada ke sel-sel hatinya sendiri;
    • biopsi hati.

    Tes darah decoding untuk hepatitis C dilakukan oleh seorang spesialis. Pertimbangkan setiap metode penelitian secara lebih rinci, serta kita akan memahami analisis hepatitis C mana yang paling akurat.

    Analisis umum

    Saat melakukan tes darah umum untuk hepatitis C, Anda dapat mengevaluasi kondisi pasien. Perubahan parameter darah tidak dianggap sebagai gejala spesifik hepatitis, namun, dengan penyakit ini, ada gangguan seperti:

    • mengurangi konsentrasi hemoglobin, trombosit dan leukosit;
    • meningkatkan isi limfosit;
    • pembekuan darah dilanggar;
    • laju endap darah (LED) meningkat.

    Analisis umum urin memungkinkan untuk mendeteksi dalam komposisi urobelin - pigmen empedu yang terjadi di urin sebagai akibat gangguan fungsi hati.

    Analisis biokimia

    Analisis biokimia darah dalam hepatitis C memungkinkan untuk mengidentifikasi gangguan seperti:

    • peningkatan kadar enzim hati (alanin transaminase - ALT dan aspartat aminotransferase - AST), yang memasuki darah ketika hepatosit rusak. Dalam keadaan normal, indikator ini untuk pria tidak boleh lebih dari 37 IU / l, untuk wanita - tidak lebih tinggi dari 31 IU // l. Peningkatan konsentrasi ALT dan AST pada hepatitis C asimptomatik sering merupakan satu-satunya gejala penyakit ini. Selain itu, darah glutamyl transpeptidase alkaline phosphatase meningkat (biasanya tidak lebih tinggi dari 150 IU / l).
    • kandungan bilirubin (baik umum maupun langsung) dalam darah terlampaui. Jika tingkat pigmen kuning dalam serum melebihi 27-34 μmol / l, terjadi ikterus (hingga 80 µmol / l dalam bentuk ringan, 86-169 µmol / l - dalam tingkat sedang, di atas 170 µmol / l - dalam bentuk parah).
    • Tingkat albumin diturunkan, konsentrasi gamma globulin, sebaliknya, meningkat. Gamma globulin terdiri dari imunoglobulin - antibodi yang melindungi tubuh terhadap zat-zat penyebab penyakit.
    • peningkatan konsentrasi trigliserida dalam darah.

    Tes PCR

    Dengan menggunakan teknik PCR, adalah mungkin untuk mendiagnosa agen penyebab penyakit. Melakukan analisis ini memungkinkan untuk mendeteksi virus dalam darah, meskipun jumlahnya sedikit. Analisis PCR untuk hepatitis C memungkinkan untuk menentukan infeksi yang ada di dalam darah setelah 5 hari sejak saat infeksi, yaitu, jauh sebelum antibodi muncul.

    Jika hasil tes darah untuk hepatitis C oleh PCR positif, ini menunjukkan adanya infeksi aktif dalam tubuh. Dengan menggunakan metode ini, Anda dapat melakukan studi kualitatif dan kuantitatif RNA HVC.

    Dalam proses analisis kualitatif PCR untuk hepatitis C, adalah mungkin untuk mendeteksi virus yang ada di tubuh manusia.

    Prosedur diagnostik ini dilakukan jika anti-HVC terdeteksi dalam darah.

    Menguraikan analisis untuk hepatitis C berisi informasi bahwa infeksi telah terdeteksi atau tidak terdeteksi di dalam tubuh. Biasanya, tidak ada substansi patologis yang ditemukan di dalam darah.

    Jika tes hepatitis C positif, itu berarti bahwa patogen terus membelah dan menginfeksi sel-sel hati.

    Hasil analisis ini mungkin tidak dapat diandalkan, mungkin dalam kasus-kasus berikut:

    • biomaterial yang terkontaminasi digunakan;
    • di hadapan heparin dalam darah;
    • di hadapan zat kimia atau protein (inhibitor) dalam mempelajari biomaterial, mempengaruhi unsur-unsur PCR.

    Analisis kuantitatif hepatitis C memberikan informasi tentang jumlah virus yang terkandung dalam darah, yaitu, menentukan viral load. Dengan konsep ini berarti volume HVC RNA hadir dalam darah (misalnya, dalam 1 ml). Dalam interpretasi analisis kuantitatif untuk hepatitis C, nilai ini dinyatakan dalam ekuivalen digital, diukur dalam IU / ml.

    Darah untuk PCR untuk hepatitis C diambil sebelum tindakan terapeutik. Setelah analisis dilakukan pada 1, 4, 12 dan 24 minggu. Penelitian pada minggu ke 12 adalah indikatif dan dilakukan untuk menilai efektivitas prosedur medis.

    Jika tes untuk hepatitis C selama kehamilan positif dan jumlah viral load terlampaui, risiko penularan patogen dari ibu yang sakit ke anak meningkat beberapa kali. Juga, dengan peningkatan viral load yang tinggi, pelaksanaan tindakan terapeutik sulit dilakukan.

    Menurut transkrip tes untuk hepatitis C, jika nilai viral load melebihi 800.000 IU / ml, maka itu tinggi. Jika angkanya di bawah 400.000 IU / ml, tingkat viral load dianggap rendah.

    Analisis hepatitis C oleh PCR dianggap yang paling akurat dan memiliki beberapa keunggulan dibandingkan pilihan penelitian lain, yaitu:

    • diagnosis langsung dari agen penyebab penyakit. Ketika melakukan penelitian tradisional ditentukan oleh adanya penanda protein yang merupakan produk limbah patogen. Ini hanya menunjukkan bahwa infeksi ada dalam darah. Ketika menguji untuk hepatitis C oleh PCR, adalah mungkin untuk menentukan jenis patogen patologi berbahaya.
    • spesifisitas teknik. Selama prosedur ini, wilayah DNA yang unik ditentukan dalam biomaterial yang berhubungan dengan hanya satu jenis patogen. Ini meminimalkan kemungkinan hasil yang salah.
    • sensitivitas tinggi. Saat melakukan analisis PCR, Anda dapat mendeteksi jumlah minimum virus. Ini penting jika zat patogen kondisional diidentifikasi yang menimbulkan ancaman hanya jika tingkatnya meningkat.
    • Ketika menggunakan teknik ini dalam satu sampel biomaterial, beberapa patogen dapat dideteksi sekaligus.
    • dapat mendeteksi infeksi yang tersembunyi. Selain itu, analisis memungkinkan Anda untuk mendiagnosis mikroorganisme patogen yang hidup di dalam sel dan memiliki variabilitas antigenik yang tinggi.

    Jika hasil tes positif, maka jejak virus ditemukan dalam biomaterial, maka jaringan tersebut memiliki infeksi di dalam tubuh.

    Analisis PCR negatif untuk hepatitis C berarti bahwa tidak ada jejak infeksi di biomaterial.

    Penelitian imunologi

    Metode ini memungkinkan Anda untuk mengidentifikasi antibodi untuk semua jenis virus hepatitis, serta antibodi terhadap sel-sel hati dari tubuh Anda sendiri, penampilan yang berkontribusi pada pengembangan hepatitis autoimun.

    Hasil yang diperoleh selama penelitian ini relevan selama 3 bulan, maka Anda harus menyumbangkan kembali darah untuk hepatitis C.

    Juga dimungkinkan untuk melakukan penelitian tersurat menggunakan strip tes khusus. Analisis ini memungkinkan untuk menentukan antibodi terhadap virus C dalam komposisi darah dan air liur.Prosedur ini dapat dilakukan secara mandiri, di rumah.

    Biopsi hati

    Untuk melakukan analisis seperti itu, elemen dari parenkim hati diambil dan pemeriksaan histologis dari biomaterial yang diperoleh dilakukan. Ini memungkinkan Anda untuk menilai kondisi tubuh: untuk mengidentifikasi inflamasi, fokus nekrotik, tahap fibrosis dan sebagainya.

    Hari ini, tes yang menggantikan analisis histologis parenkim hepatik digunakan.

    Untuk menilai tahap kerusakan hati dan intensitas proses inflamasi, digunakan biomarker darah vena spesifik. Menggunakan FibroTest, Anda dapat menilai tingkat pertumbuhan jaringan fibrosa.

    Saat melakukan Actitest Anda bisa mendapatkan informasi tentang intensitas proses patologis di parenkim hati. Menggunakan Steatototesta dapat mendiagnosis jaringan lemak hati dan menilai sejauh mana proses ini. Fibromax terdiri dari semua tes di atas dan mungkin termasuk beberapa penelitian lain.

    Persiapan untuk belajar

    Tes apa yang diambil untuk hepatitis C dan bagaimana kami menemukan jenis penelitian ini atau itu. Sama pentingnya untuk mengetahui bagaimana mempersiapkan analisis.

    Untuk mendapatkan hasil yang dapat diandalkan, disarankan untuk mematuhi persyaratan berikut:

    • Tes hepatitis C harus dilakukan di pagi hari, saat perut kosong. Terakhir kali makanan harus dikonsumsi setidaknya 8 jam sebelum penelitian.
    • Biomaterial dapat dikumpulkan di siang hari atau di malam hari. Dalam hal ini, penting bahwa setidaknya 5-6 jam melewati antara makanan terakhir dan analisis.
    • sebelum menyumbangkan darah untuk hepatitis C, teh, kopi, jus atau minuman lain harus dibuang, hanya air yang diizinkan.
    • 48 jam sebelum studi, perlu untuk mengecualikan penggunaan makanan berlemak, makanan yang digoreng dan minuman yang mengandung alkohol.
    • setidaknya satu jam sebelum analisis, Anda harus menahan diri dari merokok.
    • Analisis tidak boleh dilakukan segera setelah pemeriksaan ultrasonografi, instrumental, X-ray, pijat atau fisioterapi.
    • satu hari sebelum pelaksanaan penelitian, diperlukan untuk mengecualikan penggunaan obat dan aktivitas fisik intensif. Stres emosional juga kontraindikasi.
    • Disarankan untuk menghabiskan 15 menit sebelum melakukan penelitian dalam keadaan tenang.

    Melaksanakan prosedur pengumpulan darah

    Di mana bisa dites untuk hepatitis C? Pengambilan sampel biomaterial untuk penelitian lebih lanjut dilakukan di laboratorium institusi medis atau di rumah pasien.

    Darah dari pembuluh darah diambil sebagai berikut:

    • dengan bantuan tourniquet khusus melilit lengan bawah pasien, aliran darah vena dihentikan. Berkat manipulasi tersebut, pembuluh darah akan penuh dengan darah dan akan lebih terlihat, yang akan sangat memudahkan proses memasukkan jarum.
    • daerah kulit di mana jarum akan dimasukkan secara hati-hati diperlakukan dengan alkohol atau cairan yang mengandung alkohol.
    • Sebuah jarum dimasukkan dengan hati-hati ke dalam pembuluh darah, lalu tabung tes melekat padanya, yang khusus dirancang untuk mengumpulkan darah.
    • Segera setelah jarum dimasukkan ke dalam vena, harness yang menekan dikeluarkan dari lengan pasien.
    • setelah volume darah yang diperlukan untuk analisis telah dikumpulkan, jarum perlahan dikeluarkan dari vena.
    • cotton bud steril atau pad kasa yang dibasahi dengan alkohol harus dioleskan ke tempat suntikan.
    • untuk mencegah terjadinya hematoma, tampon harus ditekan dengan beberapa upaya melawan daerah penyisipan jarum, tekuk lengan di sendi siku dan tahan dalam posisi ini selama beberapa menit. Tindakan semacam itu juga akan membantu menghentikan darah lebih cepat.

    Asalkan teknik administrasi internal baik, prosedur ini benar-benar aman dan tidak menyebabkan sensasi nyeri.

    Dalam kasus yang jarang terjadi, setelah pengumpulan darah, vena bisa membengkak. Fenomena ini disebut "flebitis." Kompres (tidak panas) akan membantu memecahkan masalah, itu harus diterapkan pada daerah kulit yang bengkak beberapa kali sehari.

    Masalah-masalah tertentu juga bisa terjadi jika ada gangguan pendarahan. Mengambil aspirin, warfarin, dan pengencer darah lainnya dapat menyebabkan perdarahan. Itu sebabnya sebelum melakukan analisis itu diperlukan untuk menolak mengambil obat apa pun. Jika perawatan tidak bisa dibatalkan, Anda harus memberi tahu spesialis.

    Tanggal dan harga

    Berapa banyak yang diuji untuk hepatitis C? Hasil tes darah untuk hepatitis dapat siap dalam beberapa jam, dan dalam beberapa hari (sebagai aturan, tidak lebih dari 8 hari). Durasi persiapan hasil tergantung pada jenis virus dan metode analisis yang dipilih. Lebih cepat adalah studi yang dilakukan dengan metode PCR. Hasilnya dalam kasus ini akan siap hanya dalam beberapa jam.

    Berapa biaya tes hepatitis C? Tergantung pada klinik dan kompleksitas penelitian, harga prosedur dapat bervariasi dari 400 hingga 11.000 rubel.

    Anda harus menyadari bahwa mungkin diperlukan waktu beberapa minggu untuk membentuk jumlah antibodi yang cukup untuk HVC. Oleh karena itu, pada tahap awal dalam pengembangan patologi, hasil dari suatu penelitian mungkin salah-negatif.

    Selain itu, memperoleh data yang tidak dapat diandalkan mungkin dengan analisis berkualitas buruk dan pelanggaran kondisi transportasi dari biomaterial yang diperoleh (sampel harus dikirim ke laboratorium maksimal 2 jam setelah pengambilan sampel darah).

    Jika hasil penelitian positif, Anda harus segera menghubungi dokter penyakit menular. Dokter spesialis akan melakukan pemeriksaan tambahan dan meresepkan perawatan yang tepat.

    Bagaimana memulihkan dari hepatitis C dengan kemungkinan 97%?

    Saat ini, obat modern dari generasi baru Sofosbuvir dan Daclatasvir kemungkinan untuk menyembuhkan hepatitis C sebesar 97-100%. Anda bisa mendapatkan obat-obatan terbaru di Rusia dari perwakilan resmi raksasa farmasi India Zydus Heptiza. Obat yang dipesan akan dikirim melalui kurir dalam waktu 4 hari, pembayaran setelah diterima. Dapatkan konsultasi gratis tentang penggunaan obat-obatan modern, serta pelajari cara mengakuisisi, Anda dapat menemukannya di situs resmi pemasok Zydus di Rusia.

    Analisis kualitatif dan kuantitatif PCR untuk hepatitis C: negatif, positif, transkrip

    Hepatitis C adalah penyakit hati virus yang disebabkan oleh flavivirus HCV (dari kata bahasa Inggris hepatitis C virus), struktur yang mengandung molekul asam ribonukleat (RNA). RNA membawa kode genetik dari virus. Kehadirannya memungkinkan untuk analisis PCR untuk hepatitis C.

    Bahaya HCV bagi seseorang terletak pada fakta bahwa apa yang disebut jendela serologis (waktu antara infeksi dan munculnya reaksi dari sistem kekebalan) bisa sangat panjang - dari beberapa minggu hingga enam bulan.

    Ia tidak mendeteksi infeksi dan memulai perawatan tepat waktu.

    Tergantung pada karakteristik individu dari organisme, pembawa HCV dapat memanifestasikan dirinya dalam bentuk akut, serta terjadi sebagai penyakit kronis yang akan memerlukan perawatan yang panjang dan mahal. Ketika antibodi terhadap HCV terdeteksi, serangkaian tes laboratorium dilakukan, termasuk PCR untuk hepatitis C. Tes ini dilakukan untuk semua orang yang antibodi darahnya terhadap HCV telah ditemukan.

    Apa itu analisis PCR?

    Analisis laboratorium PCR untuk hepatitis C - studi bahan biologis untuk mendeteksi keberadaan flavavirus.

    Polymerase chain reaction (sebagai singkatan singkatan) menunjukkan nilai kuantitatif dari lesi virus tubuh, karakteristik kualitatifnya, serta genotipe virus yang mengandung RNA.

    Atas dasar mereka, serta atas dasar analisis tambahan, metode dan durasi terapi, serta faktor epidemiologi (tingkat risiko penularan ke operator lain) ditentukan.

    Apa itu Analisis RNA C RNA?

    Hepatitis C PCR juga disebut analisis RNA (HCV RNA), karena Flavavirus mengandung partikel RNA dengan ukuran virion 30-60 nm. Salah satu fitur dari mikroorganisme ini adalah kecenderungan tinggi untuk mutasi.

    Masing-masing subspesies (genotipe) dari virus memiliki ketahanan yang berbeda, yang menyebabkan metode pengobatan yang berbeda dan sifat prognosis lebih lanjut untuk pasien.

    Bahan biologi (darah vena) diberikan pada perut kosong dan, sebagai suatu peraturan, diuji dengan metode PCR Real-Time (diagnostik real-time yang sangat sensitif dengan batas deteksi yang lebih rendah 15 IU / ml menggunakan sistem otomatis tertutup).

    Ada tes lain, misalnya COBAS AMPLICOR dengan sensitivitas 50-100 IU / ml. Untuk setiap uji laboratorium, ambang sensitivitas penting, yaitu kemampuan reagen untuk mendeteksi konsentrasi minimum virus dalam bahan biologis.

    Jenis analisis untuk hepatitis C oleh PCR

    Hepatitis C PCR mencakup tiga komponen penting:

    • analisis kualitatif;
    • analisis kuantitatif;
    • genotyping.

    Tes-tes ini memungkinkan Anda untuk menentukan sifat viremia, serta ciri-ciri genetik dari patogen. Tergantung pada sensitivitas sistem diagnostik, penelitian dilakukan sekali, dan kadang-kadang tes kedua dilakukan dengan pereaksi yang lebih sensitif untuk mengkonfirmasi atau memperbaiki hasilnya.

    PCR hepatitis C berkualitas tinggi

    Analisis PCR hepatitis C kualitatif adalah nama umum lain untuk analisis reaksi berantai polimerase. Sensitivitas standar dari tes, yang memungkinkan untuk mendeteksi keberadaan lesi virus, adalah dalam kisaran 10-500 IU / ml.

    Analisis PCR negatif untuk hepatitis C menunjukkan bahwa konsentrasi virus dalam darah pasien berada di bawah ambang kerentanan sistem diagnostik.

    Jika PCR berkualitas tinggi memberikan jawaban "tidak terdeteksi", maka untuk pengobatan selanjutnya penting untuk mengetahui ambang sensitivitas reagen.

    Fraksi protein terhadap flavavirus muncul jauh kemudian.

    PCR Kuantitatif Hepatitis C

    PCR hepatitis C kuantitatif adalah indikator viral load, yang mencerminkan tingkat konsentrasi RNA flavavirus dalam tubuh. Ini adalah indikator yang menunjukkan berapa banyak fragmen RNA virus yang terkandung per sentimeter kubik darah. Hasil PCR RNA hepatitis C dalam tes kuantitatif dalam sistem konvensional ditunjukkan dalam unit internasional per mililiter (IU / ml) dan dapat direkam dengan cara yang berbeda, misalnya, 1,7 juta atau 1.700.000 IU / ml.

    Diagnostik PCR kuantitatif hepatitis C diresepkan untuk pasien sebelum memulai terapi antiviral, dan pada minggu ke 12 pengobatan, untuk mengevaluasi hasil dari metode yang dipilih untuk menangani HCV. Viral load memungkinkan untuk menentukan tiga indikator penting dari penyakit:

    • infektivitas, yaitu tingkat risiko penularan virus dari satu karier ke yang lain (semakin tinggi konsentrasi RNA virus flava, semakin tinggi kemungkinan menginfeksi orang lain, misalnya, melalui kontak seksual);
    • metode dan efektivitas pengobatan;
    • durasi dan prognosis dari terapi antiviral (semakin tinggi viral load, semakin lama perawatan berlangsung).

    Diagnostik PCR kuantitatif hepatitis C tergantung pada jenis tes laboratorium dan ambang sensitivitasnya. Batas bawah norma dianggap indikator hingga 600.000 IU / ml, nilai rata-rata berada di kisaran 600.000-700.000 IU / ml. Hasil 800.000 IU / ml dan di atas dianggap tingkat tinggi virus yang mengandung RNA.

    Genotyping

    Karena aktivitas mutasi HCV yang tinggi di alam, ketika pengujian penting untuk mengidentifikasi genotipe virus mana dalam darah pasien. Secara total, 11 genotipe virus hepatitis C telah tercatat di planet ini, yang mencakup banyak subspesies (subtipe). Di wilayah Federasi Rusia didistribusikan 1,2 dan 3.

    RNA PCR Hepatitis C bersama dengan genotyping adalah komponen yang sangat penting dari analisis, karena memungkinkan dokter menentukan resistensi (resistansi) virus, memilih obat yang tepat dan meresepkan pengobatan.

    Genotyping juga memungkinkan Anda untuk secara tidak langsung menentukan keadaan hati. Sebagai contoh, 3 genotipe HCV sering disertai dengan steatosis, di mana lemak terakumulasi dalam sel-sel organ.

    Tes darah untuk PCR untuk hepatitis C harus menghasilkan angka yang menentukan genotipe. Tanggapan laboratorium dapat mengatakan "tidak diketik" - dan ini berarti bahwa virus ada dalam darah manusia yang tidak terdeteksi oleh sistem uji. Ini mungkin menunjukkan bahwa genotipe tidak khas untuk suatu wilayah geografis tertentu. Dalam hal ini, Anda harus mengulang analisis dengan sensitivitas sistem diagnostik yang lebih tinggi.

    Decoding analisis PCR untuk hepatitis C

    Tes untuk dekripsi kuantitatif PCR hepatitis C dapat didasarkan pada data di atas. Ketika memperoleh hasil tes laboratorium, data berikut biasanya ditulis:

    • "Ditemukan" / "tidak ditemukan" (PCR berkualitas tinggi untuk hepatitis C);
    • jumlah fraksi yang mengandung RNA, misalnya 831.680 ME / ml (analisis PCR kuantitatif);
    • gambar yang menentukan genotipe HCV, misalnya - 1, 2, 3, 4;
    • Nama tes ini paling sering Real-time.

    Yang paling penting dalam mengartikan analisis PCR untuk hepatitis C adalah paragraf kedua, yang menunjukkan viral load, yang menentukan prognosis, metode dan durasi pengobatan.

    Jika tes PCR untuk hepatitis C negatif, dan ELISA positif - apa artinya ini?

    Untuk menguraikan tes laboratorium, penting untuk menghubungi ahli hepatologi atau spesialis penyakit menular yang akan menjelaskan informasi yang diperoleh sesuai dengan jenis sistem diagnostik dan ambang batas sensitivitasnya. Dalam praktek medis, ada banyak data tes darah yang dapat menyesatkan seseorang tanpa pendidikan medis.

    Sebagai contoh, jika tes untuk PCR hepatitis C negatif, dan ELISA positif, itu mungkin berarti bahwa tidak ada HCV dalam darah pasien saat ini, tetapi sebelumnya ia menderita bentuk akut hepatitis C. Hal ini diyakini bahwa enzim immunoassay positif (ELISA) menunjukkan bahwa ada antibodi dalam darah yang telah diproduksi setelah invasi virus di masa lalu. Tetapi dalam praktek medis modern, analisis ELISA dianggap tidak cukup andal dan sering memberikan hasil yang tidak biasa, sehingga dokter menggunakannya sebagai skrining primer. Ketika mendiagnosis suatu penyakit, spesialis dipandu secara tepat oleh tes PCR.

    Video yang berguna

    Video berikut memberikan deskripsi yang sangat rinci dan menarik tentang esensi metode PCR, bagaimana analisis dilakukan:

    Kesimpulan

    Untuk analisis PCR untuk hepatitis C, darah vena biasanya diambil. Paling sering ada asupan ganda bahan biologis - untuk ELISA, dan langsung untuk tes PCR. Untuk hasil tes yang benar, kepatuhan dengan aturan dasar untuk pengambilan sampel laboratorium dari bahan biologis diperlukan:

    • darah untuk analisis diberikan pada paruh pertama hari dengan perut kosong;
    • antara makan dan pengambilan sampel darah harus memakan waktu minimal 8 jam;
    • alkohol dan makanan yang digoreng juga harus dikeluarkan sebelum mengambil tes;
    • selama sehari sebelum menyumbangkan darah, perlu untuk menghindari aktivitas fisik yang tinggi.

    Hasil tes darah biasanya siap pada hari berikutnya.


    Artikel Terkait Hepatitis

    Siapa yang sakit

    Senyagina Natalya Evgenievna

    Siapa yang sakit

    Diet untuk penyakit hati

    Siapa yang sakit

    Periode Inkubasi Hepatitis C