Apa norma untuk mengukur hepatitis C?

Share Tweet Pin it

Virus hepatitis C mampu berkembang biak dalam sel darah dan menyebabkan penyakit limfoproliferatif. Berkat berbagai mutasi, pertahanan kekebalan tubuh melemah, dan genotipe dan subtipe virus muncul. Dengan penentuan tipe tertentu yang tepat dan tepat waktu, efektivitas terapi antiviral bergantung. Bahaya infeksi adalah bahwa penyakit itu tidak bergejala. Hanya 15 persen dari 100 dapat mengalami mual dan muntah, penurunan berat badan dan demam.

Definisi virus hepatitis C

Tingkat standar hepatitis C adalah dalam ukuran 40-60 nm, dengan sebagian besar lipid, kerusakan hati yang diakibatkan oleh penyakit akut atau kronis. Hepatitis C, yaitu, virus RNA dari keluarga Togaviridae, sangat resisten, ditularkan melalui transfusi darah atau penggunaan benda-benda non-steril, persediaan kebersihan yang tidak tepat, dll. Analisis kuantitatif memungkinkan Anda untuk memeriksa darah dan mengidentifikasi struktur genetik dari virus yang terinfeksi.

Untuk menentukan hepatitis C dan genotipnya, analisis kuantitatif dilakukan. Tergantung pada alat analisa, tiga tingkat insiden virus RNA dapat ditentukan.

Subtipe dapat menghasilkan berbagai modifikasi, sehingga spesifisitas dan sensitivitas penganalisis harus seratus persen. Selain mendeteksi penyakit pada pasien, perlu untuk menentukan tingkat keparahannya. Beberapa laboratorium tidak memiliki semua data pada decoding virus RNA, ada kemungkinan respon positif yang salah.

Penelitian tentang hepatitis C akan lebih akurat ketika mempelajari indikator ini:

Menarik perhatian pada hasil indikator ini dan kondisi umum tubuh, hasilnya ditampilkan menunjukkan tingkat infeksi, bentuk, dan jumlah sel hepatitis C dalam darah. Ini berkontribusi pada proses penyembuhan dan efektivitas terapi antiviral.

Jenis analisis untuk hepatitis C

Sebuah reaksi berantai multi-dimensi (PCR) memberikan gambaran tentang jumlah partikel DNA dalam analisis pasien yang diambil, dan akan mengidentifikasi agen infeksi dengan benar.

Agen penyebab penyakit infeksi dapat terjadi. Infeksi hati, seperti hepatitis C, dapat diobati pada saat kita dideteksi pada waktu yang tepat. Jika dicurigai ada virus, analisis PCR dilakukan.

Mengingat bahwa untuk waktu yang lama gejala-gejala virus dapat disamarkan, seseorang mungkin tidak merasakan timbulnya penyakit. Tetapi dengan pemeriksaan menyeluruh pada 60-70% kasus, hepatitis C terdeteksi, analisis pertama, di mana ELISA, maka diagnosis PCR berikut. Analisis dilakukan dalam periode tertentu untuk menentukan stadium penyakit dan meresepkan pengobatan yang tepat. Untuk melakukannya tanpa itu, tanpa menerapkan semua prosedur ini, adalah mungkin, divaksinasi terhadap hepatitis.

Analisis kualitatif dan kuantitatif

Ada analisis kualitatif dan kuantitatif. Esensi dari yang pertama adalah bahwa ia menentukan adanya infeksi dalam darah. Dan itu berarti virus itu menginfeksi sel-sel hati yang sehat. Ketika antibodi terhadap hepatitis C ditemukan pada pasien, tes kualitatif segera dilakukan. Angka yang harus diberikan hasilnya "tidak terdeteksi dalam darah". Ketika menentukan konsentrasi virus, ada kebutuhan untuk mengetahui sensitivitas sistem diagnostik, karena orang yang sedang menjalani terapi antivirus dapat melakukan analisis. Tingkat kepekaan penganalisa tidak boleh kurang dari 50 IU / ml.

Ketika virus terdeteksi, analisis kuantitatif dilakukan, dengan kata lain, viral load, yang menentukan konsentrasi virus dalam darah dan tingkat keparahan penyakit.

Viral RNA, yang dalam jumlah tertentu darah, didefinisikan sebagai norma pada tingkat 1 ml per 1 sentimeter kubik. Setelah mengukur viral load, adalah mungkin untuk menilai tingkat infeksi lingkungan yang masih tidak terinfeksi. Segera setelah konsentrasi hepatitis C naik dalam darah, perlu untuk mengisolasi dari lingkungan.

Penting pada tahap pertama untuk mendeteksi tingkat konsentrasi hepatitis, untuk menentukan laju rehabilitasi. Jika tingkat hepatitis C terlampaui lebih dari 800 ribu IU / ml, itu dianggap terlalu tinggi, dengan peningkatan hingga satu juta - kritis. Jika rentang kuantitatif kurang dari 400 ribu IU / ml, dianggap bahwa infeksi pada orang-orang di sekitarnya akan kurang mungkin. Angka ini menjelaskan bahwa hepatitis C ada dalam tubuh dalam dosis yang sangat kecil. Analisis tidak dapat menentukan nilai kuantitatif dari partikel RNA virus, sehingga diangkat kembali beberapa kali untuk diagnosis yang akurat.

Hasil analisis kuantitatif

Tugas menentukan jumlah viral load dalam darah pasien adalah identifikasi tingkat infeksi pada orang lain.

Hasil analisis PCR:

  1. Jawaban positif berarti ada infeksi pada bahan biologis. Analisis memungkinkan untuk menentukan jumlah pasti sel yang terinfeksi.
  2. Jawaban negatif menunjukkan tidak adanya infeksi, yang dicari secara hati-hati di dalam tubuh.

Metode penentuan kuantitatif hepatitis C akurat dan informatif, dilakukan pada peralatan dengan sensitivitas tinggi. Menguraikan hasil analisis memungkinkan Anda untuk mencari tahu apakah infeksi dan spesifikasinya, untuk melihat jumlah terkecil sel yang terinfeksi pada alat analisa yang sangat sensitif.

Hasil positif atau berlawanan palsu jarang diberikan oleh analisis, lebih sering ini terjadi dalam studi immunoassay.

Analisis kuantitatif PCR untuk hepatitis C

Ada banyak subtipe HCV, yang mengapa tidak selalu mungkin untuk memilih obat antiviral yang efektif dan mencapai hasil yang diinginkan dalam pengobatan. Berbagai patogen karena kemampuan mereka untuk mengubah struktur mereka, yaitu, untuk bermutasi. Akibatnya, kekebalan tidak punya waktu untuk membentuk respon yang kuat terhadap agen patogen, dan obat-obatan tidak efektif.

Hepatitis sering didiagnosis pada tahap sirosis, yang predisposisi deteksi terlambat penyakit karena tidak adanya tanda-tanda klinis. Hanya dengan penelitian laboratorium dapat HCV terdeteksi pada masa inkubasi.

Analisis kuantitatif hepatitis C memungkinkan tidak hanya untuk menetapkan keberadaan patogen dalam darah, tetapi juga untuk menghitung konsentrasinya.

Rekomendasi untuk mempersiapkan analisis

Persiapan khusus untuk diagnosis laboratorium tidak diperlukan. Cukup untuk mematuhi rekomendasi berikut:

  1. analisis kuantitatif dilakukan dengan perut kosong, dengan makanan terakhir - 8 jam sebelum pengumpulan darah;
  2. selama dua hari Anda harus meninggalkan alkohol dan hidangan "berat";
  3. Yang paling penting adalah obat-obatan yang dibutuhkan pasien. Mereka dapat mempengaruhi hasil penelitian, jadi dokter harus tahu tentang mereka.

Juga tidak diinginkan adalah olahraga berat dan prosedur fisioterapi pada malam pengambilan sampel darah. Untuk menguraikan analisis kuantitatif hepatitis C ternyata dapat diandalkan, jangan mengabaikan rekomendasi di atas.

Seringkali, pasien menerima hasil analisis dalam sehari. Harga penelitian untuk menentukan konsentrasi patogen dalam darah tergantung pada laboratorium dan kualitas reagen dan dapat mencapai 4 ribu rubel.

Diagnosis laboratorium hepatitis C

Di antara metode utama diagnosis adalah ELISA, atau assay immunosorbent terkait enzim. Ini diresepkan untuk mendeteksi antibodi spesifik terhadap HCV. Efisiensinya mencapai 95%. Jika transkrip penelitian memberikan hasil positif, perlu dicurigai adanya patogen dalam darah.

Perhatikan bahwa dalam setengah subjek dengan tes “+” dalam proses diagnosis lebih lanjut, agen virus tidak terdeteksi dalam darah. ELISA dalam hal ini menunjukkan kontak yang ditunda dengan HCV di masa lalu, sebagaimana dibuktikan oleh antibodi yang bersirkulasi.

Studi yang lebih akurat adalah reaksi berantai polimerase, atau PCR. Ini memungkinkan Anda untuk menentukan konsentrasi patogen RNA dalam darah. Menemukan rangkaian genetik virus dalam bahan biologis, dokter menegaskan hepatitis C.

PCR ditugaskan kepada pasien untuk memverifikasi diagnosis. Itu memungkinkan untuk mengidentifikasi RNA pada tahap ketika antibodi belum tersedia. Ada beberapa jenis studi genetika:

  1. analisis kuantitatif PCR untuk hepatitis C, yang tidak hanya menetapkan keberadaan patogen dalam darah, tetapi juga memberikan informasi tentang konsentrasinya;
  2. kualitas - mengkonfirmasi infeksi;
  3. genotyping - memungkinkan Anda untuk menentukan genotipe agen patogen dan memilih obat yang paling efektif untuk melawannya.

Reaksi berantai polimerase

Seperti yang sudah disebutkan, ada beberapa jenis tes laboratorium:

  • analisis kualitatif menunjukkan adanya agen patogen dalam darah. Jenis diagnosis ini memiliki "tingkat respons" tertentu, oleh karena itu tidak selalu dapat diandalkan. Untuk benar memecahkan kode hasil dan mendapatkan indikator nyata, disarankan untuk menggunakan sistem pengujian dengan sensitivitas setidaknya 50 IU / ml untuk penelitian. Tingkat analisis adalah "respons negatif" atau "virus tidak terdeteksi." Ini menunjukkan tidak adanya set genetik patogen dalam bahan uji. Jika hasilnya positif, pemeriksaan lebih lanjut dari pasien diperlukan;
  • Analisis kuantitatif PCR untuk hepatitis C menentukan viral load, yaitu konsentrasi agen patogen dalam darah. Hasil penelitian menunjukkan jumlah unit RNA dalam volume cairan biologis tetap;

Viral load adalah penghitungan RNA infeksius dalam satu mililiter darah yang sedang diselidiki. Satuan ukurannya adalah IU / ml, namun beberapa laboratorium mendefinisikan "salinan / ml", sambil menunjuk ke bentuk norma analisis untuk perbandingan dan evaluasi hasil.

  • genotyping. Karena kemampuan patogen untuk mengubah pilihan obat antiviral yang efektif untuk terapi harus didasarkan pada genotipnya. Bukan hanya hasilnya, tetapi juga durasi perawatannya tergantung pada itu. Dengan demikian, HCV 1 hepatitis membutuhkan penunjukan obat selama setahun, tetapi tren positif hanya diamati pada 60% kasus. Adapun genotipe kedua dan ketiga, mereka kurang resisten terhadap tindakan obat antiviral, karena efektivitas terapi melebihi 85%. Setelah menerima hasil penelitian tersebut - "virus tidak diketik," patut dicurigai adanya patogen yang tidak diakui oleh sistem uji standar.

Indikasi untuk analisis

Decoding analisis kuantitatif hepatitis C diperlukan untuk:

  1. pemeriksaan lebih lanjut dari pasien ketika antibodi terhadap HCV terdeteksi selama ELISA;
  2. konfirmasi diagnosis;
  3. membangun viral load selama infeksi campuran, ketika seseorang terinfeksi dengan beberapa jenis patogen;
  4. menentukan taktik pengobatan (pilihan obat antivirus, penggantian atau penyelesaian terapi mereka);
  5. menilai dinamika perkembangan penyakit, serta efektivitas obat;
  6. menentukan tahap patologi (akut, kronis).

PCR memiliki keuntungan sebagai berikut:

  1. sensitivitas yang baik, yang memungkinkan untuk menghitung bahkan sejumlah kecil virus;
  2. identifikasi patogen itu sendiri (RNA), dan bukan antigen;
  3. kekhususan teknik - pembentukan agen patogen jenis tertentu;
  4. kecepatan memperoleh hasil, karena analisis tidak mengharuskan budidaya tanaman dalam medium nutrisi. Jawabannya siap dalam 5 jam;
  5. universalitas - memungkinkan Anda untuk mengidentifikasi set genetik dari berbagai patogen, baik RNA dan mengandung DNA (hepatitis B);
  6. deteksi infeksi laten.

Penelitian laboratorium membantu untuk mengkonfirmasi diagnosis dan merupakan bagian integral dari pemeriksaan komprehensif (analisis gejala klinis, hasil ELISA dan biokimia).

Selain itu, PCR secara luas digunakan dalam alergi, genetika, dan juga untuk menetapkan fakta tentang ayah.

Decoding analisis kuantitatif dari virus hepatitis C

Evaluasi hasil diagnosa laboratorium dilakukan oleh dokter dengan membandingkan data yang diperoleh dengan norma.

Menguraikan analisis untuk hepatitis C

Penyakit hati di dunia modern sangat relevan, karena organ ini tunduk pada pengaruh negatif dari lingkungan, gaya hidup yang tidak pantas, dll.

Tetapi ada penyakit yang benar-benar dapat terinfeksi oleh setiap orang, dan sangat sulit untuk memprediksi apakah ini akan terjadi atau tidak. Ini, misalnya, hepatitis virus, yang ditularkan terutama melalui darah dan awalnya tidak membuat diri mereka dikenal. Khususnya, kita berbicara tentang C-hepatitis.

Fakta bahwa virus pada awalnya tidak menunjukkan tanda-tanda khusus yang secara serius mempersulit diagnosis, tetapi, bagaimanapun, ada penelitian yang cukup efektif dan beragam yang akan membantu menemukan masalah.

Prinsip dasar mendeteksi penyakit HCV adalah mengartikan tes untuk hepatitis C, yaitu membandingkan indikator-indikator tertentu dengan norma-norma.

Kondisi untuk mendapatkan petunjuk arah

Diagnosis hepatitis C dilakukan oleh orang-orang karena berbagai alasan, terutama:

  • kemungkinan tersangka hepatitis;
  • seseorang berisiko;
  • diagnosis diperlukan dalam pandangan spesifik pekerjaan;
  • wanita selama kehamilan atau ketika merencanakan.

Ada beberapa jenis diagnostik: beberapa di antaranya adalah penelitian yang dangkal, yang lain sangat dalam dan sangat akurat, prinsipnya adalah studi tentang penyimpangan minimal dari indikator normal atau pendeteksian zat-zat tertentu.

Untuk mendeteksi virus hepatitis C dalam darah manusia, 3 jenis metode diagnostik yang digunakan, ini adalah:

  1. Enzim immunosorbent assay terkait enzim (ELISA). Dilakukan di laboratorium, prinsipnya terletak pada penentuan antibodi terhadap hepatitis, khususnya: IgG, IgM. Diagnosis ini tidak akan memberikan jawaban rinci: seseorang sakit atau tidak, karena sepertiga dari pembawa antibodi tidak terdeteksi. Ini terjadi karena kesenjangan antara virus yang memasuki tubuh dan produksi antibodi terhadapnya, jadi ini adalah analisis yang meragukan dan sangat dangkal.
  2. Analisis imunoblot rekombinan. Ini dilakukan hanya untuk mengkonfirmasi tes laboratorium, jika hasilnya positif, itu berarti bahwa orang tersebut adalah atau pembawa penyakit. Antibodi terhadap virus tidak segera ditampilkan, bahkan setelah pengobatan hepatitis berhasil. Selain itu, hasil yang salah mungkin terjadi karena beberapa faktor pihak ketiga.
  3. Analisis Polymerase (PCR). Apa metode yang paling akurat untuk menentukan hepatitis? - PCR unik. Ini adalah cara termuda dan paling akurat untuk mendiagnosis. Ini PCR dapat memberikan jawaban rinci tentang jalannya penyakit, memungkinkan Anda untuk mengatur konsentrasi virus dalam darah dan genotipe (ada 6). Prinsipnya didasarkan pada pendeteksian virus DNR / RNA dalam plasma darah. Metode ini melewati semua hal di atas dalam hal kualitas diagnosis: setidaknya 20 hari harus berlalu sebelum manifestasi klinis hepatitis, dan maksimum 120 hari, sebelum produksi antibodi - 10-12 minggu setelah penetrasi virus. Tetapi deteksi agen penyebab dalam darah tidak dapat salah dengan cara apa pun, satu-satunya pembatasan: 5 hari harus berlalu dari saat infeksi, karena mungkin belum ada virus dalam volume darah yang diteliti.

PCR dilakukan untuk diagnosis yang akurat, itu terjadi tiga subspesies:

  1. Analisis kualitatif. Dengan itu, hanya keberadaan virus yang ditentukan.
  2. Diagnostik kuantitatif. Digunakan untuk menentukan kandungan pasti virus dalam volume darah; selama perawatan digunakan untuk menguji kemanjuran.
  3. Diagnosis genotipik. Digunakan untuk menentukan genotipe, dan kemudian fenotipe virus. Untuk mengetahui genotipe patogen sangat penting untuk terapi, karena, tergantung pada karakteristiknya, perjalanan dan konsentrasi perubahan asupan obat.

Analisis tambahan

Dalam metode diagnosis, peran penting dimainkan oleh tes tambahan, yang kadang-kadang, benar-benar mengubah fitur perawatan, dan kadang-kadang bahkan dapat menunjukkan diagnosis yang berbeda.

Analisis biokimia

Untuk benar-benar meresepkan pengobatan dan tidak memperburuk gambar, Anda harus menentukan dengan pasti tingkat kerusakan hati, karena ini menggunakan tes darah biokimia, yang akan menunjukkan penyimpangan dari norma dalam komposisinya.

Perubahan ciri fitur kerusakan jaringan hati, itu adalah: tahap penyakit, keparahan fibrosis, gangguan hati. Metode biokimia akan menunjukkan jumlah nyata bilirubin, protein, urea, kreatinin, gula, AST dan ALT, alkaline phosphatose, zat besi dan gamma-glutamyltranspeptidase dalam darah. Selain itu, profil lipid dan kualitas metabolisme protein akan ditentukan.

Fibroso-diagnosis

Fibrosis adalah kerusakan pada jaringan hati, tentu saja tergantung pada derajatnya, oleh karena itu diagnosis keparahan kerusakan jaringan sangat penting. Dilihat oleh gambaran perjalanan penyakit, dokter mungkin menilai urgensi pengobatan: jika situasinya tidak kritis, bahkan mungkin ditunda sehingga tidak merusak organ lain dengan obat-obatan.

Analisis lainnya

Kadang-kadang, untuk mendapatkan gambaran lengkap dari penyakit, scan ultrasound dari rongga perut dan kelenjar tiroid, hitung darah lengkap, digunakan. Orang yang lebih tua didiagnosis dengan sistem kardiovaskular dan pencernaan, paru-paru.

Jika tidak mungkin untuk melakukan analisis ELISA / PCR standar, analisis spesifik dilakukan: analisis air liur dan cairan lain untuk keberadaan patogen.

Indikator

Teknologi untuk mendiagnosis hepatitis C berada pada tingkat yang tinggi dan, seringkali, tidak memberikan hasil yang salah.

Meskipun demikian, tidak mungkin untuk memberikan jaminan akurasi 100%: hasil positif palsu dimungkinkan.

Tes darah dapat memberikan jawaban yang salah jika tidak sesuai dengan aturan analisis atau untuk beberapa faktor lainnya. Alasan utama distorsi hasil:

  • beberapa infeksi spesifik yang bereaksi dengan agen skrining dan tesnya positif;
  • penelitian kehamilan;
  • kehadiran zat sekunder di dalam tubuh;
  • gangguan sistem kekebalan tubuh;
  • pelanggaran aturan pengambilan sampel darah.

Menguraikan tes untuk hepatitis C

Menguraikan tes untuk menangani hepatitis dengan spesialis berpengalaman yang akan menentukan kelainan masing-masing indikator dan menulis kesimpulan tentang kemungkinan hepatitis.

Ketika mendiagnosis dengan ELISA, deteksi antibodi dalam darah akan menunjukkan bahwa ada atau ada virus hepatitis dalam tubuh manusia: baik pasien sakit sekarang atau telah memiliki penyakit dan antigen hanya tidak punya waktu untuk keluar dari tubuh. Harus diingat bahwa antibodi tidak bekerja dengan segera - waktu tertentu harus berlalu agar analisis semacam itu memberikan hasil yang dapat diandalkan, oleh karena itu, jika perlu, Anda perlu menyumbangkan kembali darah untuk pengujian.

Jika diagnosis PCR memberi respon positif, maka dengan probabilitas 99% dalam tubuh adalah patogen. Dalam hal ini, perlu untuk menentukan tingkat keparahan dan melaksanakan rna genotip untuk memperbaiki jalannya, dan kemudian segera memulai perawatan sehingga hepatitis tidak menjadi kronis. Tes polimerase ini dianggap sangat akurat, karena mereka dapat mendeteksi hingga 1 perwakilan virus di dalam sel. Jika laju aliran reaksi rantai polimerase tidak dilanggar, maka jawabannya negatif dan tidak perlu khawatir.

Ketika menetapkan hepatitis C, penentuan kuantitatif bilirubin, ALT dan AST, protein digunakan. Konten mereka juga menunjukkan tingkat dan keparahan penyakit.

Tabel umum indikator zat dalam darah yang mungkin mengindikasikan C-hepatitis setelah analisis biokimia:

Hepatitis C. Analisis kuantitatif. Norma, hasil transkrip

Hepatitis C. Apa yang berbahaya bagi manusia? Bagaimana mendiagnosa infeksi. Apa yang dibutuhkan untuk analisis

Virus Hepatitis C. Seberapa berbahayanya. Bagaimana mengidentifikasinya tepat waktu.

Virus Hepatitis C atau HCV adalah penyakit menular yang membawa molekul asam ribonukleat.

Jenis virus ini dapat dengan mudah beradaptasi dengan kondisi habitat dan sering berubah menjadi berbagai bentuk penyakit, itulah mengapa sistem pertahanan tubuh kita begitu sulit untuk mengatasinya. Enam jenis genetik utama infeksi dan lusinan subtipe diklasifikasikan. Di wilayah kami, tiga jenis virus pertama sering ditemukan.

Menurut statistik, hanya seperempat dari kasus penyakit HCV terjadi tanpa komplikasi, dalam semua kasus lain, norma, jika infeksi berkembang menjadi proses kronis yang berdampak buruk pada organ internal. Jadi hepatitis mungkin dipersulit oleh fibrosis hati - proses mengganti sel-sel hati. Komplikasi lebih lanjut berkembang sesuai dengan reaksi berantai: sebagai akibat dari fibrosis, tumor kanker muncul, dan penyakit hati berkembang menjadi sirosis.

Dalam banyak kasus, infeksi memasuki tubuh manusia melalui pembuluh darah. Virus hepatitis C didiagnosis dengan beberapa metode. Pantau tingkat konsentrasi antibodi terhadap HCV. Infeksi tidak terjadi jika antibodi tidak ditemukan dalam darah pasien. Jika tidak, virus ini dipelajari lebih dalam, lakukan tes lain - PCR. Hanya metode ini memungkinkan untuk mengidentifikasi virus RNA hanya satu setengah minggu setelah infeksi, pada saat ketika tubuh tidak memiliki waktu untuk mulai memproduksi antibodi terhadap infeksi, dan konsekuensi dari infeksi tidak tercermin dalam kondisi umum, terutama dalam hasil penelitian lain, seperti BAC dan biopsi.

Analisis PCR untuk RNA: kuantitatif dan kualitatif. Hasil dekode

Viral load atau analisis kuantitatif PCR - analisis untuk menentukan tingkat infeksi pada plasma. Intinya, analisis kuantitatif adalah jumlah molekul asam ribonukleat yang menular dalam satu mililiter darah.

R-DNA adalah metode kuantitatif yang cepat, murah, dan tidak akurat untuk menentukan virus berdasarkan deteksi sel-sel bercabang. Tes ini mungkin tidak mengidentifikasi infeksi yang ada dalam tubuh karena sensitivitas yang buruk - sekitar 450 IU / ml.

Metode kuantitatif amplifikasi transkripsi memungkinkan Anda untuk menemukan sel-sel di tubuh RNA. Metode ini muncul relatif baru-baru ini, itu murah dan merupakan alat diagnostik yang cukup efektif. Sensitivitas tes adalah sekitar 10 IU / ml.

Mari mencoba menjelaskan hasil analisis. Di bawah ini adalah tabel dan decoding.

Penelitian PCR untuk hepatitis C: jenis, indikasi, transkrip

Viral hepatitis C adalah penyakit serius yang terjadi dengan kerusakan pada hati. Dalam delapan puluh persen pasien, itu menjadi kronis. Virus berkembang biak di sel-sel hati - hepatosit - dan menyebabkan kematian mereka. Jaringan mati digantikan oleh fokus jaringan ikat, fibrosis berkembang.

Ketika fibrosis berkembang, hati tidak dapat melakukan fungsinya, sirosis hati dimulai, yang berbahaya karena komplikasinya: peningkatan tekanan dalam sistem vena portal, perdarahan gastrointestinal, gangguan pembekuan darah, perubahan mental karena kerusakan pada nuklei otak.

Penyebab penyakit ini adalah infeksi oleh virus dari keluarga Flaviviridae, yang termasuk jenis virus RNA. Ini berarti bahwa bahan genetik dimana protein dari patogen disintesis dikodekan dalam molekul asam ribonukleat. Infeksi terjadi melalui darah, seksual, dan dari wanita hamil ke janin. Sayangnya, waktu yang cukup lama dapat terjadi antara infeksi dan dimulainya produksi antibodi - dari dua minggu hingga enam bulan. Ini tidak memungkinkan untuk menentukan infeksi dengan metode immunoassay dan memulai perawatan pada tahap awal.

Apa itu analisis PCR?

PCR adalah metode analisis molekuler, yang memungkinkan untuk mendeteksi bahan genetik dari patogen yang sudah ada dalam minggu pertama setelah infeksi menggunakan reaksi berantai polymerase. Studi ini memiliki spesifisitas yang tinggi, akurasi, dan memungkinkan tidak hanya untuk menentukan ada tidaknya virus, tetapi juga konsentrasi dan genotipe.

Untuk penelitian, darah pasien diambil di mana RNA virus berpotensi berada. Primer ditambahkan ke darah - daerah buatan yang disintesis dari gen yang diinginkan dengan panjang kecil, dan RNA polimerase adalah enzim khusus yang berulang kali meningkatkan jumlah materi genetik patogen. Dengan menggunakan peralatan khusus, beberapa siklus pemanasan dan pendinginan dilakukan. Kemudian bahan dianalisis dan dibandingkan dengan gen virus yang diketahui, atas dasar kesimpulan yang dibuat tentang ada atau tidak adanya infeksi.

Jenis analisis PCR untuk hepatitis C

Ada tiga jenis analisis PCR:

  1. Analisis kualitatif PCR. Tahap pertama penelitian. Ini memungkinkan Anda mengidentifikasi bahan genetik virus di dalam darah.

  • Analisis kuantitatif PCR. Memungkinkan Anda untuk menentukan viral load - konsentrasi bahan genetik patogen dalam satu mililiter darah. Penelitian ini dilakukan sebelum dimulainya terapi, dan kemudian pada sesi pertama, keempat, kedua belas, dan (jika perawatannya panjang) dua puluh empat minggu untuk mengevaluasi keefektifannya.

  • Genotyping Agen penyebab hepatitis C sering dan cepat bermutasi. Ada tujuh varian genotipe virus yang ditemukan di planet ini. Di Rusia, jenis pertama, kedua dan ketiga adalah umum. Masing-masing genotipe memiliki ketahanan yang berbeda terhadap terapi, misalnya, efektivitas pengobatan jenis pertama adalah enam puluh persen, dan untuk yang kedua dan ketiga angka ini mencapai delapan puluh lima. Oleh karena itu, untuk memilih obat yang tepat dan meresepkan pengobatan jangka waktu yang cukup, perlu ditentukan dengan tepat jenis virus apa yang terinfeksi oleh pasien.
  • Indikasi untuk analisis PCR untuk hepatitis C

    Studi PCR diresepkan dalam kasus-kasus berikut:

    • kontak dengan orang yang sakit di mana infeksi bisa terjadi;
    • immunoassay enzim positif;
    • tanda-tanda sirosis: perubahan ukuran hati, pembesaran limpa, penampilan di perut pleksus vena subkutan;
    • munculnya gejala kerusakan hati: nyeri di perut kanan, menguningnya kulit;
    • peningkatan aktivitas ALT dan AST dalam analisis biokimia darah;
    • sebelum memulai pengobatan untuk menentukan viral load;
    • untuk memantau efektivitas terapi antiviral;
    • setelah perawatan untuk mengendalikan kekambuhan;
    • di hadapan didiagnosis hepatitis B, untuk mengecualikan kerusakan hati campuran.

    Penjelasan studi PCR tentang hepatitis C

    Decoding analisis PCR dan immunoassay enzim untuk hepatitis C harus dilakukan oleh spesialis penyakit hepatologi atau infeksi. Menganalisis hasil PCR diperlukan dalam kombinasi dengan data analisis biokimia darah, biopsi dan ultrasound. Hanya dokter yang memenuhi syarat yang akan dapat menganalisis hasil penelitian dan, berdasarkan mereka, meresepkan perawatan yang benar.

    Decoding analisis kualitatif.

    Dalam bahan biologis yang dianalisis ditemukan bahan genetik dari patogen. Infeksi dikonfirmasi.

    Infeksi tidak ada, atau jumlah RNA patogen di bawah batas sensitivitas.

    Decoding analisis kuantitatif.

    Tingkat normal untuk orang sehat. Ini berarti bahwa tidak ada RNA hepatitis C dalam materi yang diteliti, atau konsentrasinya di bawah ambang sensitivitas penelitian.

    Konsentrasi RNA berada di bawah kisaran kuantifikasi. Hasil ini diinterpretasikan dengan sangat hati-hati, menghubungkan mereka dengan data dari penelitian lain, sering kali dipelajari kembali.

    Tingkat viral load pada konsentrasi yang diberikan dianggap rendah. Biasanya, penurunan jumlah virus berarti bahwa terapi tersebut berhasil.

    Lebih dari 8 * 10 ^ 5 IU / ml

    Tingkat viral load pada konsentrasi yang diberikan dianggap tinggi.

    Lebih dari 2,4 * 10 ^ 7 IU / ml

    Jumlah RNA di atas batas atas rentang kuantifikasi. Tidak mungkin untuk menarik kesimpulan tentang tingkat viral load dengan hasil ini. Biasanya dalam kasus seperti itu, tes diulang dengan pengenceran sampel darah.

    Decoding genotyping.

    Terdeteksi RNA dari genotipe tertentu

    Virus Hepatitis C dari genotipe dan subtipe tertentu terdeteksi dalam biomaterial. Hasilnya dikodekan dalam angka Romawi dan huruf Latin, misalnya - 1a, 2b. Secara total ada tujuh genotipe dan enam puluh tujuh subtipe, namun, di Rusia hanya ada tiga jenis pertama.

    Hepatitis C virus RNA terdeteksi

    RNA ditemukan dalam darah genotipe langka untuk Rusia, yang tidak dapat dikaitkan dengan tipe pertama, kedua, atau ketiga. Lebih banyak penelitian diperlukan.

    Hasil ini menunjukkan bahwa pasien sehat, atau bahwa jumlah RNA patogen terlalu kecil.

    Ada kemungkinan bahwa analisis PCR untuk hepatitis C negatif, dan assay immunosorbent terkait enzim mengenali antibodi terhadap virus. Ini berarti bahwa pasien menderita hepatitis C akut dan sembuh sendiri. Sekitar dua puluh kasus infeksi menghasilkan pemulihan spontan jika tubuh pasien memiliki ketahanan yang cukup terhadap infeksi.

    Meskipun PCR adalah tes yang sangat akurat, hasilnya mungkin terdistorsi dalam situasi berikut:

    • darah diangkut ke laboratorium dalam kondisi yang tidak sesuai, suhu dilanggar;
    • sampel biomaterial terkontaminasi;
    • ada jejak sisa heparin dan antikoagulan lainnya di dalam darah;
    • Peneliti ditemukan sebagai inhibitor - zat yang memperlambat atau menghentikan reaksi berantai polymerase.

    Keunggulan PCR dibanding metode lainnya

    1. Diagnosa pada tahap awal. PCR mendeteksi materi genetik dari agen penyebab. Dengan menggunakan analisis imunofluoresensi, hanya imunoglobulin yang dapat ditentukan - zat yang diproduksi tubuh sebagai respons terhadap infeksi. Dalam kasus infeksi hepatitis C, interval antara infeksi dan permulaan respon imun mungkin beberapa minggu dan bulan, saat ini ELISA tidak akan efektif. PCR akan memberikan jawaban pada minggu pertama setelah infeksi.

  • Probabilitas kesalahan rendah. Dalam materi yang diteliti menentukan luas materi genetik, yang merupakan karakteristik dari hanya satu jenis patogen. Ini menghilangkan hasil yang salah. Ketika kesalahan ELISA dimungkinkan, karena jenis antibodi yang sama dapat dilepaskan terhadap virus yang berbeda - antibodi tersebut disebut antibodi silang.

  • Sensitivitas tinggi. PCR memungkinkan untuk mendeteksi RNA agen penyebab bahkan dalam jumlah minimal. Ini memungkinkan untuk mengidentifikasi infeksi yang tersembunyi.
  • Cara mempersiapkan donor darah untuk studi PCR

    Untuk analisis PCR hepatitis C, darah vena dikumpulkan. Biasanya, dua bagian darah diambil dari pembuluh darah pasien pada saat yang sama: yang pertama dikirim untuk PCR dan yang kedua oleh ELISA. Hal ini dilakukan untuk lebih akurat menilai berapa banyak pasien terinfeksi virus, dan bagaimana kekebalan melawannya.

    Biasanya pasien harus mematuhi aturan berikut:

    • tes darah diambil di pagi hari;
    • Interval antara makanan terakhir dan donor darah harus delapan hingga sepuluh jam;
    • dua atau tiga hari sebelum analisis, perlu untuk meninggalkan makanan yang digoreng dan berlemak, dan alkohol;
    • selama dua puluh empat jam sebelum analisis, pasien harus menghindari aktivitas fisik: jangan membawa beban, jangan pergi ke gym atau kolam renang.

    Apa yang ditunjukkan analisis kuantitatif terhadap hepatitis C?

    Sangat sulit untuk mendiagnosis penyakit hati dengan tanda-tanda eksternal atau rasa sakit.

    Hal ini disebabkan kekhasan organ, yang secara praktis tidak memiliki ujung saraf dan merupakan pasien dengan berbagai penyakit.

    Demikian pula halnya dengan hepatitis - pada tahap awal mereka tidak memancarkan diri, hanya dengan perkembangan penyakit jaundice dapat terjadi, suhu naik dan sedikit rasa sakit di hati bisa dirasakan.

    Untuk mendiagnosis dengan akurasi dan memilih metode pengobatan, dokter dapat meresepkan berbagai tes: dari tes darah untuk antibodi hingga USG hati.

    Tapi, hepatitis didiagnosis oleh darah, semua penelitian tambahan dimaksudkan terutama untuk memahami bagaimana virus merusak hati.

    Pada sesi ini, dokter mungkin meresepkan Anda analisis kuantitatif untuk hepatitis C. Dalam artikel ini kami akan menganalisis mengapa dia ditunjuk, saat lolos, hasil yang mungkin dan interpretasinya. Di akhir materi, Anda akan menemukan perkiraan harga untuk donor darah untuk analisis.

    Apa itu?

    Penelitian semacam itu dilakukan untuk memahami berapa banyak molekul virus di dalam tubuh.

    Analisis kuantitatif adalah tes darah untuk kehadiran hepatitis. Ini menunjukkan bagaimana sel-sel dalam tubuh terinfeksi virus, apakah penyakitnya berkembang atau tidak.

    Artinya, ini menunjukkan konsentrasi atau beban RNA Hepatitis C dalam tubuh manusia dalam satuan per mililiter atau 1 sentimeter kubik darah.

    Sebaliknya, analisis kualitatif membantu menentukan hanya keberadaan RNA virus.

    Dalam hal apa?

    Penelitian ini dilakukan secara paralel dengan analisis kualitatif setelah tes darah untuk kehadiran antibodi terhadap hepatitis (ELISA) menunjukkan hasil yang positif. Lakukan beberapa kali:

    • dalam diagnosis awal hepatitis C sebelum membuat keputusan tentang pilihan perawatan;
    • selama pengobatan penyakit (biasanya pada 1, 4, 12 dan 24 minggu) untuk menentukan gambaran klinis hasil terapi;
    • setelah perawatan untuk menentukan kekambuhan.

    Pentingnya

    Analisis kuantitatif adalah salah satu jenis penelitian utama di mana dokter bergantung ketika memilih metode pengobatan untuk hepatitis. Ini berfungsi untuk:

    1. Memahami berapa banyak tubuh terinfeksi virus, keberadaan antigen dalam tubuh secara kuantitatif.
    2. Efektivitas terapi yang dipilih.
    3. Pilih metode pengobatan dan buat perkiraannya.

    Namun, analisis ini tidak memungkinkan untuk menilai tingkat kerusakan hati atau beratnya penyakit bagi tubuh. Untuk melakukan ini, gunakan penelitian lain, misalnya, analisis biokimia darah, elastometri, biopsi dan lain-lain.

    Metode dan tenggat waktu

    Pengambilan sampel darah dari vena biasanya terjadi di pagi hari. Melalui penggunaan polymerase chain reaction (PCR), penelitian semacam itu dapat disebut salah satu yang paling akurat di bidang deteksi virus.

    Tanpa menggunakan terminologi ilmiah, prosesnya dapat digambarkan sebagai berikut: biomaterial yang diambil dicampur dengan enzim tertentu yang memungkinkan Anda untuk menyalin RNA enzim atau DNA virus. Begitu juga, sampai menjadi cukup dari molekul-molekul ini untuk mengidentifikasi patogen.

    Batas waktu untuk mengeluarkan hasil bervariasi tergantung pada institusi medis dan beban kerjanya. Hasilnya dapat diringkas setelah 4-5 jam setelah dimulainya penelitian. Oleh karena itu, hasilnya mungkin dikeluarkan pada hari berikutnya setelah pengambilan sampel darah.

    Semakin modern laboratorium, peralatan dan reagen, hasil yang lebih akurat dan lebih cepat dapat diperoleh.

    Mempersiapkan donor darah

    Pengiriman biomaterial untuk analisis terjadi dari vena. Tidak ada rekomendasi khusus untuk persiapan, oleh karena itu aturan standar yang harus diikuti sebelum donor darah untuk penelitian relevan:

    1. Lebih baik melakukan ini di pagi hari dengan perut kosong (makanan terakhir seharusnya tidak lebih awal dari 8-12 jam sebelum melahirkan).
    2. Jika darah tidak terkumpul di pagi hari, maka sebaiknya Anda tidak mengonsumsi makanan berlemak untuk sarapan (interval 8-12 jam juga harus diperhatikan).
    3. Menolak dari alkohol, makanan berlemak dan gorengan 1-2 hari sebelum penelitian.
    4. Jangan sampai pada analisis pada hari setelah hari libur.
    5. Merokok dilarang setidaknya satu jam sebelum biomaterial.
    6. Sebelum mengambil darah, Anda harus duduk selama 10-15 menit dengan tenang untuk merilekskan tubuh, untuk menghilangkan dampak pada hasil stres, baik fisik maupun psikologis.
    7. Jika Anda mengonsumsi obat-obatan atau obat semacam itu, analisis dapat diambil 10-14 hari setelah dosis terakhir mereka. (Fakta ini harus dilaporkan ke dokter, mungkin dia akan membuat kondisi yang berbeda).
    8. Biomaterial tidak langsung hilang setelah melakukan pemeriksaan dubur, X-ray, fisioterapi.
    9. Analisis awal dan berulang paling baik diambil di laboratorium yang sama (lembaga medis), sehingga mereka dapat menggunakan berbagai institusi untuk reagen, peralatan, unit pengukuran dan akurasi yang berbeda.

    Hasil dekode

    Tergantung pada tingkat konsentrasi virus dalam tubuh, berbagai kesimpulan dibuat mengenai perawatan penyakit.

    Selanjutnya, tentukan efektivitas pengobatan. Jika selama analisis berulang, beban virus kurang dari 8 * 105 IU / ml, maka dapat dikatakan bahwa terapi sedang menuju arah yang benar dan ada keberhasilan dalam perang melawan penyakit.

    Seseorang dapat berbicara tentang tanggapan virologi awal, asalkan keberadaan kuantitatif RNA virus berkurang pada hari ketiga pengobatan. Tetapi probabilitasnya adalah pada tingkat 85%.

    Namun, jika indikator lebih dari 8 * 105 IU / ml, maka dokter harus meninjau rejimen pengobatan dan memilih yang lebih sesuai. Dengan demikian, semakin tinggi levelnya, semakin kuat virus menyerang tubuh dan semakin buruk prognosisnya.

    Dalam hal ini, hasil di laboratorium yang berbeda dapat diindikasikan dalam IU / ml atau dalam salinan per ml. Faktor konversi berbeda (berkisar dari sekitar 1 hingga 5) dan tergantung pada metode yang digunakan untuk menentukan indikator kuantitatif. Secara umum diterima dalam praktek bahwa 1 IU / ml = 4 salinan per ml.

    Apakah ada kesalahan?

    Sayangnya, diagnosisnya mungkin keliru. Tetapi ini hanya jika fasilitas medis menggunakan peralatan yang sudah ketinggalan jaman, reagen yang tidak sesuai, kemudian ada proporsi tertentu dari hasil yang salah.

    Faktor-faktor tersebut juga dapat memengaruhi:

    • kehadiran heparin atau inhibitor dalam darah;
    • kontaminasi biomaterial selama penelitian.

    Dengan persiapan yang tepat untuk analisis di pusat perawatan modern, probabilitas ini mendekati nol.

    Siapa yang harus dihubungi dan berapa biayanya

    Jika Anda curiga terhadap hepatitis, Anda harus menghubungi seorang virologist, spesialis penyakit menular atau ahli hepatologi. Jika perlu, mereka akan mengirim Anda ke dokter lain.

    Harga studi semacam itu mungkin berbeda. Selain itu, itu tergantung pada markup dari pusat diagnostik itu sendiri, dan pada kompleksitas pekerjaan, peralatan, dll.

    Di laboratorium modern, Anda dapat menavigasi ke 2900-3000 rubel (1350-1400 UAH) tanpa biaya mengambil darah dari pembuluh darah. Ada klinik yang menawarkan untuk melakukan analisis 300 rubel (sekitar 140 USD).

    Perkiraan bentuk hasil analisis terlihat seperti ini.

    Kesimpulan

    Untuk meringkas artikel, sorot poin-poin utama:

    1. Analisis kuantitatif hepatitis C disebut tes darah untuk kehadiran sel-sel virus, yang menunjukkan bebannya.
    2. Indikator diukur dalam satuan per mililiter atau 1 sentimeter kubik darah.
    3. Analisis dilakukan seperti dalam diagnosis awal, dan selanjutnya untuk menentukan efektivitas terapi yang dipilih atau deteksi kambuh.
    4. Ini tidak memungkinkan untuk berbicara tentang tingkat kesehatan hati, gangguan akibat infeksi dengan hepatitis C.
    5. Sebagian besar donor darah terjadi di pagi hari, biomaterial diambil dari pembuluh darah.
    6. Tidak dianjurkan untuk merokok, minum alkohol, makanan berlemak atau digoreng sebelum mengikuti tes. Pada saat yang sama, kepatuhan dengan aturan persiapan untuk penelitian yang ditunjukkan dalam artikel itu disambut baik.
    7. Jika analisis menunjukkan bahwa beban virus dalam plasma darah lebih dari 600 IU / ml, maka infeksi dan perkembangan hepatitis C dalam tubuh telah terjadi.
    8. Dalam kasus ketika analisis berulang menunjukkan beban lebih dari 8 * 105 IU / ml, dokter harus meninjau skema dan metode pengobatan. Ini menunjukkan kurangnya efektivitas terapi yang dipilih.
    9. Probabilitas kesalahan dalam studi kuantitatif sangat kecil. Namun, kontaminasi biomaterial, kehadiran inhibitor atau heparin di dalamnya adalah mungkin, yang akan membuat analisis itu salah.
    10. Ambang batas bawah biaya prosedur adalah 300 rubel (tanpa harga pengambilan sampel darah) dan tumbuh tergantung pada reagen yang digunakan, peralatan di laboratorium dan faktor lainnya.

    350СВ, Penentuan kuantitatif RNA virus hepatitis C oleh PCR [viral load] (Viral load HCV, RNA Virus Hepatitis C (tes kuantitatif)) dalam serum

    Penentuan RNA virus hepatitis C dalam serum dengan metode polymerase chain reaction (PCR) dengan deteksi dalam "real time".

    fragmen terdeteksi - situs spesifik RNA virus hepatitis C; Kekhususan tekadnya adalah 100%. Sensitivitas pendeteksian - 60 IU / ml Linear range: 10 ^ 2 - 1x10 ^ 8 IU / ml.

    • Tes kualitatif positif untuk keberadaan RNA virus hepatitis C dalam serum.
    • Penentuan viral load.
    • Menentukan taktik mengobati pasien.
    • Penilaian yang akurat tentang efektivitas pengobatan.

    Interpretasi hasil penelitian mengandung informasi untuk dokter yang hadir dan bukan diagnosis. Informasi dalam bagian ini tidak dapat digunakan untuk diagnosis diri dan perawatan diri. Diagnosis yang akurat dibuat oleh dokter, menggunakan kedua hasil pemeriksaan ini dan informasi yang diperlukan dari sumber lain: anamnesis, hasil pemeriksaan lain, dll.

    Satuan ukuran: jumlah RNA virus hepatitis C, dinyatakan dalam IU / ml. Untuk konversi ke salinan / ml, rasio 1 IU = 2,5 salinan RNA virus hepatitis C harus digunakan.

    • Informasi umum
    • Contoh hasil

    * Periode yang ditentukan tidak termasuk hari pengambilan biomaterial

    Deteksi PCR real-time.

    contoh hasil pada formulir *

    * Kami menarik perhatian Anda pada fakta bahwa ketika memesan beberapa studi, beberapa hasil penelitian dapat direfleksikan pada satu bentuk.

    Di bagian ini, Anda dapat mengetahui berapa biaya untuk menyelesaikan studi ini di kota Anda, lihat uraian pengujian dan tabel interpretasi hasil. Memilih tempat untuk lulus analisis "Penentuan kuantitatif RNA virus hepatitis C oleh PCR [viral load] (Viral load HCV, RNA Virus hepatitis C (tes kuantitatif)) dalam serum darah" di Moskow dan kota-kota Rusia lainnya, jangan lupa bahwa harga analisis, Biaya prosedur biomaterial, metode dan waktu penelitian di kantor medis regional dapat bervariasi.

    Medinfo.club

    Portal tentang hati

    Analisis Kuantitatif dan Decoding HCV

    Hepatitis C adalah penyakit yang dapat berkembang biak di sel-sel hati yang sehat dan memprovokasi munculnya penyakit-penyakit proliferatif. Di dunia modern, ketika virus hepatitis telah melewati mutasi tertentu, sistem kekebalan manusia berada di bawah ancaman, karena dibandingkan dengan infeksi, itu dapat diabaikan. Juga perlu dicatat bahwa tidak semua pasien akan mengalami tanda-tanda pertama penyakit, terutama pada tahap awal.

    Analisis RNA virus hepatitis C adalah studi kuantitatif, yang normalnya terletak pada jumlah moderat dari kehadiran sel-sel virus dalam darah pasien. Menurut statistik, sekitar 31% pasien benar-benar sembuh dari penyakit ini, jika berada pada tahap awal.

    Dalam praktek medis, dokter mencatat bahwa 4 juta gejala yang terinfeksi dan tanda-tanda pertama tidak muncul sama sekali, meskipun bentuk hepatitis yang terabaikan dapat menyebabkan sirosis hati atau kanker.

    Saat ini, selama prosedur “transfusi darah”, darah ini diperiksa untuk keberadaan virus hepatitis C, karena penyakit ini ditularkan melalui darah donor.

    Saat ini, obat untuk hepatitis C telah muncul di dunia dengan efisiensi mendekati 100% Industri farmasi modern telah menciptakan obat yang hampir tidak memiliki efek samping. Banyak pasien mendapatkan hasil pertama berupa meringankan gejala dan mengurangi viral load setelah seminggu asupan. Baca lebih lanjut tentang obat untuk hepatitis dari produksi India, baca artikel kami yang terpisah.

    Sofosbuvir Express telah membuktikan dirinya di pasar untuk transportasi obat-obatan Hepatitis C India. Perusahaan ini berhasil membantu orang untuk pulih dari penyakit selama lebih dari 2 tahun. Ulasan dan video pasien yang puas dapat Anda lihat di sini. Di akun mereka lebih dari 4.000 orang yang sembuh berkat obat yang dibeli. Jangan menunda kesehatan Anda, buka www.sofosbuvir-express.com atau hubungi 8-800-200-59-21

    Jenis studi PCR

    PCR (polymerase chain reaction) adalah metode paling modern dan efektif untuk mempelajari gen virus dan kemampuannya. Diagnostik semacam itu dapat membentuk suatu jenis penyakit dan menentukan mutasinya lebih lanjut di dalam tubuh pasien.

    Analisis dilakukan dengan mengambil darah, yang kemudian ditempatkan dalam reagen khusus di mana kloning sel terjadi.

    Dari satu sel ternyata dua, dan seterusnya. Akibatnya, ada ratusan DNA, di mana Anda dapat mendiagnosa patogen dan mengidentifikasi virus pada tahap awal.

    Oleh karena itu, PCR dibagi menjadi beberapa jenis:

    • analisis kualitatif - mengenali infeksi gen dalam darah. Jika selama analisis kualitatif pasien penyakit dikonfirmasi, maka analisis kuantitatif harus dilakukan untuk menetapkan tingkat infeksi. Sebagai hasil dari diagnosis ini, para ahli menulis "terdeteksi / tidak terdeteksi". "Terdeteksi" - mengatakan bahwa penyakit itu ada di dalam tubuh dan RNAnya telah diidentifikasi. "Tidak terdeteksi" - menunjukkan tidak adanya gen virus dalam sampel, yaitu, tidak ada RNA hepatitis. Tetapi dokter menyarankan tes ulang setelah 10 hari.
    • analisis kuantitatif - menentukan jumlah materi genetik infeksi dalam darah. Diagnosis semacam itu membantu untuk menentukan tingkat keparahan penyakit dan seluruh riwayat klinis. Sebagai hasil dari analisis semacam itu, hanya "Positif / Negatif / Tidak Valid" yang dapat ditulis. "Positif" - mewakili beban infeksi. Dokter meresepkan metode ini untuk mendiagnosis penyakit untuk menentukan efektivitas pengobatan pada 4, 12, 16, dan 24 minggu penyakit Jika indikator virus dalam kisaran 8x10 IU / ml, pengobatan efektif, jika tarif lebih tinggi, maka tidak ada. "Negatif" - gen infeksi tidak terdeteksi. "Tidak valid" - ini terjadi jika gen virus terdeteksi secara kualitatif, tetapi tidak terungkap dalam analisis kuantitatif. Ada yang serupa, asalkan volume infeksi di bawah level.

    Perbedaan dalam analisis kualitatif dan kuantitatif

    Virus hepatitis C didiagnosis terutama dengan melakukan analisis kuantitatif, yang diperlukan untuk interpretasi yang benar dari penyakit. Namun meskipun demikian, metode diagnostik kualitatif dan kuantitatif memiliki perbedaan, misalnya: peran dan tugas yang ditugaskan untuk penelitian - kualitatif - menegaskan adanya infeksi setelah antibodi yang terdeteksi dari virus, dan kuantitatif - metode sekunder yang menyangkal atau menegaskan penyakit untuk membuat diagnosis yang benar dan hanya.

    Interpretasi penelitian kuantitatif

    Setelah diagnosis, hanya dokter yang dapat menginterpretasikan hasilnya, karena seharusnya tidak ditampilkan dalam angka, tetapi dalam kata-kata. Menurut statistik, PCR kuantitatif adalah tes yang paling sensitif. Untuk memahami apakah virus hadir di tubuh, perlu untuk memahami dan mengetahui bahwa analisis kuantitatif hepatitis C ditafsirkan menggunakan penunjukan digital (standar) infeksi:

    Penggunaan diagnostik PCR

    Polymerase chain reaction (PCR) dalam biologi molekuler adalah metode eksperimental untuk mendeteksi virus. Hal ini memungkinkan Anda untuk secara signifikan meningkatkan konsentrasi fragmen asam nukleat tertentu (DNA) dalam sampel bahan biologis, yang memungkinkan untuk menentukannya (mengenali) dan menghitung.

    Analisis dilakukan sebagai berikut. Materi genetik (sampel darah), yang berpotensi mencakup gen yang diinginkan, dimasukkan ke dalam tabung. Ada juga primer yang ditempatkan - segmen yang disintesis secara kimiawi dengan panjang kecil gen yang diinginkan.

    DNA atau RNA polimerase juga ditambahkan ke bejana, ia mampu membentuk rantai asam nukleat yang benar-benar identik dengan yang asli. Komposisi yang dihasilkan disuntikkan dan satu set dari empat nukleotida bebas - bahan bangunan khusus untuk RNA atau DNA, salah satunya mengandung partikel fosfor radioaktif.

    Campuran yang dihasilkan dipanaskan hingga 95-96 ° C, itulah sebabnya mengapa dua heliks DNA, yang biasanya terjalin, ditenun. Kemudian obat didinginkan, di mana primer itu sendiri menempel pada wilayah yang diinginkan dari genom virus, mencegah RNA (atau DNA) membentuk heliks ganda lagi.

    Dalam proses pendinginan, polimerase mencari rantai nukleotida bebas. Untuk berfungsinya enzim ini diperlukan satu rantai nukleotida. Karena polimerase tergelincir di sepanjang rantai DNA (seperti cincin pada tali), ia tidak dapat bekerja pada heliks ganda.

    Setelah ini, siklus pemanasan berulang dilakukan, karena rantai nukleotida yang dipisahkan. Pada masing-masing siklus PCR ini, jumlah sampel gen hepatitis yang diinginkan meningkat secara eksponensial, dan sisa materi genetik dihasilkan (tumbuh) secara linier.

    Setelah pemurnian larutan dari residu nukleotida dan pemisahan dengan elektroforesis rantai DNA dengan parameter berat molekul, seseorang dapat dengan mudah menentukan apakah ada gen yang diinginkan dalam sampel yang diteliti atau tidak.

    Manfaat PCR

    Pengujian laboratorium menggunakan PCR memungkinkan lebih banyak informasi yang bisa diperoleh daripada kehadiran RNA virus. Dengan menentukan parameter tingkat radiasi radioaktif, adalah mungkin untuk mengidentifikasi berapa banyak materi genetik yang awalnya terkandung dalam sampel yang diteliti. Dalam kasus hepatitis, tentukan indikator tingkat viral load.

    Keuntungan lain dari metode ini adalah tingkat sensitivitas reaksi CR yang sangat tinggi. Ini jauh lebih tinggi daripada metode klasik mendeteksi virus. Idealnya, untuk mengidentifikasi gen yang diinginkan, untuk PCR, hanya satu virus dalam sampel yang cukup.

    Selain itu, PCR benar-benar spesifik. Primer-nya dirancang sedemikian rupa sehingga sepenuhnya sesuai dengan wilayah unik dari gen yang diinginkan yang tidak dimiliki urutan lain. Seperti sidik jari yang unik, ada urutan nukleotida unik di setiap gen.

    Analisis kualitatif PCR

    Analisis kualitatif memungkinkan Anda mengidentifikasi hanya keberadaan virus dalam darah. Tes ini harus dilakukan untuk semua pasien yang antibodi terhadap hepatitis C ditemukan dalam darah, hanya dapat menghasilkan satu dari dua nilai: "terdeteksi" atau "tidak terdeteksi." Pada orang yang sehat, norma (nilai referensi) harus "tidak terdeteksi".

    Ada interpretasi khusus dari hasil riset kualitatif semacam itu:

    • Hasilnya adalah "terdeteksi." Ini berarti bahwa fragmen RNA yang spesifik untuk virus hepatitis C ditemukan dalam sampel yang dianalisis dari bahan biologis yang diambil. Akibatnya, ada fakta bahwa pasien terinfeksi dengan virus hepatitis C. Jika hasil PCR berkualitas tinggi "terdeteksi", ini menunjukkan bahwa virus mengalikan dan saat ini menginfeksi sel-sel hati baru di tubuh.
    • Hasilnya adalah "tidak terdeteksi." Seperti putusan menunjukkan bahwa dalam sampel yang dianalisis dari bahan biologis yang diperoleh di laboratorium ini, tidak ada fragmen RNA yang ditemukan yang spesifik untuk virus hepatitis C. Sebagai alternatif, konsentrasi RNA infeksi patogen dalam sampel ini berada di bawah batas sensitivitas tes.

    Pada fase akut RNA virus hepatitis C, penelitian kualitatif dengan metode PCR dapat dideteksi setelah 1-2 minggu segera setelah infeksi tubuh, yaitu jauh sebelum munculnya antibodi terhadap hepatitis itu sendiri.

    Hasil tes yang tidak akurat dari penelitian ini dapat diperoleh dengan:

    • biomaterial yang terkontaminasi;
    • kehadiran heparin dalam darah pasien;
    • kehadiran dalam sampel zat kimia atau protein (inhibitor) yang mempengaruhi berbagai komponen PCR.

    Untuk melakukan analisis kualitatif PCR, tidak diperlukan persiapan khusus dari pasien untuk penelitian. Darah vena digunakan sebagai bahan.

    Evaluasi hasil

    Tes PCR berkualitas tinggi memiliki tingkat kepekaan tertentu, dan tergantung pada keakuratan penelitian dan tingkat peralatan di laboratorium dapat bervariasi dari 10 hingga 500 IU / ml.

    Ini berarti bahwa jika virus dalam sampel darah hadir dalam konsentrasi yang sangat rendah (kurang dari nilai ambang sensitivitas dari laboratorium ini), maka hasilnya dapat ditentukan sebagai "tidak terdeteksi" pada pasien pasien. Karena itu, ketika melakukan analisis kualitatif PCR dengan tingkat viremia rendah (konsentrasi virus rendah), misalnya, untuk pasien yang menjalani terapi antivirus, sangat penting untuk mengetahui ambang sensitivitas sistem diagnostik ini.

    Varian sistem diagnostik

    Untuk mengontrol tanggapan virologi, disarankan untuk menggunakan sistem diagnostik dengan ambang batas sensitivitas paling sedikit 50 IU / ml untuk pengobatan antiviral. Kriteria ini dipenuhi, misalnya, dengan alat tes Cobas Ampicolor HCV-Test (akurat hingga 50 IU / ml), serta RNA HCV RealBest (dengan sensitivitas 15 IU / ml).

    Menurut rekomendasi WHO, untuk menetapkan diagnosis definitif hepatitis C, penting untuk hanya berdasarkan tiga kali deteksi RNA virus C dalam sampel serum pasien, dengan tidak adanya varietas penanda hepatitis lainnya.

    Selain metode PCR, tes TMA (metode amplifikasi transkripsi) juga digunakan untuk mendeteksi RNA HCV pada pasien. Ini memiliki ambang batas sensitivitas terbaik (5-10 IU / ml), tetapi di negara kita metode pengujian seperti ini belum umum.

    Rentang modifikasi virus yang terdeteksi

    Penentuan kualitatif seperti dalam serum kehadiran RNA dari virus hepatitis C memungkinkan untuk menentukan beberapa genotipe dari virus ini. Saat ini, sains mengetahui lebih dari enam genotipe virus ini, serta sekitar 10 subtipe penyakit ini.

    Di negara kita, virus umum 1, 2, 3 genotipe. Laboratorium dapat mendeteksi genotipe berikut: 1a dan 1b, 2a, 2b dan 2c, serta 3, 4, 5a dan 6, terlepas dari subtipe. Untuk semua modifikasi virus, spesifisitas deteksi adalah 100%.

    Analisis Kuantitatif PCR

    Dengan bantuan tes PCR kuantitatif, tingkat konsentrasi virus hepatitis dalam sampel darah (viral load) ditentukan. Tes ini untuk viremia (konsentrasi virus) memungkinkan Anda untuk menentukan jumlah unit bahan genetik tertentu (RNA virus paling banyak), yang terdeteksi dalam jumlah tertentu. Dalam hal ini, tentukan konsentrasinya dalam 1 ml, yang sesuai dengan 1 cu. lihat

    Parameter kuantitatif analisis dinyatakan dalam angka, untuk tujuan ini satuan internasional (IU) per mililiter (ml), disebut sebagai IU / ml, digunakan sebagai unit pengukuran. Sekarang di beberapa laboratorium, jumlah virus dapat ditentukan dalam unit lain: jumlah salinan per ml ditunjukkan sebagai salinan / ml.

    • Kurma Untuk hepatitis C, analisis kuantitatif PCR dilakukan segera sebelum dimulainya terapi. Kemudian pada tanggal 1, 4, 12 dan 24 minggu. Evaluasi pada minggu ke 12 adalah indikasi, ini memungkinkan untuk menentukan efektivitas terapi.
    • Persiapan untuk analisis. Untuk melakukan analisis kuantitatif PCR, tidak diperlukan persiapan khusus dari pasien untuk penelitian. Setengah jam sebelum pengambilan sampel tidak boleh merokok. Darah vena digunakan sebagai bahan laboratorium.

    Evaluasi hasil

    Untuk sistem uji laboratorium yang berbeda, ada faktor konversi yang berbeda untuk indikator ini dalam IU / ml. Rata-rata, mereka mengambil parameter konversi, di mana 4 salinan / ml = 1 IU / ml. Artinya, misalnya, jika laboratorium memberikan hasil analisis PCR 2.4 * 10 6 salinan / ml, maka parameter ini harus dibagi menjadi 4 dan kita akan mendapatkan 6 * 10 5 IU / ml.

    Beban 800.000 IU / ml dianggap tinggi, yang kira-kira setara dengan 3.000.000 eksemplar / ml. Viremia rendah, menurut beberapa penulis, sesuai dengan parameter PCR kuantitatif di bawah 400.000 IU / ml.

    Sebagai hasil dari tes kuantitatif, hasil akhir dapat dikirimkan tidak dalam bentuk nilai digital, tetapi: "di bawah rentang pengukuran", atau "tidak terdeteksi".

    • Penilaian: "di bawah rentang pengukuran." Ini menunjukkan bahwa tes kuantitatif tidak dapat mendeteksi RNA virus hepatitis C, tetapi virus itu sendiri ada di dalam tubuh dalam konsentrasi yang sangat rendah. Ini dibuktikan dengan tes kualitatif tambahan, mengkonfirmasi fakta keberadaan virus.
    • Rating: tidak terdeteksi. Hasil ini menunjukkan bahwa tes kuantitatif tidak ditemukan dalam sampel RNA virus.

    Parameter viral load, pertama-tama, menentukan tingkat penularan penyakit, tingkat "infeksi" pasien. Semakin tinggi konsentrasi virus pasien, semakin besar kemungkinan diteruskan ke orang lain. Misalnya, saat berhubungan seksual dengan orang yang sakit, atau secara vertikal. Indikator kuantitatif ini juga membantu menentukan efektivitas perawatan pasien.

    Melakukan analisis kuantitatif CCP penting untuk terapi antiviral, menilai keberhasilannya dan merencanakan durasi pelatihan. Dengan demikian, dengan respons tubuh yang cepat terhadap pengobatan dan tingkat viremia yang rendah, durasi terapi dapat dipersingkat.

    Jika parameter PCR kuantitatif secara perlahan dikurangi, terapi antiviral harus diperpanjang atau dimodifikasi. Jika tingkat viral load rendah, maka ini adalah faktor yang menguntungkan untuk terapi, tetapi jika meningkat, maka metode pengobatan yang digunakan tidak efektif dan obat atau metode penggunaannya harus diubah.


    Artikel Terkait Hepatitis