Penggunaan diagnostik PCR

Share Tweet Pin it

Polymerase chain reaction (PCR) dalam biologi molekuler adalah metode eksperimental untuk mendeteksi virus. Hal ini memungkinkan Anda untuk secara signifikan meningkatkan konsentrasi fragmen asam nukleat tertentu (DNA) dalam sampel bahan biologis, yang memungkinkan untuk menentukannya (mengenali) dan menghitung.

Analisis dilakukan sebagai berikut. Materi genetik (sampel darah), yang berpotensi mencakup gen yang diinginkan, dimasukkan ke dalam tabung. Ada juga primer yang ditempatkan - segmen yang disintesis secara kimiawi dengan panjang kecil gen yang diinginkan.

DNA atau RNA polimerase juga ditambahkan ke bejana, ia mampu membentuk rantai asam nukleat yang benar-benar identik dengan yang asli. Komposisi yang dihasilkan disuntikkan dan satu set dari empat nukleotida bebas - bahan bangunan khusus untuk RNA atau DNA, salah satunya mengandung partikel fosfor radioaktif.

Campuran yang dihasilkan dipanaskan hingga 95-96 ° C, itulah sebabnya mengapa dua heliks DNA, yang biasanya terjalin, ditenun. Kemudian obat didinginkan, di mana primer itu sendiri menempel pada wilayah yang diinginkan dari genom virus, mencegah RNA (atau DNA) membentuk heliks ganda lagi.

Dalam proses pendinginan, polimerase mencari rantai nukleotida bebas. Untuk berfungsinya enzim ini diperlukan satu rantai nukleotida. Karena polimerase tergelincir di sepanjang rantai DNA (seperti cincin pada tali), ia tidak dapat bekerja pada heliks ganda.

Setelah ini, siklus pemanasan berulang dilakukan, karena rantai nukleotida yang dipisahkan. Pada masing-masing siklus PCR ini, jumlah sampel gen hepatitis yang diinginkan meningkat secara eksponensial, dan sisa materi genetik dihasilkan (tumbuh) secara linier.

Setelah pemurnian larutan dari residu nukleotida dan pemisahan dengan elektroforesis rantai DNA dengan parameter berat molekul, seseorang dapat dengan mudah menentukan apakah ada gen yang diinginkan dalam sampel yang diteliti atau tidak.

Manfaat PCR

Pengujian laboratorium menggunakan PCR memungkinkan lebih banyak informasi yang bisa diperoleh daripada kehadiran RNA virus. Dengan menentukan parameter tingkat radiasi radioaktif, adalah mungkin untuk mengidentifikasi berapa banyak materi genetik yang awalnya terkandung dalam sampel yang diteliti. Dalam kasus hepatitis, tentukan indikator tingkat viral load.

Keuntungan lain dari metode ini adalah tingkat sensitivitas reaksi CR yang sangat tinggi. Ini jauh lebih tinggi daripada metode klasik mendeteksi virus. Idealnya, untuk mengidentifikasi gen yang diinginkan, untuk PCR, hanya satu virus dalam sampel yang cukup.

Selain itu, PCR benar-benar spesifik. Primer-nya dirancang sedemikian rupa sehingga sepenuhnya sesuai dengan wilayah unik dari gen yang diinginkan yang tidak dimiliki urutan lain. Seperti sidik jari yang unik, ada urutan nukleotida unik di setiap gen.

Analisis kualitatif PCR

Analisis kualitatif memungkinkan Anda mengidentifikasi hanya keberadaan virus dalam darah. Tes ini harus dilakukan untuk semua pasien yang antibodi terhadap hepatitis C ditemukan dalam darah, hanya dapat menghasilkan satu dari dua nilai: "terdeteksi" atau "tidak terdeteksi." Pada orang yang sehat, norma (nilai referensi) harus "tidak terdeteksi".

Ada interpretasi khusus dari hasil riset kualitatif semacam itu:

  • Hasilnya adalah "terdeteksi." Ini berarti bahwa fragmen RNA yang spesifik untuk virus hepatitis C ditemukan dalam sampel yang dianalisis dari bahan biologis yang diambil. Akibatnya, ada fakta bahwa pasien terinfeksi dengan virus hepatitis C. Jika hasil PCR berkualitas tinggi "terdeteksi", ini menunjukkan bahwa virus mengalikan dan saat ini menginfeksi sel-sel hati baru di tubuh.
  • Hasilnya adalah "tidak terdeteksi." Seperti putusan menunjukkan bahwa dalam sampel yang dianalisis dari bahan biologis yang diperoleh di laboratorium ini, tidak ada fragmen RNA yang ditemukan yang spesifik untuk virus hepatitis C. Sebagai alternatif, konsentrasi RNA infeksi patogen dalam sampel ini berada di bawah batas sensitivitas tes.

Pada fase akut RNA virus hepatitis C, penelitian kualitatif dengan metode PCR dapat dideteksi setelah 1-2 minggu segera setelah infeksi tubuh, yaitu jauh sebelum munculnya antibodi terhadap hepatitis itu sendiri.

Hasil tes yang tidak akurat dari penelitian ini dapat diperoleh dengan:

  • biomaterial yang terkontaminasi;
  • kehadiran heparin dalam darah pasien;
  • kehadiran dalam sampel zat kimia atau protein (inhibitor) yang mempengaruhi berbagai komponen PCR.

Untuk melakukan analisis kualitatif PCR, tidak diperlukan persiapan khusus dari pasien untuk penelitian. Darah vena digunakan sebagai bahan.

Evaluasi hasil

Tes PCR berkualitas tinggi memiliki tingkat kepekaan tertentu, dan tergantung pada keakuratan penelitian dan tingkat peralatan di laboratorium dapat bervariasi dari 10 hingga 500 IU / ml.

Ini berarti bahwa jika virus dalam sampel darah hadir dalam konsentrasi yang sangat rendah (kurang dari nilai ambang sensitivitas dari laboratorium ini), maka hasilnya dapat ditentukan sebagai "tidak terdeteksi" pada pasien pasien. Karena itu, ketika melakukan analisis kualitatif PCR dengan tingkat viremia rendah (konsentrasi virus rendah), misalnya, untuk pasien yang menjalani terapi antivirus, sangat penting untuk mengetahui ambang sensitivitas sistem diagnostik ini.

Varian sistem diagnostik

Untuk mengontrol tanggapan virologi, disarankan untuk menggunakan sistem diagnostik dengan ambang batas sensitivitas paling sedikit 50 IU / ml untuk pengobatan antiviral. Kriteria ini dipenuhi, misalnya, dengan alat tes Cobas Ampicolor HCV-Test (akurat hingga 50 IU / ml), serta RNA HCV RealBest (dengan sensitivitas 15 IU / ml).

Menurut rekomendasi WHO, untuk menetapkan diagnosis definitif hepatitis C, penting untuk hanya berdasarkan tiga kali deteksi RNA virus C dalam sampel serum pasien, dengan tidak adanya varietas penanda hepatitis lainnya.

Selain metode PCR, tes TMA (metode amplifikasi transkripsi) juga digunakan untuk mendeteksi RNA HCV pada pasien. Ini memiliki ambang batas sensitivitas terbaik (5-10 IU / ml), tetapi di negara kita metode pengujian seperti ini belum umum.

Rentang modifikasi virus yang terdeteksi

Penentuan kualitatif seperti dalam serum kehadiran RNA dari virus hepatitis C memungkinkan untuk menentukan beberapa genotipe dari virus ini. Saat ini, sains mengetahui lebih dari enam genotipe virus ini, serta sekitar 10 subtipe penyakit ini.

Di negara kita, virus umum 1, 2, 3 genotipe. Laboratorium dapat mendeteksi genotipe berikut: 1a dan 1b, 2a, 2b dan 2c, serta 3, 4, 5a dan 6, terlepas dari subtipe. Untuk semua modifikasi virus, spesifisitas deteksi adalah 100%.

Analisis Kuantitatif PCR

Dengan bantuan tes PCR kuantitatif, tingkat konsentrasi virus hepatitis dalam sampel darah (viral load) ditentukan. Tes ini untuk viremia (konsentrasi virus) memungkinkan Anda untuk menentukan jumlah unit bahan genetik tertentu (RNA virus paling banyak), yang terdeteksi dalam jumlah tertentu. Dalam hal ini, tentukan konsentrasinya dalam 1 ml, yang sesuai dengan 1 cu. lihat

Parameter kuantitatif analisis dinyatakan dalam angka, untuk tujuan ini satuan internasional (IU) per mililiter (ml), disebut sebagai IU / ml, digunakan sebagai unit pengukuran. Sekarang di beberapa laboratorium, jumlah virus dapat ditentukan dalam unit lain: jumlah salinan per ml ditunjukkan sebagai salinan / ml.

  • Kurma Untuk hepatitis C, analisis kuantitatif PCR dilakukan segera sebelum dimulainya terapi. Kemudian pada tanggal 1, 4, 12 dan 24 minggu. Evaluasi pada minggu ke 12 adalah indikasi, ini memungkinkan untuk menentukan efektivitas terapi.
  • Persiapan untuk analisis. Untuk melakukan analisis kuantitatif PCR, tidak diperlukan persiapan khusus dari pasien untuk penelitian. Setengah jam sebelum pengambilan sampel tidak boleh merokok. Darah vena digunakan sebagai bahan laboratorium.

Evaluasi hasil

Untuk sistem uji laboratorium yang berbeda, ada faktor konversi yang berbeda untuk indikator ini dalam IU / ml. Rata-rata, mereka mengambil parameter konversi, di mana 4 salinan / ml = 1 IU / ml. Artinya, misalnya, jika laboratorium memberikan hasil analisis PCR 2.4 * 10 6 salinan / ml, maka parameter ini harus dibagi menjadi 4 dan kita akan mendapatkan 6 * 10 5 IU / ml.

Beban 800.000 IU / ml dianggap tinggi, yang kira-kira setara dengan 3.000.000 eksemplar / ml. Viremia rendah, menurut beberapa penulis, sesuai dengan parameter PCR kuantitatif di bawah 400.000 IU / ml.

Sebagai hasil dari tes kuantitatif, hasil akhir dapat dikirimkan tidak dalam bentuk nilai digital, tetapi: "di bawah rentang pengukuran", atau "tidak terdeteksi".

  • Penilaian: "di bawah rentang pengukuran." Ini menunjukkan bahwa tes kuantitatif tidak dapat mendeteksi RNA virus hepatitis C, tetapi virus itu sendiri ada di dalam tubuh dalam konsentrasi yang sangat rendah. Ini dibuktikan dengan tes kualitatif tambahan, mengkonfirmasi fakta keberadaan virus.
  • Rating: tidak terdeteksi. Hasil ini menunjukkan bahwa tes kuantitatif tidak ditemukan dalam sampel RNA virus.

Parameter viral load, pertama-tama, menentukan tingkat penularan penyakit, tingkat "infeksi" pasien. Semakin tinggi konsentrasi virus pasien, semakin besar kemungkinan diteruskan ke orang lain. Misalnya, saat berhubungan seksual dengan orang yang sakit, atau secara vertikal. Indikator kuantitatif ini juga membantu menentukan efektivitas perawatan pasien.

Melakukan analisis kuantitatif CCP penting untuk terapi antiviral, menilai keberhasilannya dan merencanakan durasi pelatihan. Dengan demikian, dengan respons tubuh yang cepat terhadap pengobatan dan tingkat viremia yang rendah, durasi terapi dapat dipersingkat.

Jika parameter PCR kuantitatif secara perlahan dikurangi, terapi antiviral harus diperpanjang atau dimodifikasi. Jika tingkat viral load rendah, maka ini adalah faktor yang menguntungkan untuk terapi, tetapi jika meningkat, maka metode pengobatan yang digunakan tidak efektif dan obat atau metode penggunaannya harus diubah.

Analisis kualitatif untuk hepatitis C

Tinggalkan komentar 7.180

Analisis kualitatif dari reaksi rantai polimerase - PCR untuk hepatitis C menentukan ada atau tidaknya HCV dalam tubuh. Dalam kondisi laboratorium, struktur RNA dipelajari, yang akan mencakup virus. Dalam kasus deteksi virus C, perlu untuk menjalani pengobatan, karena keadaan hati yang terabaikan akan mengakibatkan konsekuensi serius. PCR berkualitas tinggi juga dilakukan setelah pemulihan untuk memastikan tidak adanya antibodi. Ditugaskan untuk pemeriksaan rutin. Dengan konsentrasi agen penyebab yang rendah dalam darah, PCR (kualitatif) mungkin tidak mendeteksi apa pun, karena sistem diagnostik memiliki ambang sensitivitasnya sendiri. Dalam kasus tahap awal penyakit atau bentuk ringan, diagnostik ultra PCR dilakukan pada peralatan ultra-sensitif.

Apa itu virus RNA?

Istilah RNA virus hepatitis C (atau virus hepatitis C) adalah penyakit hati itu sendiri. Virus C berikatan dengan sel tubuh yang sehat dengan menembus ke dalam. Seiring waktu, menyebar ke seluruh tubuh, hanya perlu masuk ke dalam darah. Akibatnya, patogen menembus hati, berfusi dengan sel-selnya dan bekerja keras. Sel-sel hati (hepatocytes) bekerja di bawah pengaruhnya, mengalami perubahan, dan dari sini mereka mati. Semakin lama virus C berada di hati, semakin banyak jumlah sel yang mati. Seiring waktu, kembangkan penyakit berbahaya yang menyebabkan degenerasi dan kematian yang ganas.

Infeksi hati dengan jenis virus ini mungkin tidak memanifestasikan dirinya secara eksternal. Selama bertahun-tahun atau dekade, orang yang terinfeksi merasa benar-benar sehat, dan hanya pemeriksaan acak yang paling sering mengungkapkan patologi. Ketika mendonorkan darah untuk hepatitis, bagian dari rantai RNA (ribonucleic acid), yang merupakan bagian dari gen manusia (DNA), diperiksa. Hasil tes laboratorium tidak boleh digunakan untuk perawatan diri, karena ini hanyalah indikator. Gambaran yang tepat dan diagnosis lebih lanjut lebih baik ditentukan oleh dokter.

Ketika selesai: indikasi untuk penelitian

Dalam konfirmasi HCV, analisis PCR dilakukan (polymerase chain reaction). Studi PCR membantu menemukan bahan patogen dalam struktur RNA dan meresepkan terapi yang efektif. Diangkat dalam kasus-kasus berikut:

  • deteksi tanda-tanda peradangan hati;
  • pemeriksaan penapisan untuk pencegahan;
  • pemeriksaan orang-orang yang berhubungan;
  • diagnosis hepatitis asal campuran (penentuan patogen utama);
  • menentukan tingkat aktivitas reproduksi virus dalam bentuk kronis;
  • sirosis hati;
  • untuk menentukan efektivitas pengobatan yang ditentukan.
Studi PCR diresepkan oleh dokter untuk menentukan efektivitas suatu program pengobatan untuk hepatitis.

Ada analisis kualitatif dan kuantitatif dari PCR. PCR kuantitatif menunjukkan rasio persentase RNA terhadap pembawa virus dalam darah, dan kualitatif menunjukkan adanya atau tidak adanya virus. Indikator positif kualitas (kehadiran RNA Hepatitis C) juga membutuhkan penelitian kuantitatif. Tingkat konsentrasi agen penyebab hepatitis C yang tinggi dikaitkan dengan risiko penularannya, yaitu infeksi orang lain. Jumlah yang rendah lebih bisa diobati. Jumlah virus RNA dalam darah tidak berhubungan dengan intensitas penyakit. Analisis PCR juga dilakukan dalam kasus terapi interferon untuk meresepkan durasi dan kompleksitas pengobatan.

Fitur analisis PCR berkualitas tinggi untuk hepatitis C

Analisis kualitatif dengan indeks reaksi berantai polimerase diberikan kepada semua pasien yang memiliki antibodi terhadap hepatitis C dalam darah mereka.Orang-orang yang telah sakit dan sembuh harus kembali mengambil tes. Disarankan untuk lulus tes untuk hepatitis B, kemudian, dalam kasus kesimpulan positif, dan untuk hepatitis D. Juga, reaksi dianalisis secara kualitatif harus dilakukan bersamaan dengan tes darah lainnya. Analisis akan menunjukkan gambaran lengkap penyebaran virus.

Dari hasil tes, hanya tes positif untuk hepatitis C akan terlihat atau negatif, yaitu ada atau tidaknya virus. Jika output "terdeteksi", maka virus akan terus aktif. Penunjukan "tidak terdeteksi" menunjukkan tidak adanya virus atau jumlah yang kecil. Dengan indikator ini, harus diingat bahwa sensitivitas analitis sistem diagnostik berbeda dan bahwa RNA hepatitis C mungkin masih ada di dalam darah, tetapi tidak dimanifestasikan dalam analisis.

Metode PCR yang sangat sensitif, ultra hepatitis C mengungkapkan bahkan dalam jumlah yang sedikit. Sebuah studi hibridisasi fluoresensi digunakan, yang berkali-kali lebih tinggi dari sistem PCR standar. Metode ini digunakan dalam beberapa kasus:

  • dugaan bentuk-bentuk tersembunyi dari hepatitis C;
  • Diagnostik PCR tidak mengkonfirmasi patogen, tetapi ada antibodi;
  • dalam hal pemulihan;
  • untuk mendeteksi infeksi dini.
Kembali ke daftar isi

Analisis dekode

Dekode HCV PCR mempengaruhi keputusan akhir ketika membuat diagnosis, khususnya, dengan metode ultrametod. Kerugian utama dari penelitian ini adalah ketaatan yang ketat terhadap kondisi steril untuk sampel dan bahan. Sedikit deviasi kadang-kadang menunjukkan kesimpulan analitis yang tidak akurat, mempersulit diagnosis dan pengobatan selanjutnya. Analisis PCR untuk penentuan hepatitis RNA tidak selalu yakin menunjukkan gambaran penyakit, kadang-kadang ketidakakuratan diperbolehkan, dan di kedua arah.

Mendiagnosis virus hepatitis, disarankan untuk menggunakan pemeriksaan yang komprehensif.

Norma indikator

Ketiadaan antibodi JgM terhadap virus hepatitis C dalam hasil penelitian dianggap norma dalam analisis reaksi berantai polimerase. Pada saat yang sama, temuan analisis serologis menunjukkan adanya antibodi terhadap virus C dan ini juga dalam kisaran normal. Definisi kualitatif tidak menunjukkan intensitas penyakit, hanya mengungkapkan agen penyebab hepatitis C di RNA. Analisis ini diulang setelah perawatan untuk mengkonfirmasi pemulihan yang sebenarnya.

Penyimpangan

Jika antibodi JgM untuk HCV RNA hadir, ini menunjukkan infeksi berkembang. Penyakit pada saat yang sama berlangsung secara akut atau kronis, diwujudkan dalam berbagai tahap. Jika penurunan jumlah antibodi dicatat, analisis akan menunjukkan bahwa hasil pengobatan dicapai selama pemulihan. Hanya kasus yang sangat langka dari positif palsu yang ditemukan dalam diagnosis. Mereka ditemukan pada wanita selama kehamilan dan pada orang dengan penyakit menular lainnya.

Decoding analisis PCR untuk hepatitis C

Sebuah penelitian laboratorium khusus - analisis PCR untuk hepatitis C - sangat menyederhanakan diagnosis penyakit virus ini. Hepatitis C tidak terkecuali, sedikit sampel darah dapat diuji untuk kandungan rna dan materi genetik lain dari agen virus. Semua individu dengan antibodi terhadap hepatitis C yang bersirkulasi dalam plasma darah menjadi sasaran analisis dengan PCR, yang keberadaannya mengkonfirmasi deteksi kualitatif.

Interpretasi hasil ditafsirkan dalam kolom bentuk penelitian sebagai analisis "positif" atau "negatif". Selain itu, menggunakan PCR adalah mungkin tidak hanya untuk menentukan konten virus minimum, tetapi juga untuk menghitung jumlah partikel. Dengan demikian, adalah mungkin untuk menentukan perkiraan viral load dan menentukan taktik perawatan medis seakurat mungkin.

Kerusakan hati virus

Hati sebagai unsur saluran pencernaan membutuhkan beban yang sangat besar. Dalam selnya, sebagian besar reaksi metabolisme semua jenis metabolisme terjadi, yang memastikan fungsi optimal semua organ dan sistem. Pada saat yang sama, nilai detoksifikasi sangat bagus untuk menghapus slag dan produk metabolik dengan empedu enzimatik.

Kekalahan hati oleh virus yang berbeda sifat sangat berbahaya bagi tubuh. Gambaran klinis yang beragam dan ketidakpatuhan terhadap pengobatan menyebabkan hepatitis ke tempat pertama dalam hal risiko kesehatan. Hepatitis C kronis dan bisa negatif untuk waktu yang lama, perlahan-lahan parasit dalam tubuh manusia. Virus ini ditularkan melalui cairan biologis: darah dan lebih jarang melalui air mani. Penyalahgunaan obat pada jarum suntik yang tidak steril, pengiriman alami wanita yang terinfeksi, cedera atau luka yang tidak disengaja oleh petugas kesehatan dapat mengakibatkan penularan virus ke orang yang sehat.

Diagnosis tepat waktu dari penyakit ini terhambat oleh gambaran klinis tersembunyi dan patologi yang tidak sistematis. Hasil positif mungkin hanya terlewatkan oleh analisis yang berkinerja buruk. Hanya kerusakan yang signifikan pada sel-sel hati yang menyebabkan gejala tertentu, namun efek negatif dari viremia pada saat itu tidak menyisakan kesempatan untuk memulihkan organ.

Obat modern telah mengembangkan metode khusus untuk mengenali sedikit jejak virus. PCR, IFA, biopsi hati dapat mendeteksi kerusakan terkecil pada hati dan tingkat antibodi minimum terhadap virus. Analisis dengan bantuan PCR adalah praktik diagnostik yang paling sederhana dan paling dapat diandalkan.

Analisis kualitatif

Inti dari reaksi polimerase adalah pembentukan urutan rna. Reaksi dilakukan di hadapan protein virus yang sama dalam plasma darah.

Katalis khusus memungkinkan Anda untuk mensintesis urutan virus yang serupa dari rantai, yang dibandingkan dengan nukleotida RNA virus yang diketahui. Berdasarkan ini, mereka menentukan viral load dan kerusakan hati.

PCR mampu menangkap bahkan satu kehadiran gen yang diinginkan dalam darah yang diambil. Reaksi berantai diagnostik seperti itu juga sangat spesifik. Urutan rantai nukleotida adalah unik untuk setiap makhluk, sehingga primer enzimatik membuat urutan identik dari informasi genetik yang diinginkan. Dengan demikian, setiap virus dapat dideteksi dengan akurasi sekecil apa pun, bahkan jika indikator kuantitatifnya sangat kecil.

Pasien yang darahnya ditemukan antibodi yang dihasilkan terhadap hepatitis virus, melakukan studi kualitatif PCR atau Eph. Hasil analisis bisa positif dan negatif, yang dalam kedua kasus membutuhkan perawatan.

Tanggapan positif dari reaksi berantai harus diuraikan sebagai kehadiran fragmen RNA dari virus hepatitis atau sebagai fenomena infeksi.

Dalam plasma darah pada saat virus secara aktif berkembang biak dan parasit di atas sel-sel hati. Diagnostik PCR dapat memberikan jawaban negatif jika ada beberapa partikel viral RNA yang ada dalam plasma, di bawah tingkat sensitivitas tes, atau tidak sama sekali. Setelah infeksi langsung, jumlah virus tumbuh relatif lambat, dan hanya setelah 1-2 minggu, jika atau penelitian kualitatif lainnya dapat mengisolasi mereka.

Analisis negatif dapat diperoleh dalam kasus-kasus berikut:

  1. Ketika mengambil materi dalam kondisi yang tidak tepat, mendapatkan sampel darah dengan kontaminasi;
  2. Ketika seorang pasien sebelumnya telah menerima suntikan heparin.
  3. Dengan adanya enzim dan substrat lain dalam sampel yang diambil yang mengganggu jalannya reaksi berantai.

Analisis kuantitatif

Tes kuantitatif sebagai diagnosis mikrobiologi dirancang untuk menentukan viral load. Analisis kualitatif yang dikonfirmasi untuk viremia berfungsi sebagai dasar untuk menentukan jumlah materi genetik dan konsentrasinya. Jumlah rna virus yang terdeteksi ditentukan dalam satuan volume darah, biasanya dalam 1 mililiter. Bahan yang dibutuhkan dinyatakan dalam unit internasional, beberapa laboratorium menggunakan jumlah salinan dalam analisis eif.

Biasanya, sebelum ada regimen terapeutik, PCR dianalisis secara kuantitatif. Menghitung viral rna dilakukan cukup sering: setelah satu, empat, dua belas dan dua puluh empat minggu. Minggu ke-12 dianggap indikatif, karena berdasarkan analisis, selama periode ini interpretasi efektivitas tindakan terapeutik dilakukan.

Analisis kuantitatif menggunakan PCR atau IFA melibatkan pengambilan sampel dari vena.

Interpretasi hasil sebagai viral load yang tinggi dimulai dari angka 800.000 IU / ml. Hasil positif untuk hepatitis C mencerminkan keberadaan setidaknya 3.000.000 eksemplar per mililiter darah. Tingkat viremia yang rendah berhenti pada 400.000 IU / ml. Hasil penelitian dapat berupa nilai sebagai respons negatif, serta indikator "di bawah rentang pengukuran."

Tes kuantitatif dengan perkiraan "di bawah rentang pengukuran" mengatakan bahwa selama reaksi itu tidak mungkin untuk menghitung RNA. Virus masih beredar di dalam tubuh, seperti yang ditunjukkan oleh tes kualitatif positif. Indikator negatif dari analisis kuantitatif pcr atau ifa menunjukkan tidak adanya rna dalam sampel darah ini.

Meskipun metode penularan virus melalui darah terbatas, risiko penularan virus melalui sekresi kelenjar seks dari ibu ke anak meningkat.

Analisis kuantitatif memberikan bantuan yang signifikan dalam mengevaluasi intervensi terapeutik. Ifa dan PCR mencerminkan tindakan obat antiviral, membantu menetapkan waktu terapi dan menilai pembentukan kekebalan pasien. Tanggapan negatif awal dari tes laboratorium menunjukkan perawatan yang berhasil dan kebutuhan untuk mengurangi durasi terapi. Penurunan viral load yang lambat dapat diartikan sebagai kebutuhan untuk memodifikasi terapi. Tingkat viral load menentukan prognosis penyakit. Hepatitis dengan tingkat rendah cenderung hanya diobati dan virus dapat sepenuhnya dihapus dari tubuh. Tingginya tingkat kehadiran virus dalam darah membutuhkan perhatian yang seksama dan pengobatan yang serba guna.

Analisis PCR untuk Hepatitis C

Diagnosis hepatitis mencakup berbagai tes untuk menentukan keberadaan virus dalam darah. Salah satu cara untuk mendeteksi penyakit adalah metode penelitian seperti PCR untuk hepatitis C. Apa itu, mengapa analisis PCR untuk hepatitis sama pentingnya dengan dilakukan dan diuraikan?

Apa itu?

Polymerase chain reaction, atau PCR, digunakan untuk mendiagnosis tukak lambung, radang usus, enteritis. Tetapi keunggulan utamanya terletak pada fakta bahwa ia membantu mendeteksi di dalam tubuh baik virus hepatitis C maupun antibodi terhadapnya, yang memiliki kemampuan untuk tidak menyebabkan reaksi sistem kekebalan karena kemampuannya untuk bermutasi.

Penelitian dan esensinya terletak pada penciptaan kondisi tertentu di mana reaksi berantai RNA Hepatitis terjadi. Jika, jika dibandingkan dengan urutan nukleotida dari virus hepatitis C, kebetulan ditemukan, ini menunjukkan bahwa ada partikel virus dalam darah, dan proses disintegrasi terjadi di hati. Jika jumlah virus di bawah tingkat tertentu, diagnosis negatif dibuat, dan jika lebih tinggi, yang positif.

Ada dua jenis tes darah menggunakan metode PCR untuk hepatitis: analisis kuantitatif dan analisis kualitatif.

PCR kuantitatif, seperti yang disebutkan di atas, menentukan konsentrasi RNA dari virus hepatitis. Selain itu, ia mampu memberikan informasi tentang intensitas perkembangan patologi, dan efektivitas pengobatan yang ditentukan. Analisis kuantitatif hepatitis C sangat penting karena memperbaiki resistensi terhadap aksi obat antiviral dan memungkinkan Anda menyesuaikan terapi.

Setelah pasien menjalani pengobatan, PCR membantu menentukan urutan janji selanjutnya. Dalam beberapa kasus, kebutuhan akan survei tambahan. Sebagai contoh, jika tingkat ALP meningkat (tetapi tidak lebih dari 2 kali dalam enam bulan), dan transkrip analisis menunjukkan viral load di atas 105 IU / ml, pasien diresepkan biopsi. Jika analisis kuantitatif PCR mengungkapkan peradangan dan fibrosis yang kuat, pasien diresepkan pengobatan dengan obat antiviral.

Dalam situasi di mana sejumlah besar partikel virus dikombinasikan dengan ALT yang tinggi, pasien harus segera diobati tanpa tindakan diagnostik tambahan.

Ikuti tes ini dan cari tahu apakah Anda memiliki masalah hati.

Hanya spesialis yang berkualitas dan berpengalaman yang dapat menguraikan secara kualitatif dalam analisis kuantitatif darah untuk hepatitis, dan teknologi modern membantu untuk melakukan ini dengan konsentrasi virus yang rendah dalam darah.

Analisis kualitatif PCR bertujuan untuk menentukan dan mengkonfirmasi keberadaan sebenarnya dari virus di dalam tubuh. Ini dilakukan ketika antibodi terhadap hepatitis dideteksi dalam darah. Ini adalah analisis kualitatif hepatitis yang menjamin keakuratan hasilnya dengan 100% dan memungkinkan Anda untuk membuat diagnosis pada tahap awal penyakit, yang memungkinkan untuk memulai memerangi hepatitis sudah selama minggu-minggu pertama setelah infeksi dan meningkatkan kemungkinan pemulihan lengkap (dalam kasus penyakit B).

Manfaat PCR

Dalam studi PCR dan mengartikan tes darah untuk hepatitis, Anda juga dapat menentukan genotipe patogen. Secara total, ada 6 genotipe virus dan sejumlah besar subtipe, namun di wilayah kami, 1, 2, dan 3 genotipe telah menjadi umum.

Keuntungan lain dari jenis diagnosis ini adalah:

  • akurasi tinggi dari indikator yang diperoleh dan probabilitas kesalahan yang rendah di dalamnya;
  • sensitivitas tingkat tinggi terhadap partikel virus dalam darah;
  • kemungkinan mengidentifikasi beberapa patogen sekaligus;
  • diagnosis mikroorganisme intraseluler patogen dengan variabilitas antigenik yang tinggi;
  • Bekerja dengan decoding dari analisis untuk hepatitis memungkinkan Anda untuk mendeteksi infeksi yang tersembunyi saat ini.

Siapa yang ditunjuk

Kategori orang berikut harus lulus analisis PCR untuk hepatitis:

  • wanita hamil;
  • staf perawatan kesehatan;
  • donor darah dan organ potensial;
  • mereka yang memiliki tanda-tanda khas penyakit;
  • Orang yang terinfeksi HIV;
  • pecandu narkoba;
  • promiscuous.

Bagaimana analisis dilakukan dan apakah perlu untuk mempersiapkannya

Pengambilan sampel darah untuk PCR dilakukan dari vena. Sebagai aturan, ini terjadi pada pagi hari sebelum orang tersebut makan, karena setelah makan makan, setidaknya 8 jam harus berlalu. Dalam kasus ekstrim, darah dapat diambil untuk pemeriksaan siang atau malam hari, tetapi kesenjangan waktu antara analisis dan asupan makanan harus setidaknya 5 jam.

Faktor manusia secara kuantitatif dapat mempengaruhi hasil: keakuratannya dalam beberapa kasus menurun dari 100% menjadi 95%, oleh karena itu perlu dipersiapkan untuk donor darah terlebih dahulu. Kualitas biomaterial untuk analisis akan sesuai ketika pasien mengikuti aturan berikut:

  • sebelum memberikan darah, Anda hanya bisa minum air bersih;
  • dua hari sebelum penelitian, Anda perlu menolak untuk menerima makanan yang digoreng dan berlemak, serta minuman beralkohol;
  • satu hari sebelum kunjungan ke laboratorium harus berhenti minum obat. Jika ini tidak mungkin, sangat penting untuk memberi tahu teknisi laboratorium dan dokter yang merawat;
  • sehari sebelum Anda perlu menghindari situasi stres dan aktivitas fisik;
  • USG, X-ray dan pemeriksaan instrumen seharusnya tidak dilakukan sesaat sebelum donor darah;
  • dalam satu jam sebelum analisis, Anda harus menahan diri dari merokok;
  • 20 menit sebelum menyumbangkan darah, Anda perlu terganggu, tenang, dan bernapas.

Jika seorang anak di bawah 5 tahun melewati studi, orang tua harus memastikan bahwa dia minum air mendidih setiap 10 menit selama setengah jam sebelum mengambil biomaterial.

Dekripsi data yang diterima

Pengkodean analisis dapat diwakili oleh kata-kata (dalam kasus studi kualitatif), misalnya, "tidak terdeteksi" atau "di bawah kisaran perubahan". Dalam kasus pertama, ini menunjukkan bahwa infeksi tidak terdeteksi. Di kedua - bahwa virus hadir, tetapi dalam jumlah kecil. Situasi ini membutuhkan penelitian ulang.

Viral load ditentukan oleh jumlah RNA yang menular dan disebut sebagai IU / ml atau salinan / ml.

Indikator normal (norma) dari analisis kuantitatif untuk hepatitis C adalah kisaran dari 1.8x102 ke 2.4x107 IU / ml.

Konsentrasi virus dalam darah dapat berupa:

  • rendah: dari 600 IU / ml hingga 3x10 4 / ml;
  • sedang: dari 3x10 4 IU / ml hingga 8x10 5 IU / ml;
  • tinggi: lebih dari 8x10 5 IU / ml.

Analisis kuantitatif dan kualitatif PCR untuk hepatitis memungkinkan untuk menentukan keberadaan virus di dalam tubuh dan tingkat konsentrasinya. Reaksi berantai multi-dimensi mampu mendiagnosis penyakit pada tahap awal, tetapi untuk ini perlu bahwa pasien sesegera mungkin menghubungi lembaga medis untuk bantuan dan secara ketat mengikuti rekomendasi dari dokter yang hadir.

Analisis PCR Hepatitis

PCR untuk hepatitis C

  1. Hepatitis C RNA ("PCR kualitatif") - deteksi dalam tes darah adalah bukti hepatitis C akut atau kronis. Hal ini ditentukan dari minggu ke-2 infeksi, muncul sebelum anti-HCV, yang memungkinkan Anda untuk mendiagnosis penyakit pada tahap awal. RNA ditentukan pada pasien dengan klinik hepatitis akut dan pada mereka dengan hasil hepatitis positif.
  2. Hepatitis C RNA ("PCR kuantitatif") - viral load adalah salah satu indikator efektivitas terapi antivirus dan penilaiannya (oleh perubahan tingkat dari nilai awal). Karakterisasi kuantitatif dari konten RNA hepatitis C penting untuk menilai efektivitas terapi antiviral dan memiliki signifikansi prognostik untuk menentukan kronisitas. Pasien dengan viral load yang tinggi (jumlah RNA tinggi) sebelum pengobatan berespon kurang baik terhadap pengobatan.
  3. Hepatitis C RNA (genotipe 1, 2, 3) - jenis taktik pengobatan dan keefektifannya tergantung pada jenisnya. Penyakit yang disebabkan oleh virus genotipe 1 adalah yang paling tidak baik dalam kaitannya dengan prediksi efektivitas terapi. Menurut rekomendasi saat ini, tes darah bagi kita untuk genotipe hepatitis C harus dilakukan pada pasien sebelum dimulainya terapi antiviral.
  4. Hepatitis C RNA (diperpanjang genotyping 1a, 1b, 2, 3a, 4, 5, 6) - 1a, 1b, 2a, 2c, 2k, 3a subtipe beredar di Rusia. Hepatitis C, yang disebabkan oleh genotipe 1 dan 4 virus, adalah yang paling tidak baik untuk prognosis.
  5. Ultrasensitif Hepatitis C PCR (metode kualitatif) - analisis ini digunakan untuk mendiagnosis penyakit pada tahap awal infeksi, optimal untuk menguji darah donor dan mengevaluasi respon terhadap pengobatan antivirus. Penelitian ini, bahkan tanpa deteksi antibodi terhadap virus hepatitis C, direkomendasikan untuk pasien dengan penyakit hati penyebab yang tidak spesifik, imunodefisiensi didapat, atau menerima terapi imunosupresif.
  6. Ultra-sensitive Hepatitis C PCR (metode kuantitatif) adalah tes sensitivitas tinggi yang unik (10 IU / ml) untuk menentukan RNA virus hepatitis C secara kuantitatif. Penelitian ini digunakan untuk memantau efektivitas terapi.

PCR untuk hepatitis B

  1. DNA Hepatitis B (analisis kualitatif) adalah indikator penggandaan virus hepatitis B. Ini muncul pertama kali dalam darah, rata-rata, 1 bulan setelah infeksi. Dalam beberapa kasus, adalah satu-satunya penanda infeksi HBV laten. Menentukan DNA virus memungkinkan seseorang untuk mendiagnosis hepatitis B yang disebabkan oleh strain mutan, yang tidak mengungkapkan penanda infeksi lainnya.
  2. Hepatitis B DNA (analisis kuantitatif) - Konsentrasi DNA (viral load) adalah salah satu tes untuk menentukan stadium hepatitis B kronis dan kriteria efektivitas terapi antivirus. Analisis dilakukan sebelum dan selama proses pengobatan.
  3. Genotyping hepatitis B - penyakit yang disebabkan oleh genotipe yang berbeda dari virus mungkin berbeda dalam hal klinis dan hasil. Hepatitis B, yang disebabkan oleh genotipe C virus, lebih mungkin untuk mengambil kursus kronis dan memiliki risiko tinggi transformasi menjadi sirosis hati atau karsinoma hepatoseluler. Pasien yang terinfeksi dengan genotipe A merespon lebih baik terhadap pengobatan.
  4. PCR DNA ultrasensitif untuk hepatitis B (metode kualitatif) - mereka diserahkan untuk deteksi dini penyakit ini. Sangat informatif dalam studi donor darah. Ini dapat digunakan untuk mengkonfirmasi penghapusan virus secara spontan atau diinduksi oleh pengobatan dari tubuh manusia.
  5. PCR yang sangat sensitif untuk hepatitis C (metode kuantitatif) - diagnosis DNA virus hepatitis B secara kuantitatif. Analisis dilakukan untuk menilai efektivitas terapi.
  6. Penentuan mutasi resistansi terhadap obat antiviral lamivudine, telbivudine, entecavir, adefovir, tenofovir (diserahkan bersama dengan analisis "DNA hepatitis B kuantitatif"). Penting untuk menyerahkan analisis kepada pasien dengan hepatitis B kronis sebelum memulai terapi antiviral dan saat mengambil obat. Hasilnya berisi informasi tentang keberadaan resistensi virus hepatitis B terhadap obat antiviral:
    • R - virus resisten terhadap obat antiviral (mutasi resistansi terhadap obat ini ditemukan);
    • S - virus hepatitis B sensitif terhadap obat (nilai normal, mutasi resistan tidak terdeteksi);
    • I - agen penyebab infeksi dapat mengembangkan resistansi terhadap obat ini.

Penelitian PCR untuk hepatitis C: jenis, indikasi, transkrip

Viral hepatitis C adalah penyakit serius yang terjadi dengan kerusakan pada hati. Dalam delapan puluh persen pasien, itu menjadi kronis. Virus berkembang biak di sel-sel hati - hepatosit - dan menyebabkan kematian mereka. Jaringan mati digantikan oleh fokus jaringan ikat, fibrosis berkembang.

Ketika fibrosis berkembang, hati tidak dapat melakukan fungsinya, sirosis hati dimulai, yang berbahaya karena komplikasinya: peningkatan tekanan dalam sistem vena portal, perdarahan gastrointestinal, gangguan pembekuan darah, perubahan mental karena kerusakan pada nuklei otak.

Penyebab penyakit ini adalah infeksi oleh virus dari keluarga Flaviviridae, yang termasuk jenis virus RNA. Ini berarti bahwa bahan genetik dimana protein dari patogen disintesis dikodekan dalam molekul asam ribonukleat. Infeksi terjadi melalui darah, seksual, dan dari wanita hamil ke janin. Sayangnya, waktu yang cukup lama dapat terjadi antara infeksi dan dimulainya produksi antibodi - dari dua minggu hingga enam bulan. Ini tidak memungkinkan untuk menentukan infeksi dengan metode immunoassay dan memulai perawatan pada tahap awal.

Apa itu analisis PCR?

PCR adalah metode analisis molekuler, yang memungkinkan untuk mendeteksi bahan genetik dari patogen yang sudah ada dalam minggu pertama setelah infeksi menggunakan reaksi berantai polymerase. Studi ini memiliki spesifisitas yang tinggi, akurasi, dan memungkinkan tidak hanya untuk menentukan ada tidaknya virus, tetapi juga konsentrasi dan genotipe.

Untuk penelitian, darah pasien diambil di mana RNA virus berpotensi berada. Primer ditambahkan ke darah - daerah buatan yang disintesis dari gen yang diinginkan dengan panjang kecil, dan RNA polimerase adalah enzim khusus yang berulang kali meningkatkan jumlah materi genetik patogen. Dengan menggunakan peralatan khusus, beberapa siklus pemanasan dan pendinginan dilakukan. Kemudian bahan dianalisis dan dibandingkan dengan gen virus yang diketahui, atas dasar kesimpulan yang dibuat tentang ada atau tidak adanya infeksi.

Jenis analisis PCR untuk hepatitis C

Ada tiga jenis analisis PCR:

  1. Analisis kualitatif PCR. Tahap pertama penelitian. Ini memungkinkan Anda mengidentifikasi bahan genetik virus di dalam darah.

  • Analisis kuantitatif PCR. Memungkinkan Anda untuk menentukan viral load - konsentrasi bahan genetik patogen dalam satu mililiter darah. Penelitian ini dilakukan sebelum dimulainya terapi, dan kemudian pada sesi pertama, keempat, kedua belas, dan (jika perawatannya panjang) dua puluh empat minggu untuk mengevaluasi keefektifannya.

  • Genotyping Agen penyebab hepatitis C sering dan cepat bermutasi. Ada tujuh varian genotipe virus yang ditemukan di planet ini. Di Rusia, jenis pertama, kedua dan ketiga adalah umum. Masing-masing genotipe memiliki ketahanan yang berbeda terhadap terapi, misalnya, efektivitas pengobatan jenis pertama adalah enam puluh persen, dan untuk yang kedua dan ketiga angka ini mencapai delapan puluh lima. Oleh karena itu, untuk memilih obat yang tepat dan meresepkan pengobatan jangka waktu yang cukup, perlu ditentukan dengan tepat jenis virus apa yang terinfeksi oleh pasien.
  • Indikasi untuk analisis PCR untuk hepatitis C

    Studi PCR diresepkan dalam kasus-kasus berikut:

    • kontak dengan orang yang sakit di mana infeksi bisa terjadi;
    • immunoassay enzim positif;
    • tanda-tanda sirosis: perubahan ukuran hati, pembesaran limpa, penampilan di perut pleksus vena subkutan;
    • munculnya gejala kerusakan hati: nyeri di perut kanan, menguningnya kulit;
    • peningkatan aktivitas ALT dan AST dalam analisis biokimia darah;
    • sebelum memulai pengobatan untuk menentukan viral load;
    • untuk memantau efektivitas terapi antiviral;
    • setelah perawatan untuk mengendalikan kekambuhan;
    • di hadapan didiagnosis hepatitis B, untuk mengecualikan kerusakan hati campuran.

    Penjelasan studi PCR tentang hepatitis C

    Decoding analisis PCR dan immunoassay enzim untuk hepatitis C harus dilakukan oleh spesialis penyakit hepatologi atau infeksi. Menganalisis hasil PCR diperlukan dalam kombinasi dengan data analisis biokimia darah, biopsi dan ultrasound. Hanya dokter yang memenuhi syarat yang akan dapat menganalisis hasil penelitian dan, berdasarkan mereka, meresepkan perawatan yang benar.

    Decoding analisis kualitatif.

    Dalam bahan biologis yang dianalisis ditemukan bahan genetik dari patogen. Infeksi dikonfirmasi.

    Infeksi tidak ada, atau jumlah RNA patogen di bawah batas sensitivitas.

    Decoding analisis kuantitatif.

    Tingkat normal untuk orang sehat. Ini berarti bahwa tidak ada RNA hepatitis C dalam materi yang diteliti, atau konsentrasinya di bawah ambang sensitivitas penelitian.

    Konsentrasi RNA berada di bawah kisaran kuantifikasi. Hasil ini diinterpretasikan dengan sangat hati-hati, menghubungkan mereka dengan data dari penelitian lain, sering kali dipelajari kembali.

    Tingkat viral load pada konsentrasi yang diberikan dianggap rendah. Biasanya, penurunan jumlah virus berarti bahwa terapi tersebut berhasil.

    Lebih dari 8 * 10 ^ 5 IU / ml

    Tingkat viral load pada konsentrasi yang diberikan dianggap tinggi.

    Lebih dari 2,4 * 10 ^ 7 IU / ml

    Jumlah RNA di atas batas atas rentang kuantifikasi. Tidak mungkin untuk menarik kesimpulan tentang tingkat viral load dengan hasil ini. Biasanya dalam kasus seperti itu, tes diulang dengan pengenceran sampel darah.

    Decoding genotyping.

    Terdeteksi RNA dari genotipe tertentu

    Virus Hepatitis C dari genotipe dan subtipe tertentu terdeteksi dalam biomaterial. Hasilnya dikodekan dalam angka Romawi dan huruf Latin, misalnya - 1a, 2b. Secara total ada tujuh genotipe dan enam puluh tujuh subtipe, namun, di Rusia hanya ada tiga jenis pertama.

    Hepatitis C virus RNA terdeteksi

    RNA ditemukan dalam darah genotipe langka untuk Rusia, yang tidak dapat dikaitkan dengan tipe pertama, kedua, atau ketiga. Lebih banyak penelitian diperlukan.

    Hasil ini menunjukkan bahwa pasien sehat, atau bahwa jumlah RNA patogen terlalu kecil.

    Ada kemungkinan bahwa analisis PCR untuk hepatitis C negatif, dan assay immunosorbent terkait enzim mengenali antibodi terhadap virus. Ini berarti bahwa pasien menderita hepatitis C akut dan sembuh sendiri. Sekitar dua puluh kasus infeksi menghasilkan pemulihan spontan jika tubuh pasien memiliki ketahanan yang cukup terhadap infeksi.

    Meskipun PCR adalah tes yang sangat akurat, hasilnya mungkin terdistorsi dalam situasi berikut:

    • darah diangkut ke laboratorium dalam kondisi yang tidak sesuai, suhu dilanggar;
    • sampel biomaterial terkontaminasi;
    • ada jejak sisa heparin dan antikoagulan lainnya di dalam darah;
    • Peneliti ditemukan sebagai inhibitor - zat yang memperlambat atau menghentikan reaksi berantai polymerase.

    Keunggulan PCR dibanding metode lainnya

    1. Diagnosa pada tahap awal. PCR mendeteksi materi genetik dari agen penyebab. Dengan menggunakan analisis imunofluoresensi, hanya imunoglobulin yang dapat ditentukan - zat yang diproduksi tubuh sebagai respons terhadap infeksi. Dalam kasus infeksi hepatitis C, interval antara infeksi dan permulaan respon imun mungkin beberapa minggu dan bulan, saat ini ELISA tidak akan efektif. PCR akan memberikan jawaban pada minggu pertama setelah infeksi.

  • Probabilitas kesalahan rendah. Dalam materi yang diteliti menentukan luas materi genetik, yang merupakan karakteristik dari hanya satu jenis patogen. Ini menghilangkan hasil yang salah. Ketika kesalahan ELISA dimungkinkan, karena jenis antibodi yang sama dapat dilepaskan terhadap virus yang berbeda - antibodi tersebut disebut antibodi silang.

  • Sensitivitas tinggi. PCR memungkinkan untuk mendeteksi RNA agen penyebab bahkan dalam jumlah minimal. Ini memungkinkan untuk mengidentifikasi infeksi yang tersembunyi.
  • Cara mempersiapkan donor darah untuk studi PCR

    Untuk analisis PCR hepatitis C, darah vena dikumpulkan. Biasanya, dua bagian darah diambil dari pembuluh darah pasien pada saat yang sama: yang pertama dikirim untuk PCR dan yang kedua oleh ELISA. Hal ini dilakukan untuk lebih akurat menilai berapa banyak pasien terinfeksi virus, dan bagaimana kekebalan melawannya.

    Biasanya pasien harus mematuhi aturan berikut:

    • tes darah diambil di pagi hari;
    • Interval antara makanan terakhir dan donor darah harus delapan hingga sepuluh jam;
    • dua atau tiga hari sebelum analisis, perlu untuk meninggalkan makanan yang digoreng dan berlemak, dan alkohol;
    • selama dua puluh empat jam sebelum analisis, pasien harus menghindari aktivitas fisik: jangan membawa beban, jangan pergi ke gym atau kolam renang.

    Biaya tes darah dan PCR untuk hepatitis C

    Hepatitis C adalah patologi inflamasi di mana sel-sel hati terpengaruh. Penyakit berkembang sebagai hasil dari penetrasi virus hepatitis C (HVC) ke dalam tubuh manusia.

    Bentuk penyakitnya bisa akut atau kronis.

    Paling sering, gejala bentuk akut patologi pada kebanyakan pasien tidak ada, kadang-kadang penyakit disertai dengan sensasi nyeri di perut, penurunan kinerja, peningkatan kelelahan, kehilangan nafsu makan, warna gelap urin, perubahan warna tinja, kekuningan pada kulit dan selaput lendir, nyeri sendi. Gejala seperti itu biasanya terjadi 6-8 minggu setelah infeksi, tetapi bisa muncul setelah enam bulan.

    Dengan berkembangnya fenomena semacam itu, perlu menghubungi institusi medis dan menjalani pemeriksaan menyeluruh terhadap keseluruhan organisme. Sebagai bagian dari pemeriksaan medis, tes darah untuk hepatitis C dilakukan.

    Hari ini, dengan bantuan teknik diagnostik modern, patologi ini dapat diidentifikasi pada tahap awal perkembangan, yang sangat meningkatkan kemungkinan penyembuhan lengkap penyakit.

    Kelompok orang berikut diminta untuk menguji hepatitis C:

    • wanita dalam periode menggendong anak;
    • orang dengan tanda-tanda hepatitis;
    • staf medis;
    • organ potensial dan donor darah;
    • pecandu narkoba, orang yang terinfeksi HIV, kehidupan intim promiscuous.

    Daftar studi yang diperlukan

    Tes apa yang harus saya ambil untuk hepatitis C? Untuk secara akurat mendiagnosis penyakit, mengidentifikasi penyebabnya dan menentukan keadaan parenkim hati, diperlukan penelitian berikut:

    • urin umum dan tes darah;
    • analisis biokimia darah;
    • Analisis PCR;
    • tes darah untuk mendeteksi antibodi terhadap HVC;
    • tes darah untuk antibodi yang ada ke sel-sel hatinya sendiri;
    • biopsi hati.

    Tes darah decoding untuk hepatitis C dilakukan oleh seorang spesialis. Pertimbangkan setiap metode penelitian secara lebih rinci, serta kita akan memahami analisis hepatitis C mana yang paling akurat.

    Analisis umum

    Saat melakukan tes darah umum untuk hepatitis C, Anda dapat mengevaluasi kondisi pasien. Perubahan parameter darah tidak dianggap sebagai gejala spesifik hepatitis, namun, dengan penyakit ini, ada gangguan seperti:

    • mengurangi konsentrasi hemoglobin, trombosit dan leukosit;
    • meningkatkan isi limfosit;
    • pembekuan darah dilanggar;
    • laju endap darah (LED) meningkat.

    Analisis umum urin memungkinkan untuk mendeteksi dalam komposisi urobelin - pigmen empedu yang terjadi di urin sebagai akibat gangguan fungsi hati.

    Analisis biokimia

    Analisis biokimia darah dalam hepatitis C memungkinkan untuk mengidentifikasi gangguan seperti:

    • peningkatan kadar enzim hati (alanin transaminase - ALT dan aspartat aminotransferase - AST), yang memasuki darah ketika hepatosit rusak. Dalam keadaan normal, indikator ini untuk pria tidak boleh lebih dari 37 IU / l, untuk wanita - tidak lebih tinggi dari 31 IU // l. Peningkatan konsentrasi ALT dan AST pada hepatitis C asimptomatik sering merupakan satu-satunya gejala penyakit ini. Selain itu, darah glutamyl transpeptidase alkaline phosphatase meningkat (biasanya tidak lebih tinggi dari 150 IU / l).
    • kandungan bilirubin (baik umum maupun langsung) dalam darah terlampaui. Jika tingkat pigmen kuning dalam serum melebihi 27-34 μmol / l, terjadi ikterus (hingga 80 µmol / l dalam bentuk ringan, 86-169 µmol / l - dalam tingkat sedang, di atas 170 µmol / l - dalam bentuk parah).
    • Tingkat albumin diturunkan, konsentrasi gamma globulin, sebaliknya, meningkat. Gamma globulin terdiri dari imunoglobulin - antibodi yang melindungi tubuh terhadap zat-zat penyebab penyakit.
    • peningkatan konsentrasi trigliserida dalam darah.

    Tes PCR

    Dengan menggunakan teknik PCR, adalah mungkin untuk mendiagnosa agen penyebab penyakit. Melakukan analisis ini memungkinkan untuk mendeteksi virus dalam darah, meskipun jumlahnya sedikit. Analisis PCR untuk hepatitis C memungkinkan untuk menentukan infeksi yang ada di dalam darah setelah 5 hari sejak saat infeksi, yaitu, jauh sebelum antibodi muncul.

    Jika hasil tes darah untuk hepatitis C oleh PCR positif, ini menunjukkan adanya infeksi aktif dalam tubuh. Dengan menggunakan metode ini, Anda dapat melakukan studi kualitatif dan kuantitatif RNA HVC.

    Dalam proses analisis kualitatif PCR untuk hepatitis C, adalah mungkin untuk mendeteksi virus yang ada di tubuh manusia.

    Prosedur diagnostik ini dilakukan jika anti-HVC terdeteksi dalam darah.

    Menguraikan analisis untuk hepatitis C berisi informasi bahwa infeksi telah terdeteksi atau tidak terdeteksi di dalam tubuh. Biasanya, tidak ada substansi patologis yang ditemukan di dalam darah.

    Jika tes hepatitis C positif, itu berarti bahwa patogen terus membelah dan menginfeksi sel-sel hati.

    Hasil analisis ini mungkin tidak dapat diandalkan, mungkin dalam kasus-kasus berikut:

    • biomaterial yang terkontaminasi digunakan;
    • di hadapan heparin dalam darah;
    • di hadapan zat kimia atau protein (inhibitor) dalam mempelajari biomaterial, mempengaruhi unsur-unsur PCR.

    Analisis kuantitatif hepatitis C memberikan informasi tentang jumlah virus yang terkandung dalam darah, yaitu, menentukan viral load. Dengan konsep ini berarti volume HVC RNA hadir dalam darah (misalnya, dalam 1 ml). Dalam interpretasi analisis kuantitatif untuk hepatitis C, nilai ini dinyatakan dalam ekuivalen digital, diukur dalam IU / ml.

    Darah untuk PCR untuk hepatitis C diambil sebelum tindakan terapeutik. Setelah analisis dilakukan pada 1, 4, 12 dan 24 minggu. Penelitian pada minggu ke 12 adalah indikatif dan dilakukan untuk menilai efektivitas prosedur medis.

    Jika tes untuk hepatitis C selama kehamilan positif dan jumlah viral load terlampaui, risiko penularan patogen dari ibu yang sakit ke anak meningkat beberapa kali. Juga, dengan peningkatan viral load yang tinggi, pelaksanaan tindakan terapeutik sulit dilakukan.

    Menurut transkrip tes untuk hepatitis C, jika nilai viral load melebihi 800.000 IU / ml, maka itu tinggi. Jika angkanya di bawah 400.000 IU / ml, tingkat viral load dianggap rendah.

    Analisis hepatitis C oleh PCR dianggap yang paling akurat dan memiliki beberapa keunggulan dibandingkan pilihan penelitian lain, yaitu:

    • diagnosis langsung dari agen penyebab penyakit. Ketika melakukan penelitian tradisional ditentukan oleh adanya penanda protein yang merupakan produk limbah patogen. Ini hanya menunjukkan bahwa infeksi ada dalam darah. Ketika menguji untuk hepatitis C oleh PCR, adalah mungkin untuk menentukan jenis patogen patologi berbahaya.
    • spesifisitas teknik. Selama prosedur ini, wilayah DNA yang unik ditentukan dalam biomaterial yang berhubungan dengan hanya satu jenis patogen. Ini meminimalkan kemungkinan hasil yang salah.
    • sensitivitas tinggi. Saat melakukan analisis PCR, Anda dapat mendeteksi jumlah minimum virus. Ini penting jika zat patogen kondisional diidentifikasi yang menimbulkan ancaman hanya jika tingkatnya meningkat.
    • Ketika menggunakan teknik ini dalam satu sampel biomaterial, beberapa patogen dapat dideteksi sekaligus.
    • dapat mendeteksi infeksi yang tersembunyi. Selain itu, analisis memungkinkan Anda untuk mendiagnosis mikroorganisme patogen yang hidup di dalam sel dan memiliki variabilitas antigenik yang tinggi.

    Jika hasil tes positif, maka jejak virus ditemukan dalam biomaterial, maka jaringan tersebut memiliki infeksi di dalam tubuh.

    Analisis PCR negatif untuk hepatitis C berarti bahwa tidak ada jejak infeksi di biomaterial.

    Penelitian imunologi

    Metode ini memungkinkan Anda untuk mengidentifikasi antibodi untuk semua jenis virus hepatitis, serta antibodi terhadap sel-sel hati dari tubuh Anda sendiri, penampilan yang berkontribusi pada pengembangan hepatitis autoimun.

    Hasil yang diperoleh selama penelitian ini relevan selama 3 bulan, maka Anda harus menyumbangkan kembali darah untuk hepatitis C.

    Juga dimungkinkan untuk melakukan penelitian tersurat menggunakan strip tes khusus. Analisis ini memungkinkan untuk menentukan antibodi terhadap virus C dalam komposisi darah dan air liur.Prosedur ini dapat dilakukan secara mandiri, di rumah.

    Biopsi hati

    Untuk melakukan analisis seperti itu, elemen dari parenkim hati diambil dan pemeriksaan histologis dari biomaterial yang diperoleh dilakukan. Ini memungkinkan Anda untuk menilai kondisi tubuh: untuk mengidentifikasi inflamasi, fokus nekrotik, tahap fibrosis dan sebagainya.

    Hari ini, tes yang menggantikan analisis histologis parenkim hepatik digunakan.

    Untuk menilai tahap kerusakan hati dan intensitas proses inflamasi, digunakan biomarker darah vena spesifik. Menggunakan FibroTest, Anda dapat menilai tingkat pertumbuhan jaringan fibrosa.

    Saat melakukan Actitest Anda bisa mendapatkan informasi tentang intensitas proses patologis di parenkim hati. Menggunakan Steatototesta dapat mendiagnosis jaringan lemak hati dan menilai sejauh mana proses ini. Fibromax terdiri dari semua tes di atas dan mungkin termasuk beberapa penelitian lain.

    Persiapan untuk belajar

    Tes apa yang diambil untuk hepatitis C dan bagaimana kami menemukan jenis penelitian ini atau itu. Sama pentingnya untuk mengetahui bagaimana mempersiapkan analisis.

    Untuk mendapatkan hasil yang dapat diandalkan, disarankan untuk mematuhi persyaratan berikut:

    • Tes hepatitis C harus dilakukan di pagi hari, saat perut kosong. Terakhir kali makanan harus dikonsumsi setidaknya 8 jam sebelum penelitian.
    • Biomaterial dapat dikumpulkan di siang hari atau di malam hari. Dalam hal ini, penting bahwa setidaknya 5-6 jam melewati antara makanan terakhir dan analisis.
    • sebelum menyumbangkan darah untuk hepatitis C, teh, kopi, jus atau minuman lain harus dibuang, hanya air yang diizinkan.
    • 48 jam sebelum studi, perlu untuk mengecualikan penggunaan makanan berlemak, makanan yang digoreng dan minuman yang mengandung alkohol.
    • setidaknya satu jam sebelum analisis, Anda harus menahan diri dari merokok.
    • Analisis tidak boleh dilakukan segera setelah pemeriksaan ultrasonografi, instrumental, X-ray, pijat atau fisioterapi.
    • satu hari sebelum pelaksanaan penelitian, diperlukan untuk mengecualikan penggunaan obat dan aktivitas fisik intensif. Stres emosional juga kontraindikasi.
    • Disarankan untuk menghabiskan 15 menit sebelum melakukan penelitian dalam keadaan tenang.

    Melaksanakan prosedur pengumpulan darah

    Di mana bisa dites untuk hepatitis C? Pengambilan sampel biomaterial untuk penelitian lebih lanjut dilakukan di laboratorium institusi medis atau di rumah pasien.

    Darah dari pembuluh darah diambil sebagai berikut:

    • dengan bantuan tourniquet khusus melilit lengan bawah pasien, aliran darah vena dihentikan. Berkat manipulasi tersebut, pembuluh darah akan penuh dengan darah dan akan lebih terlihat, yang akan sangat memudahkan proses memasukkan jarum.
    • daerah kulit di mana jarum akan dimasukkan secara hati-hati diperlakukan dengan alkohol atau cairan yang mengandung alkohol.
    • Sebuah jarum dimasukkan dengan hati-hati ke dalam pembuluh darah, lalu tabung tes melekat padanya, yang khusus dirancang untuk mengumpulkan darah.
    • Segera setelah jarum dimasukkan ke dalam vena, harness yang menekan dikeluarkan dari lengan pasien.
    • setelah volume darah yang diperlukan untuk analisis telah dikumpulkan, jarum perlahan dikeluarkan dari vena.
    • cotton bud steril atau pad kasa yang dibasahi dengan alkohol harus dioleskan ke tempat suntikan.
    • untuk mencegah terjadinya hematoma, tampon harus ditekan dengan beberapa upaya melawan daerah penyisipan jarum, tekuk lengan di sendi siku dan tahan dalam posisi ini selama beberapa menit. Tindakan semacam itu juga akan membantu menghentikan darah lebih cepat.

    Asalkan teknik administrasi internal baik, prosedur ini benar-benar aman dan tidak menyebabkan sensasi nyeri.

    Dalam kasus yang jarang terjadi, setelah pengumpulan darah, vena bisa membengkak. Fenomena ini disebut "flebitis." Kompres (tidak panas) akan membantu memecahkan masalah, itu harus diterapkan pada daerah kulit yang bengkak beberapa kali sehari.

    Masalah-masalah tertentu juga bisa terjadi jika ada gangguan pendarahan. Mengambil aspirin, warfarin, dan pengencer darah lainnya dapat menyebabkan perdarahan. Itu sebabnya sebelum melakukan analisis itu diperlukan untuk menolak mengambil obat apa pun. Jika perawatan tidak bisa dibatalkan, Anda harus memberi tahu spesialis.

    Tanggal dan harga

    Berapa banyak yang diuji untuk hepatitis C? Hasil tes darah untuk hepatitis dapat siap dalam beberapa jam, dan dalam beberapa hari (sebagai aturan, tidak lebih dari 8 hari). Durasi persiapan hasil tergantung pada jenis virus dan metode analisis yang dipilih. Lebih cepat adalah studi yang dilakukan dengan metode PCR. Hasilnya dalam kasus ini akan siap hanya dalam beberapa jam.

    Berapa biaya tes hepatitis C? Tergantung pada klinik dan kompleksitas penelitian, harga prosedur dapat bervariasi dari 400 hingga 11.000 rubel.

    Anda harus menyadari bahwa mungkin diperlukan waktu beberapa minggu untuk membentuk jumlah antibodi yang cukup untuk HVC. Oleh karena itu, pada tahap awal dalam pengembangan patologi, hasil dari suatu penelitian mungkin salah-negatif.

    Selain itu, memperoleh data yang tidak dapat diandalkan mungkin dengan analisis berkualitas buruk dan pelanggaran kondisi transportasi dari biomaterial yang diperoleh (sampel harus dikirim ke laboratorium maksimal 2 jam setelah pengambilan sampel darah).

    Jika hasil penelitian positif, Anda harus segera menghubungi dokter penyakit menular. Dokter spesialis akan melakukan pemeriksaan tambahan dan meresepkan perawatan yang tepat.

    Bagaimana memulihkan dari hepatitis C dengan kemungkinan 97%?

    Saat ini, obat modern dari generasi baru Sofosbuvir dan Daclatasvir kemungkinan untuk menyembuhkan hepatitis C sebesar 97-100%. Anda bisa mendapatkan obat-obatan terbaru di Rusia dari perwakilan resmi raksasa farmasi India Zydus Heptiza. Obat yang dipesan akan dikirim melalui kurir dalam waktu 4 hari, pembayaran setelah diterima. Dapatkan konsultasi gratis tentang penggunaan obat-obatan modern, serta pelajari cara mengakuisisi, Anda dapat menemukannya di situs resmi pemasok Zydus di Rusia.


    Artikel Terkait Hepatitis